本文選題：鼻咽腫瘤 + 組蛋白類　； 參考：《腫瘤》2014年10期

【摘要】：目的 :探討組蛋白H3第10位絲氨酸(serine 10,Ser10)磷酸化在調(diào)控鼻咽癌CNE1細(xì)胞增殖和惡性轉(zhuǎn)化中的作用及可能的作用機(jī)制。方法 :采用蛋白質(zhì)印跡法檢測表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)作用下鼻咽癌CNE1細(xì)胞中組蛋白H3Ser10磷酸化水平的改變;構(gòu)建組蛋白H3野生型(H3WT)和突變型(H3S10A)真核表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染CNE1細(xì)胞,采用殺稻瘟菌素篩選獲得穩(wěn)定過表達(dá)野生型或突變型組蛋白H3細(xì)胞株;蛋白質(zhì)印跡法檢測轉(zhuǎn)染組蛋白H3野生型和突變型重組質(zhì)粒后對CNE1細(xì)胞中組蛋白H3Ser10磷酸化水平的影響;采用CCK-8(cell counting kit-8)法和軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)檢測過表達(dá)野生型和突變型組蛋白H3對CNE1細(xì)胞增殖和克隆形成能力的影響;分別采用蛋白質(zhì)印跡法和雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測過表達(dá)野生型和突變型組蛋白H3對CNE1細(xì)胞中c-Jun、c-Fos和Bcl-2蛋白表達(dá)以及激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)轉(zhuǎn)錄活性的影響。結(jié)果 :EGF可誘導(dǎo)CNE1細(xì)胞中組蛋白H3Ser10磷酸化水平的上調(diào);成功構(gòu)建了穩(wěn)定過表達(dá)野生型和突變型組蛋白H3的CNE1細(xì)胞株,組蛋白H3Ser10位點(diǎn)的突變可明顯抑制EGF作用下組蛋白H3的磷酸化水平;與轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒細(xì)胞相比,過表達(dá)野生型組蛋白H3可促進(jìn)EGF作用下CNE1細(xì)胞增殖和軟瓊脂克隆形成能力,并且上調(diào)c-Jun和c-Fos蛋白的表達(dá)以及提高AP-1的轉(zhuǎn)錄活性,但過表達(dá)突變型組蛋白H3則沒有引起上述明顯的改變。結(jié)論 :組蛋白H3,尤其是組蛋白H3Ser10磷酸化,在調(diào)控EGF誘導(dǎo)的CNE1細(xì)胞增殖和惡性轉(zhuǎn)化中具有重要作用,其機(jī)制與促進(jìn)c-Jun和c-Fos基因的轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而增強(qiáng)AP-1的活性有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate the role and possible mechanism of phosphorylation of histone H3 in regulating proliferation and malignant transformation of nasopharyngeal carcinoma (CNE1) cells. Methods: the phosphorylation of histone H3Ser10 in nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE1 cells was detected by Western blotting, and the eukaryotic expression plasmids of histone H3 wild-type H3WTand mutant H3S10A were constructed and transfected into CNE1 cells. Overexpression wild type or mutant histone H3 cell lines were obtained by screening rice blast fungicide, and the effect of recombinant plasmid transfected with wild type of histone H3 and mutant plasmid on the phosphorylation of histone H3Ser10 in CNE1 cells was detected by Western blotting. The effects of overexpression of wild type and mutant histone H3 on the proliferation and clone formation of CNE1 cells were detected by CCK-8(cell counting kit-8 and soft Agar colony forming assay. The effects of overexpression of wild type histone H3 and mutant histone H3 on the expression of c-Junc-Fos and Bcl-2 protein and the transcriptional activity of activator protein-1AP-1 in CNE1 cells were detected by Western blotting and double luciferase reporter gene system, respectively. Results CNE1 cells were induced to up-regulate the level of histone H3Ser10 phosphorylation, and stable overexpression of wild type and mutant histone H3 was successfully constructed into CNE1 cell lines. The mutation of histone H3Ser10 site could significantly inhibit the phosphorylation of histone H3 under the action of EGF, and overexpression of wild histone H3 could promote the proliferation of CNE1 cells and the ability of soft Agar clone formation compared with empty plasmid cells transfected with EGF. The expression of c-Jun and c-Fos proteins and the transcriptional activity of AP-1 were up-regulated, but overexpression of mutant histone H3 did not cause these changes. Conclusion: histone H3, especially histone H3Ser10 phosphorylation, plays an important role in regulating the proliferation and malignant transformation of CNE1 cells induced by EGF, and its mechanism is related to promoting the transcription of c-Jun and c-Fos genes and thus enhancing the activity of AP-1.
【作者單位】： 廣東醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室;廣東醫(yī)學(xué)院廣東省醫(yī)學(xué)分子診斷重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:81071638) 湛江市科技攻關(guān)計劃項(xiàng)目(編號:2013B01074)
【分類號】：R739.63

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 劉華英;彭淑平;周鳴;李桂源;;鼻咽癌的表觀遺傳學(xué)研究進(jìn)展[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2007年07期

2 周長春;劉芝華;齊軍;;AP-1和腫瘤的關(guān)系研究進(jìn)展[J];世界華人消化雜志;2006年01期

3 李彬彬;黃國良;孔霞;李蓉;董子明;何志巍;;siRNA靶向干擾組蛋白H3表達(dá)對人鼻咽癌細(xì)胞增殖的抑制作用[J];中國病理生理雜志;2013年09期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 白倩;謝琦;彭曉莉;常徽;朱俊東;糜漫天;;二氫楊梅素通過抑制甲基轉(zhuǎn)移酶誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞PTEN基因去甲基化[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2014年01期

2 Ru Liu;Xiao-Huan Zhang;Kun Zhang;Wei Li;Wen-Jun Wang;Di-Xian Luo;Ling Gao;;5-Aza-2'-deoxycytidine inhibits retinoblastoma cell by reactivating epigenetically silenced RASSF1A gene[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2014年01期

3 Pei Liu;Xiao-Hai Yang;Qing Wang;Jing Huang;Jian-Bo Liu;Ying Zhu;Lei-Liang He;Ke-Min Wang;;Sensitive detection of DNA methyltransferase activity based on rolling circle amplification technology[J];Chinese Chemical Letters;2014年07期

4 王海超;張樂穎;刁其玉;;營養(yǎng)素對動物表觀遺傳的影響及其機(jī)制[J];動物營養(yǎng)學(xué)報;2014年09期

5 李夏雨;沈守榮;武明花;李小玲;熊煒;盧建紅;周鳴;馬健;向娟娟;曾朝陽;向波;周艷宏;肖嵐;周厚德;范松青;李桂源;;多基因遺傳性腫瘤不同階段轉(zhuǎn)錄組學(xué)調(diào)控規(guī)律及其分子機(jī)制[J];中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年07期

6 付倩;;β-arrestin在TLR-IL-1R系統(tǒng)中的角色[J];江西醫(yī)藥;2011年08期

7 盧丹;鄭立;王欣欣;王凡;唐婷;柳峰松;;家蠅Denfensin-1基因的克隆、誘導(dǎo)表達(dá)及啟動子活性分析[J];昆蟲學(xué)報;2013年08期

8 張勤奕;于蕾;潘麗麗;張茁;博力楊;李同勛;田迎春;;DNA甲基化在動脈粥樣硬化進(jìn)程中的作用[J];中國動脈硬化雜志;2013年12期

9 李文峰;鐘伯雄;蘇松坤;;蜜蜂級型分化機(jī)理[J];昆蟲學(xué)報;2014年02期

10 王利;張慶華;黃磊;吳汝芳;熊國平;張淳;;DNA甲基化介導(dǎo)Id4在宮頸癌中的表觀遺傳沉默[J];武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年03期

相關(guān)會議論文 前2條

1 劉福柱;;表觀遺傳學(xué)研究進(jìn)展簡評及其在未來家禽業(yè)中的應(yīng)用展望[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家禽學(xué)分會第九次代表會議暨第十六次全國家禽學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2013年

2 李文峰;鐘伯雄;蘇松坤;;蜜蜂級型分化機(jī)理[A];2014年全國蜂產(chǎn)品市場信息交流會暨中國（哈爾濱）蜂業(yè)博覽會論文集[C];2014年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王郁杰;吲哚美辛對結(jié)腸癌細(xì)胞成瘤裸鼠作用的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];中南大學(xué);2006年

2 張宇虹;shRNA抑制小鼠肝癌細(xì)胞株JNK表達(dá)及與淋巴道轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2009年

3 陳浮;鼻咽癌中Myocardin轉(zhuǎn)錄失活機(jī)制及其功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

4 王建杰;重組人乳鐵蛋白抗乳腺癌作用及其機(jī)制研究[D];燕山大學(xué);2012年

5 高飛;青黃散治療骨髓增生異常綜合征去甲基化作用效應(yīng)機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

6 李秋云;RSK4與BRCA1基因異常甲基化在乳腺癌發(fā)病機(jī)制中作用的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

7 李洪艷;甲基化對鱗癌細(xì)胞中巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶IV基因表達(dá)的調(diào)控及對細(xì)胞增殖影響的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

8 包通拉嘎;核小體結(jié)合模體的預(yù)測及它們在人類基因功能位點(diǎn)附近的分布[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2013年

9 沈曉沛;癌組織中啟動子甲基化異常基因的功能模式及致癌機(jī)制[D];電子科技大學(xué);2013年

10 申亮亮;NDRG2在結(jié)腸癌演變中對TGF-β通路功能的影響及轉(zhuǎn)錄調(diào)控的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 郭晨旭;180例腫瘤患者中醫(yī)體質(zhì)調(diào)查及其與中醫(yī)證型的相關(guān)性分析[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

2 閆林慧;山羊ΔFosB基因?qū)讉�鈣、脂代謝相關(guān)基因的mRNA表達(dá)調(diào)控研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

3 高麗霞;小尾寒羊TGF-β1和GDF9基因多態(tài)性及其與繁殖力關(guān)系的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2007年

4 莫莉;Cdk3在原發(fā)性肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及作用機(jī)制[D];中南大學(xué);2007年

5 李燕巍;葛根素對子宮內(nèi)膜異位癥中芳香化酶P450調(diào)控機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2008年

6 任l，

本文編號：1795676