本文選題：喉腫瘤 + 側(cè)群細(xì)胞�。� 參考：《臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志》2014年15期

【摘要】：目的:探討喉癌細(xì)胞株Hep-2中側(cè)群細(xì)胞分選的條件優(yōu)化。方法:取對數(shù)生長期的Hep-2細(xì)胞,予胰酶消化后,制成1×106個/ml單細(xì)胞懸液。①實驗組中加入Hoechst33342至終濃度分別為5、9、10、11μg/ml,37℃水浴90min。②取單細(xì)胞懸液,分別于37°水浴中孵育Hoechst 50、70、90、110、130min。③實驗組喉癌細(xì)胞懸液加入Hoechst后,分兩管分別孵育于37°水浴及37°恒溫箱中。兩管保持Hoechst濃度及細(xì)胞密度一致。④取匯合度分別為100%、70%的2瓶細(xì)胞,同上制成單細(xì)胞懸液。染色結(jié)束后,重懸PBS中,上流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測鑒定。以上各組均設(shè)陰性對照組于Hoechst染色前加維拉帕米,37℃中孵育30min,其他各條件保持與相應(yīng)實驗組一致。結(jié)果:①當(dāng)Hoechst33342濃度分別為5、9、10、11μg/ml時,SP比例分別為(39.96±0.24)%、(26.23±0.39)%、(18.79±0.02)%、(19.01±0.14)%;死細(xì)胞比例分別為(30.45±0.63)%、(49.90±0.42)%、(50.12±0.68)%、(64.16±0.39)%。②Hoechst在37°水浴中孵育90min時,流式細(xì)胞圖形最典型,SP比例為(17.37±1.42)%;③孵育于37°水浴較孵育恒溫箱中,實驗組未被Hoechst33342標(biāo)記的細(xì)胞分別為(18.67±0.45)%、(22.6±0.50)%;④匯合度90%以上較匯合度70%的細(xì)胞,SP比例由(19.08±0.46)%降到(16.073±0.52)%。以上結(jié)果均經(jīng)SPSS 13.0分析,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:在流式細(xì)胞儀分選喉癌Hep-2側(cè)群細(xì)胞中Hoechst33342的最佳濃度為10μg/ml,最佳孵育時間為90min,且水浴優(yōu)于恒溫箱中孵育,細(xì)胞密度最好選擇80%~90%。
[Abstract]:Objective: to study the optimal conditions for the sorting of lateral group cells in laryngeal carcinoma cell line Hep-2. Methods: the Hep-2 cells in logarithmic growth period were digested with trypsin, and the single cell suspension of 1 脳 10 6 / ml single cell suspension 1 脳 10 6 / ml was obtained by adding Hoechst33342 to the final concentration of 5 渭 g / ml 10 渭 g / ml 90min.2 at 37 鈩，

本文編號：1778755