本文選題：女性 + Graves眼病�。� 參考：《天津醫(yī)科大學》2013年博士論文

【摘要】：目的： 1.分析雌激素受體a(ERa)基因XbaⅠ和PvulⅠ酶切多態(tài)性和雌激素受體β(ERβ)基因Rsa Ⅰ和Alu Ⅰ多態(tài)性對女性Graves眼病患者的遺傳影響。 2.研究不同ER-a基因Xba Ⅰ位點基因型下女性Graves病患者(包括Graves眼病患者)外周血中CD4+CD25+FoxP3+Treg細胞數(shù)量和雌二醇(E2)、白細胞介素-10(IL-10)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1).腫瘤壞死因子-a(TNF-a)及甲狀腺功能的異同。 3.通過對女性GO患者治療前后其外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)中ERa和FoxP3基因的表達水平的檢測,并與正常人群做比較分析,并以雌激素受體α基因Xba Ⅰ位點的3個基因型分為3組,進行組間的對比,觀察ERa基因Xba Ⅰ多態(tài)性對ERa及FoxP3mRNA表達的影響,探討ER-a基因Xba Ⅰ多態(tài)性在女性GO發(fā)病機制中的作用。 方法： 1.設立4組觀察對象。分別為正常女性組,共126人；GD組,確診為GD18個月以上,未出現(xiàn)眼征患者,共67人；GO-S組,診斷為GD后,18個月內(nèi)出現(xiàn)眼征患者,共56人；GO-L組,診斷為GD后,18個月以上出現(xiàn)眼征患者,共40人；應用限制性片段長度多態(tài)性聚合酶鏈反應(PCR-RFLP)的方法,檢測受試對象ERα基因PvuⅡ和XbaⅠ位點、ERβ基因Rsa Ⅰ和Alu Ⅰ位點多態(tài)性分布的情況；分析ERa基因與ERβ基因多態(tài)性與女性GO發(fā)病之間的相關關系。 2.選取月經(jīng)周期正常的初發(fā)女性GD患者72人,其中包括有眼征患者22人,同時選取月經(jīng)正常的女性50人作為對照組,在月經(jīng)期的卵泡期(月經(jīng)后3-7天)采取空腹靜脈血,采用電化學發(fā)光測試儀測定E2、TSH、FT3、FT4、TPOAb、 TGAb;化學發(fā)光法測定TRAb;流式細胞儀測定外周血單個核細胞(PBMCs)中CD4+CD25+FoxP3+Treg細胞數(shù)量,酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測血清中IL-10、TGF-β1、TNF-α的含量。以ER-a基因XbaⅠ位點基因型分為三組,比較三組上述指標的差異。 3.選取女性活動性GO患者84名,潑尼松進行治療,在治療前后分別記錄臨床活動期評分(clinical activity score, CAS), E2濃度,并分離新鮮外周血單個核細胞,提取總RNA,利用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法逆轉(zhuǎn)錄并擴增ERα及FoxP3mRNA,通過凝膠圖像系統(tǒng)對PCR產(chǎn)物的電泳條帶進行掃描半定量分析。將84名患者以ER-a基因Xba Ⅰ多態(tài)位點的不同,分為三組,分別進行對比。 結(jié)果： 1.GO-S組AA基因型頻率為80.4%,而正常對照組、GD組、GO-L組AA基因型頻率分別為46.8%、59.1%和57.5%,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.005)。并且,GO-S組與正常對照組、GD組、GO-L組差異具均有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.000,0.04,0.042)；將GD組、GO-S和GO-L合并與正常對照組相比較,AA基因型頻率差異分為為66%和46.8%,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.004)；GO-S組與GD組、GO-L組A等位基因頻率分別為88.4%、75.4%和59.4%,計算暴露于A等位基因與GO-S的聯(lián)系強度OR得出,GO-S組與GD組相比,暴露于A等位基因的OR(95%CI)為2.11(1.203-3.699),與GO-L相比,暴露于A等位基因的OR(95%CI)為2.45(1.312-4.575)；正常對照組、GD組、GO-S組和GO-L組在Pvu Ⅱ多態(tài)性的分布差異不具有統(tǒng)計學意義(P=0.698)：ERβ基因Alu Ⅰ位點多態(tài)性的分布中,正常組、GD、GO-S和GO-L4組AA基因型分布總體差異有統(tǒng)計學意義(P=0.032),其A等位基因頻率分布總體差異也具有統(tǒng)計學意義(P=0.016)。GD、GO-S和GO-L3組間差異無統(tǒng)計學意義(P=0.910);GD、GO-S和GO-L3組數(shù)據(jù)合并,與正常對照組組進行統(tǒng)計學分析,其差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.001)。計算暴露于A等位基因與GD的聯(lián)系強度OR得出,與正常對照組相比,暴露于A等位基因的OR(95%CI)為1.71(1.272-2.299)；正常對照組、GD組、GO-S組和GO-L組在AluⅠ多態(tài)性的分布差異不具有統(tǒng)計學意義(P=0.836)。 2.對照組中,不同基因型人群其外周血的TSH、FT3、FT4、TPOAb、TGAb、 TRAb、E2、CD4+CD25+FoxP3+Treg細胞及IL-10、TGF-β1、TNF-α的含量差異均無統(tǒng)計學意義；GD組中,不同基因型人群其外周血的TSH、FT3、FT4、TPOAb、 TGAb、TRAb、E2和TGF-β1的含量差異無統(tǒng)計學意義；GD組的E2、TNF-α的含量顯著大于正常對照組(P=0.000),CD4+CD25+FoxP3+Treg細胞數(shù)量顯著少于正常對照組(P=0.000)；GD組中,以GG基因型、GA基因型和AA基因型分為3組,GG組CD4+CD25+FoxP3+Treg細胞數(shù)量最多,AA組最少,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.015)；GG組IL-10含量最多,AA組最少,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.004)；GG組TNF-a含量最少,AA組最多,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 3.治療前,CAS評分及E2濃度在GG、GA和AA基因型組間差異無統(tǒng)計學意義(P=0.684和P=0.714),治療后,CAS評分及E2濃度均有下降,但GG組下降幅度最大,AA組較少,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.028)；E2濃度差異無統(tǒng)計學意義(P=0.778)；治療前,GO組ERα mRNA表達明顯高于對照組(P0.05),GG組高于GA組和AA組,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.029和0.002),治療后,GO組ERα mRNA表達明顯下降(P0.05),GG組高于GA組和AA組,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.039和0.014)；治療前,GO組FoxP3mRNA表達明顯低于對照組(P0.05),GG組高于GA組和AA組,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.039),治療后,GO組FoxP3mRNA表達與治療前相比明顯上升(P0.05),GG組高于AA組,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.002)。 結(jié)論： 1.在ERa基因Xba Ⅰ位點多態(tài)性方面,AA基因型與GD的發(fā)生有關,是GD的易感基因型,并且與GO的發(fā)生時間有著密切關系,是GO早發(fā)的危險因素;在ERβ基因AluⅠ位點多態(tài)性方面,等位基因A是GD的易感基因,AA基因型是GD的易感基因型,不是GO早發(fā)的危險因素：ERa基因PvuⅡ酶切位點多態(tài)性及ERβ基因Rsa Ⅰ位點多態(tài)性與GO的發(fā)生發(fā)展無關。 2.ER-α基因Xba Ⅰ基因位點A等位基因的出現(xiàn)增多,抑制炎癥因子IL-10減少,促炎因子TNF-α增多,最終導致AA基因型組CD4+CD25+Foxp3+Treg數(shù)量最少,而GG基因型組抑制炎癥因子IL-10較多,促炎因子TNF-α較少,CD4+CD25+Foxp3+Treg數(shù)量最多,AA基因型組的免疫抑制力較差,可能導致了攜帶該基因型患者GO早發(fā)的幾率增大。 3.隨著等位基因G的增多,ER-αmRNA和Foxp3mRNA也相應增多,治療效果相對較好,G等位基因是保護性基因�？赡苡捎贓Ra基因XbaI位點多態(tài)性導致的ER受體數(shù)量不同,影響E2促進Treg發(fā)揮免疫抑制功能,而使?jié)娔崴芍委熁顒有訥O患者的效果存在差異。
[Abstract]:Objective:
1. the genetic influence of the polymorphism of the estrogen receptor A (ERa) gene Xba I and Pvul I and the polymorphism of the estrogen receptor beta (ER beta) gene Rsa I and Alu I on women with Graves eye disease was analyzed.
2. the number of CD4+CD25+FoxP3+Treg cells in peripheral blood and estradiol (E2), interleukin -10 (IL-10), TGF - beta 1 (TGF- beta 1), tumor necrosis factor -a (TNF-a) and thyroid function were studied in the peripheral blood of women with different ER-a gene Xba I loci (including Graves ophthalmopathy).
3. the expression level of ERa and FoxP3 genes in the peripheral blood mononuclear cells (peripheral blood mononuclear cells, PBMCs) before and after treatment of female GO patients was detected and compared with the normal population, and the 3 genotypes of the estrogen receptor alpha gene Xba locus were divided into 3 groups, and the ERa gene Xba I was compared. The ERa gene Xba I was observed. The effect of polymorphism on the expression of ERa and FoxP3mRNA, and to explore the role of ER-a gene Xba I polymorphism in the pathogenesis of female GO.
Method錛，

本文編號：1777528