本文選題：P結(jié)合蛋白基因(BP) + 周期阻滯��； 參考：《四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2014年05期

【摘要】：目的利用RNA干擾技術(shù)下調(diào)喉部鱗癌Hep-2細(xì)胞株P(guān)53結(jié)合蛋白1基因(53BP1)的表達(dá),觀察其對(duì)腫瘤細(xì)胞周期及放療敏感性的影響。方法構(gòu)建53BP1短發(fā)夾RNA(shRNA)重組質(zhì)粒,然后轉(zhuǎn)染Hep-2細(xì)胞株,構(gòu)建穩(wěn)定低表達(dá)53BP1的Hep-2細(xì)胞系,通過Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒的Hep-2細(xì)胞(NC)、野生型Hep-2細(xì)胞(未轉(zhuǎn)染,Hep-2組)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染下調(diào)53BP1表達(dá)的Hep-2細(xì)胞組(P6組)細(xì)胞53BP1蛋白的表達(dá)水平,MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞正常情況下增殖的影響,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)經(jīng)放射線照射后的細(xì)胞周期分布,并采用克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)下調(diào)53BP1表達(dá)的Hep-2細(xì)胞系對(duì)放射的敏感性變化。結(jié)果成功構(gòu)建了穩(wěn)定低表達(dá)53BP1的Hep-2細(xì)胞株P(guān)6,Western blot顯示P6組Hep-2相較野生型Hep-2細(xì)胞中53BP1蛋白水平下降(P0.05)。MTT結(jié)果示下調(diào)53BP1蛋白表達(dá)并未影響細(xì)胞正常的生長(zhǎng)。P6組下調(diào)53BP1后,經(jīng)不同劑量放射后G2/M期周期阻滯較NC組和野生型Hep-2細(xì)胞減弱(P0.05),周期阻滯比例隨放射劑量增加而增加。在0、2、6、10Gy劑量的照射后,P6組放射敏感參數(shù)(D0、N、Dq、SF2)均低于野生型Hep-2組和對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論 RNA干擾可下調(diào)53BP1表達(dá)的Hep-2細(xì)胞,減少G2/M周期阻滯,從而增強(qiáng)對(duì)放射的敏感性。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of RNA interference on the expression of p53 - binding protein - 1 ( 53BP1 ) in laryngeal squamous cell carcinoma cell line 53 BP1 and to observe its effect on cell cycle and radiosensitivity .

【作者單位】： 四川大學(xué)華西醫(yī)院腫瘤中心;四川大學(xué)華西醫(yī)院生物治療國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;四川大學(xué)華西醫(yī)院腫瘤分子診斷實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：四川省科技廳支撐計(jì)劃(No.2009SZ0160)資助
【分類號(hào)】：R739.65

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本文編號(hào)：1731929