本文選題：新CD44剪接變異體　切入點(diǎn)：siRNA載體構(gòu)建　出處：《桂林醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文

【摘要】：目的:構(gòu)建CD44新剪接變異體siRNA表達(dá)載體質(zhì)粒,獲得質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的人鼻咽癌5-8F細(xì)胞系,為研究CD44新剪接變異體在鼻咽癌中的功能提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法:將合成的寡核苷酸鏈退火形成雙鏈,連接入pGenesil-1.3-kan/Neo表達(dá)載體,并測(cè)序鑒定。脂質(zhì)體法把重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至5-8F細(xì)胞,通過(guò)G418篩選,濾紙法獲取單克隆細(xì)胞,建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的5-8F細(xì)胞系。 結(jié)果:構(gòu)建了新CD44剪接變異體siRNA重組真核表達(dá)載體,獲得了G418篩選后的單克隆轉(zhuǎn)染5-8細(xì)胞株。 結(jié)論:成功構(gòu)建了新CD44剪接變異體siRNA真核表達(dá)載體,成功轉(zhuǎn)染到5-8F細(xì)胞內(nèi),并獲得了單克隆細(xì)胞株。
[Abstract]:Aim: to construct the expression vector plasmid of CD44 splicing variant siRNA and obtain the stable transfected human nasopharyngeal carcinoma (NPC) 5-8F cell line, and to provide experimental basis for studying the function of CD44 splicing variant in nasopharyngeal carcinoma (NPC).Methods: the synthesized oligonucleotide chains were annealed to form double strands and ligated into pGenesil-1.3-kan/Neo expression vector and identified by sequencing.The recombinant plasmid was transfected into 5-8F cells by liposome method. Monoclonal cells were obtained by G418 screening and filter paper method. The stable transfected 5-8F cell lines were established.Results: the recombinant eukaryotic expression vector of new CD44 splicing variant siRNA was constructed, and the 5-8 cell line was transfected by G418.Conclusion: the eukaryotic expression vector of new CD44 splicing variant siRNA was successfully constructed and transfected into 5-8F cells successfully, and a monoclonal cell line was obtained.
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R739.63

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1722706