發(fā)布時(shí)間：2018-03-18 20:41

  本文選題：Ad.RGD-ING　切入點(diǎn)：鼻咽腫瘤　出處：《臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志》2014年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:研究帶RGD的腺病毒介導(dǎo)的ING4對(duì)人鼻咽癌細(xì)胞CNE生長、凋亡及細(xì)胞周期的影響并探討其可能調(diào)節(jié)機(jī)制。方法:以Ad.RGD-ING4及腺病毒空載體感染CNE細(xì)胞,RT-PCR法檢測ING4基因的表達(dá)水平,Western blot法檢測目的蛋白的表達(dá)。用MTT試驗(yàn)檢測ING4對(duì)CNE細(xì)胞生長情況的影響,用Annexin V-PE/7-AAD雙染色測定ING4對(duì)CNE細(xì)胞凋亡的影響,用PI單染色檢測ING4對(duì)CNE細(xì)胞細(xì)胞周期的影響。RT-PCR檢測p21、Bcl-2、Bax基因的表達(dá)水平的差異,Western blot法檢測Survivin蛋白、Cleaved-caspase3蛋白表達(dá)的差異。結(jié)果:CNE細(xì)胞感染Ad.RGD-ING4 72h后,ING4在CNE細(xì)胞中過表達(dá),CNE細(xì)胞的生長受到明顯抑制,細(xì)胞凋亡率明顯升高,G2/M期出現(xiàn)明顯阻滯。RT-PCR結(jié)果顯示,感染Ad.RGD-ING4的CNE細(xì)胞中Bcl-2表達(dá)下降,p21、Bax表達(dá)升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.01)。Western blot結(jié)果顯示Survivin蛋白表達(dá)下降,Cleaved-caspase3蛋白表達(dá)升高。結(jié)論:Ad.RGD-ING4可以對(duì)鼻咽癌細(xì)胞株CNE的起到抑癌增效作用,這一作用可能是通過下調(diào)Bcl-2、Survivin表達(dá)及上調(diào)p21、Bax、caspase3實(shí)現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective: to study the effect of adenovirus mediated ING4 with RGD on CNE growth of human nasopharyngeal carcinoma cells. Methods: Ad.RGD-ING4 and adenovirus empty vector infected CNE cells were used to detect the expression level of ING4 gene by RT-PCR and Western blot to detect the expression of target protein. ING4 was detected by MTT assay. On the growth of CNE cells, The effect of ING4 on apoptosis of CNE cells was determined by Annexin V-PE-7-AAD double staining. The effect of ING4 on the cell cycle of CNE cells was detected by Pi single staining. The difference of the expression level of p21, Bcl-2 and Bax gene was detected by RT-PCR. The expression of Cleaved-caspase-3 protein in CNE cells was detected by Western blot. Results after Ad.RGD-ING4 72 hours after Ad.RGD-ING4 infection, the expression of ING4 was overexpressed in CNE cells. Cell growth was significantly inhibited, The results of RT-PCR showed that the expression of Bcl-2 in CNE cells infected with Ad.RGD-ING4 decreased and the expression of p21 + Bax increased. The difference was statistically significant (P0.01N. Western blot showed that the expression of Survivin protein decreased and Cleaved-caspase3 protein increased. Conclusion: Ad.RGD-ING4 can inhibit the cancer of nasopharyngeal carcinoma cell line CNE, and this effect may be achieved by down-regulating the expression of Bcl-2G survivin and upregulating p21 Baxcaspase3.
【作者單位】： 蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科;蘇州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞與分子生物學(xué)教研室;
【基金】：江蘇省蘇州市國標(biāo)技術(shù)引進(jìn)與合作創(chuàng)新項(xiàng)目(No:SH201209)
【分類號(hào)】：R739.63

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