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Prestin在Spag6基因敲除小鼠外毛細(xì)胞中的表達(dá)

發(fā)布時間:2018-03-14 10:37

  本文選題:精子相關(guān)抗原 切入點:Prestin 出處:《山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2015年08期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的探究prestin在精子相關(guān)抗原6(Spag6)基因敲除小鼠中的表達(dá)及其與SPAG6之間的關(guān)系。方法獲取小鼠耳蝸基底膜組織,進(jìn)行免疫染色,采用共聚焦顯微鏡觀察prestin與SPAG6在毛細(xì)胞中的共同分布。比較野生小鼠(Spag6+/+)、雜合型小鼠(Spag6+/-)和同窩基因敲除小鼠(Spag6-/-)外毛細(xì)胞prestin的熒光強(qiáng)度差異和毛細(xì)胞的形態(tài)改變,并以蛋白印記實驗和實時定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測3種基因型小鼠的prestin表達(dá)水平。結(jié)果SPAG6存在于野生型和雜合型成年小鼠的外毛細(xì)胞中,在表皮板處呈陽性表達(dá),與prestin共同分布于外毛細(xì)胞的外側(cè)壁處;蚯贸∈髉restin的熒光強(qiáng)度較野生小鼠更弱,并且外毛細(xì)胞出現(xiàn)形態(tài)異常。蛋白印跡實驗和實時定量聚合酶鏈反應(yīng)均顯示,基因敲除小鼠prestin表達(dá)量顯著降低。結(jié)論SPAG6參與外毛細(xì)胞的構(gòu)成,且影響外毛細(xì)胞prestin表達(dá),提示兩種蛋白之間存在相互作用。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of prestin and its relationship with SPAG6 in spermatozoa associated antigen 6 Spag6 gene knockout mice. The co-distribution of prestin and SPAG6 in hair cells was observed by confocal microscopy. The fluorescence intensity of prestin and the morphological changes of hair cells in wild mice, heterozygous mice, heterozygous mice and in the same nest gene knockout mice were compared. Protein imprinting assay and real-time quantitative polymerase chain reaction were used to detect the expression of prestin in three genotypes of mice. Results SPAG6 was found in the outer hair cells of wild and heterozygous adult mice and expressed positively in the epidermis. The fluorescence intensity of prestin in knockout mice was weaker than that of wild mice, and the morphology of outer hair cells was abnormal. Western blot assay and real-time quantitative polymerase chain reaction showed that the fluorescence intensity of prestin in knockout mice was lower than that in wild mice. Conclusion SPAG6 is involved in the formation of outer hair cells and affects the expression of prestin in outer hair cells, suggesting that there is an interaction between the two proteins.
【作者單位】: 山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科;山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)與病理生理學(xué)教研室;山東省耳科學(xué)重點實驗室;賓夕法尼亞大學(xué)生殖醫(yī)學(xué)及女性健康研究中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(803300121,81072200) 山東省自然科學(xué)基金(ZR2006GG2202)
【分類號】:R764

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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7 田,

本文編號:1610836


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