低分子肝素對兔后發(fā)性白內(nèi)障的抑制作用及對房水中PDGF和EGF含量的影響
發(fā)布時間:2018-03-11 01:15
本文選題:低分子肝素 切入點:后發(fā)性白內(nèi)障 出處:《河北醫(yī)科大學(xué)》2011年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:后發(fā)性白內(nèi)障是白內(nèi)障手術(shù)后最常見的并發(fā)癥,是導(dǎo)致手術(shù)復(fù)明后視力再次下降的主要原因。據(jù)報道,成人白內(nèi)障囊外摘除術(shù)后后發(fā)性白內(nèi)障的發(fā)生率高達50%,兒童的發(fā)生率幾乎是100%[1,2]。面對如此之高的發(fā)病率,如何防治后發(fā)性白內(nèi)障已成為眼科學(xué)者的研究熱點。近年實驗發(fā)現(xiàn),低分子肝素可以抑制體外培養(yǎng)的晶狀體上皮細胞增生[3],但是其確切的作用機制并不十分清楚而且缺乏嚴格的活體動物實驗研究。本研究將新西蘭大白兔隨機分組,行白內(nèi)障超聲乳化手術(shù),分別給予低分子肝素鈉術(shù)中前房灌注和術(shù)后點眼兩種方法進行干預(yù),觀察晶狀體后囊膜混濁情況、光鏡下形態(tài)學(xué)改變、應(yīng)用免疫組化半定量檢測晶狀體上皮細胞增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)的表達,檢測房水中血小板源性生長因子(platelet-derived growth factor, PDGF)、表皮生長因子(epidermal growth factor, EGF)含量的變化以及不同給藥途徑對后囊膜結(jié)構(gòu)和因子含量的影響,從而為探討低分子肝素抑制后發(fā)性白內(nèi)障的發(fā)生機制提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。 方法:選用清潔級新西蘭大白兔30只,雌雄各半,體重1.5~2kg,無眼部疾病,雙眼晶狀體透明,手術(shù)前3天給予環(huán)丙沙星眼水點雙眼。隨機分為三組: A組.單純手術(shù)組10只(行右眼晶狀體超聲乳化術(shù)) B組.手術(shù)+點眼組10只(行右眼晶狀體超聲乳化術(shù),術(shù)后給予12.5g/L低分子肝素鈉眼水點眼) C組.手術(shù)+灌注組10只(行右眼晶狀體超聲乳化術(shù),術(shù)中前房灌注5000IU低分子肝素鈉) 術(shù)后每組都給予妥布霉素地塞米松眼水點右眼,每日6次,持續(xù)2周,分別測量術(shù)前及術(shù)后第1天,第3天的眼壓,觀察角膜情況并給予眼前節(jié)照相,根據(jù)Odrich后發(fā)性白內(nèi)障評分法對后囊混濁情況進行評分,于第3、14、28、60天抽取0.2ml房水離心后,用ELISA實驗方法檢測房水中PDGF和EGF的含量。60天后處死大白兔,取其右眼球固定,對晶狀體后囊進行光鏡下組織細胞形態(tài)的觀察并應(yīng)用免疫組化半定量檢測晶狀體上皮細胞PCNA的表達。統(tǒng)計結(jié)果以均數(shù)±標準差表示,實驗數(shù)據(jù)用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件分析,采用Mann-whitney U檢驗,單因素方差分析和LSD-t檢驗進行統(tǒng)計學(xué)處理。 結(jié)果: 1裂隙燈下觀察眼前節(jié)的改變并照相 1.1角膜水腫:術(shù)后第1天30只眼中有2 5只角膜清亮,A組2只、C組3只縫線處角膜出現(xiàn)水腫,第3天時水腫消失,全部角膜清亮。 1.2晶體后囊膜混濁程度:按Odrich后囊膜混濁分級:0級:后囊膜無混濁;1級:后囊膜混濁,眼底可看清;2級:后囊膜混濁,眼底部分看清;3級:后囊膜混濁,眼底完全看不清。整個實驗過程中,60天后A組1級有2只,2級有11只,3級有17只;B組分別為4只,14只,12只。A組在第60天時出現(xiàn)的后囊膜混濁情況與B組無顯著性差異(P0.05);C組在術(shù)后14天后囊膜開始出現(xiàn)混濁,第60天時3級混濁僅出現(xiàn)4只,C組與A、B組都有顯著性差異(P0.05)。 2眼壓變化 術(shù)前三組眼壓的平均值:25.30±2.10 mmHg;術(shù)后第1天眼壓的平均值:34.43±2.68mmHg,術(shù)后第3天眼壓的平均值:27.07±1.48mmHg。統(tǒng)計學(xué)分析表明,術(shù)后第1天眼壓與術(shù)前、術(shù)后第3天有顯著性差異(P0.05),術(shù)前眼壓與術(shù)后第3天無顯著性差異(P0.05)。 3形態(tài)學(xué)改變 光鏡下,三組后囊膜上均可見晶狀體上皮細胞,A組和B組細胞數(shù)目明顯增多,細胞重疊,形態(tài)大致正常,A組中還出現(xiàn)了晶狀體纖維增生。C組囊膜上可見單層上皮細胞覆蓋。 4免疫組化半定量檢測 PCNA在三組均有陽性表達,A組積分光密度值(IOD):59.2±0.8,B組積分光密度值(IOD):23.5±0.6, C組積分光密度值(IOD):8.6±0.7,C組與A組、B組相比較,其積分光密度值明顯下降(P0.05),B組比A組的積分光密度值降低(P0.05),積分光密度值的下降表明晶狀體上皮細胞增生能力減弱。5房水中PDGF和EGF含量的測定 第3天時,A組PDGF的含量:49.317±3.129 ng/ml,B組PDGF的含量:41.871±2.240 ng/ml,C組PDGF的含量:32.433±0.692 ng/ml,三組之間PDGF含量兩兩比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A、B、C組EGF的含量分別為:39.268±1.059 pg/ml,31.254±0.940 pg/ml,20.628±1.005 pg/ml,兩兩比較具有顯著性差異(P0.05)。第14天時,與B組(21.340±1.014 pg/ml)和C組( 21.176±1.159 pg/ml)相比,A組EGF含量( 35.273±0.686 pg/ml)明顯升高(P0.05),B組和C組間EGF含量無明顯差異(P0.05);三組中PDGF含量無明顯差異(P0.05)。第28天,60天時三組房水中PDGF和EGF含量無明顯差異(P0.05)。 結(jié)論: 1手術(shù)+灌注組后囊膜混濁程度和PCNA的表達較單純手術(shù)組、手術(shù)+點眼組明顯降低,手術(shù)中灌注低分子肝素顯著抑制了白內(nèi)障術(shù)后晶狀體后囊膜的混濁和晶狀體上皮細胞的增生。 2單純手術(shù)組、手術(shù)+點眼組房水中PDGF的含量在第3天時明顯高于手術(shù)+灌注組,白內(nèi)障手術(shù)中灌注低分子肝素早期可以顯著抑制房水中PDGF的表達。 3單純手術(shù)組、手術(shù)+點眼組房水中EGF的含量在第3天、第1 4天時明顯高于手術(shù)+灌注組,白內(nèi)障手術(shù)中灌注低分子肝素早期可以顯著抑制房水中EGF的表達。 4手術(shù)中灌注低分子肝素比術(shù)后點眼能有效減輕后囊膜的混濁程度和PCNA的表達,因此低分子肝素不同的給藥途徑對后發(fā)性白內(nèi)障的影響不同,手術(shù)中灌注低分子肝素能直接作用于晶狀體上皮細胞,更利于吸收,可能優(yōu)于其他的給藥方式。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R776.1
【參考文獻】
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1 王勇;王麗麗;朱忠橋;劉蓓;潘愛珠;黃玲;;氟尿嘧啶聯(lián)合低分子肝素預(yù)防增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變的視網(wǎng)膜電圖[J];國際眼科雜志;2006年03期
2 孫潔,謝立信,姚瞻;肝素緩釋系統(tǒng)預(yù)防兔后發(fā)性白內(nèi)障[J];眼科新進展;2003年05期
3 李松峰,張少沖,冷云霞;5-氟尿嘧啶聯(lián)合低分子肝素兔前房灌注的毒性研究[J];眼科新進展;2005年03期
4 孟t,
本文編號:1595924
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