發(fā)布時間：2016-10-30 20:47

  本文關(guān)鍵詞：銀杏葉提取物對大鼠視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體跨膜電位及視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《河北醫(yī)科大學(xué)》 2014年

銀杏葉提取物對大鼠視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體跨膜電位及視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白表達的影響

李志新  

【摘要】：目的：視神經(jīng)損傷是一種視力損傷嚴(yán)重、預(yù)后較差的視神經(jīng)病變，其治療方法少、治療效果差。探求視神經(jīng)損傷后修復(fù)再生的方法，，謀求改善視神經(jīng)功能的策略一直是眼科研究的熱點，但目前尚缺乏安全、有效的治療藥物。越來越多的證據(jù)表明，銀杏葉提取物（Ginkgo Bilobaextract,EGb761）具有抗氧化、抗缺血、保護線粒體、抑制一氧化氮合酶、抑制谷氨酸毒性以及抑制血小板活化因子等多種作用，且長期應(yīng)用未發(fā)現(xiàn)其毒、副作用[1]，是一種有潛力并且可以長期應(yīng)用的視功能保護劑。 本研究通過建立大鼠視神經(jīng)不完全損傷模型，腹腔注射銀杏葉提取物，來觀察視神經(jīng)損傷后，銀杏葉提取物對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinalganglion cell,RGCs)線粒體跨膜電位(mitochondrial transm embranepotentials,△ψm)變化及視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白(heatshock proteins,HSPs)27表達的影響，從而探討銀杏葉提取物對外傷性視神經(jīng)損傷的作用，進而為銀杏葉提取物臨床治療視神經(jīng)損傷提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。 方法：清潔級健康SD大鼠60只，雌雄不限，體重250g±10g。常規(guī)眼部檢查無眼疾。隨機分為3組,正常對照組（正常組）20只（20眼），實驗對照組（對照組）20只（20眼），實驗治療組（治療組）20只（20眼）。正常組不做任何處理。對照組和治療組建立左眼視神經(jīng)損傷模型，造模后1小時開始，治療組給予0.35%銀杏葉提取物(100mg/kg)，生理鹽水配置腹腔注射[2，3]，對照組給予同治療組體積的生理鹽水直接腹腔注射，此后每日一次，至試驗結(jié)束。于實驗3d、7d、14d、28d，每組各取5眼的動物視網(wǎng)膜組織，用HE染色觀察各組視網(wǎng)膜組織形態(tài)學(xué)的改變、免疫組織化學(xué)染色觀察熱休克蛋白27的表達情況、流式細(xì)胞術(shù)測定視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體跨膜電位的變化。研究中計量資料均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x s))表示，采用方差分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行分析，以P0.05為差異有顯著性。 結(jié)果： 1視網(wǎng)膜組織HE染色 正常組：視網(wǎng)膜各細(xì)胞層、內(nèi)核層及外核層的細(xì)胞排列致密，結(jié)構(gòu)清晰可見，邊界清楚；對照組：各時間點RGCs排列紊亂，數(shù)量不同程度的減少，在損傷3d、7d，部分細(xì)胞可出現(xiàn)水腫及空泡樣變化，隨著損傷時間延長，大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層的胞核明顯變稀疏、變薄且排列紊亂，內(nèi)核層和外核層也不同程度的減少；治療組亦可見上述改變，但其各時間點均較對照組的3d、7d、14d、28d時間點損傷情況輕，其中14d損傷的情況明顯明顯輕于3d、7d和28d。 2熱休克蛋白27免疫組織化學(xué)染色： HSPs27的表達可位于視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層，其強陽性表達呈棕色。正常組實驗中所見呈現(xiàn)弱陽性表達淺黃色染色，各個時間點無明顯變化；對照組3d為弱陽性表達呈淺黃染色，7d染色加深，14d達高峰呈強陽性表達棕色，28d染色呈淺黃色；實驗組各時間點陽性表達均弱于對照組，但明顯強于正常組。 免疫組織化學(xué)的半定量檢測結(jié)果：正常組3d、7d、14d及28d的半定量檢測結(jié)果分別為：0.113士0.015、0.117士0.009、0.115士0.124、0.117士0.006；對照組各時間點的半定量檢測結(jié)果分別為：0.424士0.031、0.538士0.073、0.337士0.022、0.252士0.014；治療組各時間點的半定量檢測結(jié)果分別為：0.330士0.021、0.327士0.183、0.211士0.015、0.172士0.007。在實驗的3d、7d、14d及28d，對照組和治療組HSPs27的陽性表達較正常組顯著升高，治療組較對照組HSPs27的陽性表達各時間點顯著降低，差別均有統(tǒng)計學(xué)意義（P﹤0.05）。 3流式細(xì)胞術(shù)檢測視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體跨膜電位 正常組正常大鼠RGC△ψm為825.648±5.822；對照組：3d、7d、14d、28d， RGC△ψm為分別為714.574±6.386、633.108±6.305、657.360±4.879、698.838±5.630，各時間點的△ψm均明顯低于正常組，且各時間點間△ψm差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P 0.05)；治療組：3d、7d、14d、28d，RGC△ψm為分別為784.879±6.424、732.538±4.851、755.698±6.993、766.769±5.134，各時間點的△ψm均低于對照組，但高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P 0.05)。 結(jié)論： 1視神經(jīng)損傷后RGCs排列紊亂，細(xì)胞數(shù)量不同程度的減少。 2視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白27的表達上升，線粒體跨膜電位下降。 3應(yīng)用銀杏葉提取物治療后可以使視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白的表達下降，線粒體跨膜電位上升。 4銀杏葉提取物參與了視神經(jīng)損傷大鼠視網(wǎng)膜的修復(fù)過程。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R774.6
【目錄】：

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6 池靜端;銀杏葉化學(xué)成分及其有效成分分析方法的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1997年

7 沈建穎;銀杏葉提取物（GBE50）預(yù)防血管內(nèi)皮功能障礙的體外實驗研究[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

8 敖強;大鼠脊髓損傷后細(xì)胞凋亡及其相關(guān)治療學(xué)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2003年

9 楊淑娟;銀杏葉提取物增強骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療糖尿病作用研究[D];吉林大學(xué);2009年

10 李相軍;tTG在大鼠腎間質(zhì)纖維化中的作用及銀杏葉提取物干預(yù)的研究[D];吉林大學(xué);2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊芳;銀杏葉提取物體外抗乙型肝炎病毒分泌抗原的作用[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 孫微;腦缺血—再灌注損傷時MMP-9的表達及銀杏葉的干預(yù)作用[D];吉林大學(xué);2006年

3 王英麗;銀杏葉提取物抗輻射作用的實驗研究[D];吉林大學(xué);2006年

4 梁潔;銀杏葉提取物微丸的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

5 陳三妹;銀杏葉提取物對糖尿病大鼠腎臟保護作用[D];浙江大學(xué);2006年

6 王雪;銀杏葉制劑對青光眼術(shù)后視神經(jīng)保護作用的臨床研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2006年

7 鄭欣;銀杏葉提取物對糖尿病大鼠腎小管上皮—間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響與機制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

8 張允;鋰-匹羅卡品癲癇大鼠小腦中膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性觀察及銀杏葉提取物干預(yù)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2005年

9 陳淑萍;銀杏葉提取物（EGb761）預(yù)處理對兔移植肺缺血再灌注損傷保護作用的研究[D];浙江大學(xué);2006年

10 周輝;銀杏葉提取物（舒血寧）對老年病人全身麻醉術(shù)后認(rèn)知功能的作用[D];中南大學(xué);2007年

  本文關(guān)鍵詞：銀杏葉提取物對大鼠視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體跨膜電位及視網(wǎng)膜組織中熱休克蛋白表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：159459