本文選題：激光光凝　切入點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)性脈絡(luò)膜新生血管　出處：《昆明醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的：新生血管對(duì)機(jī)體的創(chuàng)傷和組織缺血有積極的作用,但是對(duì)于腫瘤、糖尿病合并癥、血管增生性眼病等疾病來說則是這些疾病的共同病理特征,因此抑制新生血管的增生成為治療這些疾病的共同點(diǎn)。本文就抗新生血管生長因子藥物貝伐單抗(bevacizumab)和內(nèi)源性新生血管抑制因子激肽釋放酶結(jié)合蛋白(kallikrein-binding protein,或kallistatin簡(jiǎn)稱KBP)對(duì)脈絡(luò)膜新生血管的抑制作用進(jìn)行對(duì)比研究。 方法： 1、給予20只BN大鼠散瞳后實(shí)驗(yàn)眼圍繞視盤,在距離視盤約1PD處避開血管532nm激光環(huán)形光凝8個(gè)點(diǎn),激光參數(shù)為：光斑直徑50μm、曝光時(shí)間100ms、功率360mw建立脈絡(luò)膜新生血管模型 2、光凝后分別于1W、2W、3W、4W后進(jìn)行眼底血管熒光造影(fluorecein fundus angiography, FFA)檢查觀察脈絡(luò)膜新生血管的生成情況并計(jì)算熒光素滲漏面積,并于以上時(shí)間點(diǎn)各處死大鼠5只,取眼球制作石蠟切片于光鏡下對(duì)HE染色切片進(jìn)行新生血管形態(tài)學(xué)評(píng)價(jià)。應(yīng)用免疫組化方法對(duì)切片中VEGF和PEDF的表達(dá)的量進(jìn)行分析 3、對(duì)45只BN大鼠照以上方法右眼應(yīng)用激光建立脈絡(luò)膜新生血管模型,左眼為對(duì)照眼,不進(jìn)行激光光凝處理。在光凝后一周經(jīng)FFA證實(shí)新生血管形成后,隨機(jī)分成3組：bevacizumab組、KBP組、對(duì)照組。在光凝后一周經(jīng)FFA證實(shí)新生血管形成后,bevacizumab組右眼玻璃體腔內(nèi)注射bevacizumab 5μl(濃度為25mg/ml),左眼玻璃體腔內(nèi)注射5μl PBS液。KBP組右眼玻璃體腔內(nèi)注射KBP溶液5μl(濃度為4mg/ml),左眼注射5ul去離子水。對(duì)照組不進(jìn)行玻璃體腔注射。 4、注藥后分別于1W、2W、3W行FFA檢查并計(jì)算熒光素滲漏面積,并且在FFA檢查后處死動(dòng)物5只,摘除眼球制作石蠟切片進(jìn)行HE染色和VEGF和PEDF免疫組化分析。 5、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,進(jìn)行方差分析、SNK檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1、通過激光圍繞BN大鼠視盤光凝建立CNV動(dòng)物模型,建模后FFA觀察1周即可見熒光素滲漏CNV形成,光斑滲漏隨觀察時(shí)間推移而增加,3周時(shí)達(dá)到高峰。 2、在CNV形成的過程中,石蠟切片HE染色可見CNV的形態(tài)和細(xì)胞成分隨時(shí)間變化而變化。VEGF和PEDF的表達(dá)部位為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)核層、色素上皮層、外核層和脈絡(luò)膜的光凝損傷區(qū)。其中VEGF隨著時(shí)間的推移表達(dá)持續(xù)增加,而PEDF的表達(dá)則持續(xù)降低。 3、在玻璃體腔注射bevacizumab和KBP后,造影結(jié)果提示bevacizumab組和KBP組與對(duì)照組相比在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有明顯差異(P0.05), CNV都得到抑制,熒光素滲漏明顯減少。bevacizumab組和KBP組相比滲漏面積統(tǒng)計(jì)學(xué)上無明顯差異(P0.05),但KBP組在觀察中發(fā)現(xiàn)滲漏面積均值較bevacizumab組小。 4、免疫組化結(jié)果提示與對(duì)照組相比bevacizumab組和KBP組都使得VEGF的表達(dá)下降PEDF上升統(tǒng)計(jì)學(xué)上有明顯差異(P0.05)。而兩組之間對(duì)比發(fā)現(xiàn)bevacizumab組和KBP組在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無明顯差異(P0.05),但KBP組在觀察中表現(xiàn)出相對(duì)明顯的對(duì)CNV抑制作用。 結(jié)論： 1、532nm激光誘導(dǎo)BN大鼠CNV形成模型穩(wěn)定,是良好的CNV實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。 2、VEGF和PEDF在CNV形成的病理過程中起到主要作用。 3、玻璃體腔注射bevacizumab和KBP有效抑制CNV的形成和發(fā)展,其中KBP在觀察中表現(xiàn)出更為理想的抑制作用。
[Abstract]:Objective: angiogenesis on body trauma and ischemia has a positive effect, but for cancer, diabetes, vascular proliferative diseases such as eye disease is a common pathological feature of these diseases, so the inhibition of angiogenesis hyperplasia is a common treatment for these diseases. The anti angiogenic growth factor (bevacizumab bevacizumab) and endogenous angiogenesis inhibitor of kallikrein binding protein factor kinin (kallikrein-binding protein, kallistatin or KBP) inhibitory effect on choroidal neovascularization were investigated.
Method錛，

本文編號(hào)：1559112