本文關(guān)鍵詞： Cl C-氯通道 IK鉀通道 鼻咽癌 膜片鉗技術(shù)　出處：《中國(guó)病理生理雜志》2015年12期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:探討Cl C-3氯通道是否為IK1鉀通道的調(diào)節(jié)靶點(diǎn),重點(diǎn)研究鼻咽癌細(xì)胞IK1鉀通道對(duì)Cl C-3氯通道功能及蛋白表達(dá)的影響。方法:采用siRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)抑制低分化鼻咽癌上皮細(xì)胞(CNE-2Z)IK1基因的表達(dá);real-time PCR技術(shù)檢測(cè)Cl C-3 mRNA的表達(dá);Western blot檢測(cè)Cl C-3的蛋白表達(dá);細(xì)胞免疫熒光結(jié)合激光共聚焦顯微鏡技術(shù)檢測(cè)Cl C-3和IK1蛋白在細(xì)胞內(nèi)分布;全細(xì)胞膜片鉗記錄細(xì)胞氯電流。結(jié)果:IK1 siRNA可以成功轉(zhuǎn)染CNE-2Z細(xì)胞,有效抑制鼻咽癌細(xì)胞IK1鉀離子通道的表達(dá);用IK1 siRNA抑制鼻咽癌細(xì)胞IK1鉀離子通道的表達(dá)后,Cl C-3的mRNA表達(dá)上調(diào)而Cl C-3蛋白卻表達(dá)減少:在低分化鼻咽癌上皮細(xì)胞,低滲刺激可激活氯通道,產(chǎn)生一個(gè)較大的氯電流,在成功轉(zhuǎn)染IK1 siRNA的細(xì)胞,此氯電流明顯減弱。結(jié)論:敲低IK1鉀離子通道可抑制Cl C-3氯離子通道的表達(dá)和功能。
[Abstract]:Objective: to investigate whether Cl C-3 chloride channel is the regulatory target of IK1 potassium channel. The effect of IK1 potassium channel on the function and protein expression of Cl C-3 chloride channel in nasopharyngeal carcinoma cells was studied. Methods: siRNA transfection technique was used to inhibit the expression of CNE-2ZOIK1 gene in poorly differentiated nasopharyngeal carcinoma cells. The expression of ClC-3 mRNA was detected by real-time PCR technique. The protein expression of ClC-3 was detected by Western blot. Cellular immunofluorescence and laser confocal microscopy were used to detect the distribution of ClC-3 and IK1 proteins in the cells, and the chloride currents were recorded by whole-cell patch clamp. Results the CNE-2Z cells were successfully transfected with siRNA. After inhibiting the expression of IK1 potassium channel in nasopharyngeal carcinoma cells by IK1 siRNA, the expression of mRNA was up-regulated and the expression of ClC-3 protein was decreased in poorly differentiated nasopharyngeal carcinoma cells. Hypotonic stimulation could activate the chloride channel and produce a large chloride current, which was significantly decreased in the cells successfully transfected with IK1 siRNA. Conclusion: knocking down the potassium channel of IK1 can inhibit the expression and function of Cl C-3 chloride channel.
【作者單位】： 暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系;廣東藥學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院;暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81272223)
【分類號(hào)】：R739.63

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本文編號(hào)：1551636