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siRNA沉默eIF4E誘導人喉癌Hep-2細胞凋亡及其機制

發(fā)布時間:2018-02-27 13:12

  本文關鍵詞: 小干擾RNA 真核細胞翻譯起始因子E 喉腫瘤 Hep-細胞 細胞凋亡 出處:《吉林大學學報(醫(yī)學版)》2014年01期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的:觀察真核細胞翻譯起始因子4E(eIF4E)基因的靶向小干擾RNA(siRNA)對喉癌Hep-2細胞中eIF4E基因表達的影響,探討其誘導喉癌細胞凋亡的作用機制。方法:采用脂質體LipofectamineTM2000將siRNA-eIF4E轉染入人喉癌Hep-2細胞(siRNA-eIF4E組),同時設空白對照組和空質粒組。MTT法檢測siRNA對Hep-2細胞增殖的抑制作用,羅丹明染色檢測轉染后細胞內線粒體膜電位的變化,TUNEL染色法檢測細胞凋亡,RT-PCR和Western blotting法檢測凋亡相關基因轉錄和蛋白表達水平的變化。結果:與空白對照組及空質粒組比較,siRNA-eIF4E組Hep-2細胞中eIF4E基因轉錄和表達水平明顯下調(P0.01),Hep-2細胞生存率下降(P0.05),細胞線粒體膜電位降低(P0.05),細胞凋亡率增加(P0.05),凋亡相關基因Bim、Bid及Caspase-3表達上調(P0.05)。結論:siRNA-eIF4E在體外可抑制人喉癌Hep-2細胞增殖,其機制可能是通過激活線粒體凋亡途徑誘導Hep-2細胞凋亡。
[Abstract]:Aim: to observe the effect of targeting small interfering RNAs (siRNAs) of eukaryotic cell translation initiation factor 4EIF4E on the expression of eIF4E gene in Hep-2 cells of laryngeal carcinoma. Methods: siRNA-eIF4E was transfected into human laryngeal carcinoma Hep-2 cells by lipofectin LipofectamineTM2000 into siRNA-eIF4E group. The inhibitory effect of siRNA on the proliferation of Hep-2 cells was detected by blank control group and empty plasmid group. The changes of mitochondrial membrane potential after transfection were detected by Rhodamine staining and the expression of apoptosis-related genes by RT-PCR and Western blotting were detected by Tunel staining. Results: compared with the blank control group and empty substance, the changes of apoptosis-related gene transcription and protein expression were detected by Tunel staining. The transcription and expression of eIF4E gene in Hep-2 cells were significantly down-regulated by siRNA-eIF4E group. The survival rate of Hep-2 cells was decreased, the mitochondrial membrane potential was decreased, the apoptosis rate was increased, and the expression of the apoptosis-related gene BimsiRNA-eIF4E was increased. Conclusion\% siRNA-eIF4E can increase the expression of BimsiRNA-eIF4E in Hep 2 cells. It can inhibit the proliferation of human laryngeal carcinoma Hep-2 cells in vitro. The mechanism may be the activation of mitochondrial apoptosis pathway to induce apoptosis of Hep-2 cells.
【作者單位】: 吉林大學第二醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科;吉林大學基礎醫(yī)學院病理生理學系;長春中醫(yī)藥大學研發(fā)中心;
【基金】:國家自然科學基金資助課題(81302206) 吉林省科技廳自然科學基金資助課題(201105106)
【分類號】:R739.65

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 任光輝;董朝;耿中利;李鴻濤;馬斌林;;血管內皮生長因子在喉癌中的表達及其與血管生成和轉移的相關性[J];中國老年學雜志;2012年21期

【共引文獻】

相關碩士學位論文 前4條

1 張志磊;白藜蘆醇抑制宮頸癌HeLa細胞增殖及其作用機制[D];青島大學;2011年

2 王觀遠;程序化細胞死亡分子5(PDCD5)在喉癌中的表達及意義[D];延邊大學;2013年

3 鄧娟;eIF4E、VEGF-C在食管癌組織中的表達研究[D];中南大學;2013年

4 趙輝;eIF4E對食管癌化療藥物敏感性的作用機制研究[D];中南大學;2013年

【二級參考文獻】

相關期刊論文 前5條

1 方m錁,

本文編號:1542808


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