本文關(guān)鍵詞：乙酰膽堿酯酶（AChE）缺失對(duì)年齡相關(guān)性黃斑變性疾�。ˋMD）的保護(hù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院》 2015年

乙酰膽堿酯酶（AChE）缺失對(duì)年齡相關(guān)性黃斑變性疾�。ˋMD）的保護(hù)作用

徐曼  

【摘要】：目的:探討乙酰膽堿酯酶缺失對(duì)年齡相關(guān)性黃斑變性疾病的細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及機(jī)制。方法:培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞株(ARPE19)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,加入碘酸鈉濃度梯度:0.1mM,1mM,10mM。培養(yǎng)24h后,進(jìn)行乙酰膽堿酯酶(AchE)免疫熒光檢測(cè)及MTT法進(jìn)行細(xì)胞活力檢測(cè),找出最佳濃度。然后體外實(shí)驗(yàn),沉默人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞株(ARPE19)的AChE基因及預(yù)處理乙酰膽堿酯酶抑制劑(AchEI)多奈哌齊兩種方法;體外實(shí)驗(yàn)采用AChE-/+和AChE+/+老鼠經(jīng)尾靜脈注射25mg/kg碘酸鈉,之后進(jìn)行AChE、Cleaved Caspase-3的免疫熒光、TUNEL法檢測(cè)凋亡數(shù)量、Cell ROS及提取各實(shí)驗(yàn)組的蛋白后用蛋白印跡法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組AChE、Cleaved Caspase-3和NOX2表達(dá)量。結(jié)果:MTT值,碘酸鈉組的細(xì)胞活力明顯低于對(duì)照組,且具濃度依賴性。碘酸鈉組的乙酰膽堿酯酶(AChE)表達(dá)量也明顯高于對(duì)照組,且具有濃度梯度性,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。TUNEL法細(xì)胞凋亡數(shù)明顯少于對(duì)照組,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。蛋白印跡和免疫熒光檢測(cè)得出在體外體內(nèi)缺失AChE后,NOX2表達(dá)量也相應(yīng)少于對(duì)照組,Cell ROS實(shí)驗(yàn)也證明其ROS含量也相應(yīng)少于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),說明其氧化應(yīng)激反應(yīng)被抑制。結(jié)論:碘酸鈉誘導(dǎo)ARPE19細(xì)胞凋亡過程中,乙酰膽堿酯酶表達(dá)量增高,且具有濃度梯度性。缺失AChE后,其凋亡細(xì)胞數(shù)量減少,并且氧化應(yīng)激反應(yīng)被抑制。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R774.5
【目錄】：

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