本文關(guān)鍵詞： 形覺剝奪性近視 視黃酸 鞏膜 RARβ LE540 基質(zhì)金屬蛋白酶-2 細(xì)胞外基質(zhì) 核心蛋白多糖　出處：《天津醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 研究目的 建立早期形覺剝奪性近視(form-deprivation myopia, FDM)動物模型,檢測豚鼠鞏膜中視黃酸(retinoic acid, RA)及視黃酸受體β(retinoic acid receptorβ,RARβ)的水平；同時比較注射RARβ特異性抑制劑LE540和注射RA與對照組對屈光狀態(tài)的影響,觀察后極部鞏膜病理變化,并檢測鞏膜基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和核心蛋白聚糖(decorin, DCN)的水平,探討RA及RARβ在形覺剝奪性近視豚鼠后極部鞏膜變化中的作用。 方法 第一部分：同批次3周齡英國種短毛三色豚鼠30只(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射研究所動物中心提供),采用隨機(jī)數(shù)字表法將動物分為3組,正常組6只,形覺剝奪15天組(FD 15 d)和形覺剝奪24天組(FD 24 d)各12只,實(shí)驗(yàn)眼均為左眼,右眼為自身對照眼。采用6號同色氣球于豚鼠口鼻、雙耳及對側(cè)眼處開窗,制成大小合適的頭套遮蓋左眼,頸部以膠帶固定防止脫落,分別飼養(yǎng)至15天和24天作為形覺剝奪動物模型。實(shí)驗(yàn)前后均測量屈光度,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后摘除眼球,測量眼軸長,應(yīng)用高效液相色譜法(high performance liquid chromatography, HPLC)測定后極部鞏膜RA含量,western blotting方法檢測鞏膜RARβ蛋白含量的變化。 第二部分：另選同種豚鼠30只,隨機(jī)分為4組,Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ組各8只,Ⅳ組6只,為正常對照組。I組左眼球后注射0.1 g/L LE540 0.1ml,并用氣球頭套遮蓋至第24天；II組左眼用氣球頭套遮蓋24天；III組左眼球后注射0.4g/L RA 0.1ml,飼養(yǎng)至第24天。右眼為自身對照眼。實(shí)驗(yàn)前后均行視網(wǎng)膜檢影測量屈光度,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取眼球測量眼軸長度,取鞏膜做石蠟切片行病理學(xué)檢查,用western blotting方法檢測后鞏膜細(xì)胞外基質(zhì)中MMP-2及decorin蛋白含量的變化。計量資料數(shù)據(jù)以x±s表示,采用SPSS11.5統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,并進(jìn)行正態(tài)分布及Levene方差齊性檢驗(yàn)后行t檢驗(yàn)和方差分析。 結(jié)果 第一部分：FD 15 d組、FD 24 d組動物實(shí)驗(yàn)眼誘導(dǎo)出明顯的相對近視,且與正常組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=23.053,P=0.000)。FD15d組、FD 24 d組實(shí)驗(yàn)眼眼軸均長于自身對照眼(P0.05)。FD 15 d組、FD 24 d組實(shí)驗(yàn)眼鞏膜中RA水平較自身對照眼均明顯升高(P0.01),但兩組實(shí)驗(yàn)眼之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.857)。Western blotting所得RARβ的灰度圖顯示,FD 15 d組、FD 24d組實(shí)驗(yàn)眼鞏膜RARβ較自身對照眼均增多,正常組、FD15 d組和FD 24d組實(shí)驗(yàn)眼鞏膜中的RARβ/β-actin總體比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=20.527,P0.001),其中FD 15 d組和FD 24 d組實(shí)驗(yàn)眼間的RARβ/β-actin比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.158,P=0.031),而且FD 15d組和FD 24 d組的實(shí)驗(yàn)眼分別與正常組相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.324,P0.001；t=0.482,P0.001)。 第二部分：實(shí)驗(yàn)干預(yù)后II和III組的實(shí)驗(yàn)眼形成相對近視,兩組左右眼屈光度差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(t=8.543,P=0.000；t=6.027,P=0.001)。其中,I組和II組實(shí)驗(yàn)眼的屈光度在實(shí)驗(yàn)前后差異分別為(-1.77±0.93)D和(-5.39±1.26)D,二者之間有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.000)；III組實(shí)驗(yàn)眼干預(yù)前后屈光度差別為(-3.73±0.79)D,實(shí)驗(yàn)前后差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=13.340,P=0.000)。實(shí)驗(yàn)干預(yù)后I組的左右眼眼軸長度相比差異無顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.635,P=0.146)；II組和III組干預(yù)后左右眼眼軸長度差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.980,P=0.021；t=-4.100,P=0.005)。II組和III組實(shí)驗(yàn)眼后極部鞏膜有明顯病理性近視改變。I組、II組和III組實(shí)驗(yàn)后實(shí)驗(yàn)眼鞏膜中的MMP-2/β-actin均明顯升高(t=4.520,P=0.020；t=6.913,P=0.006；t=5.462,P=0.012)。I組、II組和III組實(shí)驗(yàn)后實(shí)驗(yàn)眼鞏膜中的Decorin/β-actin均降低,與自身對照眼相比,I組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.522,P=0.086),II組和III組有統(tǒng)計學(xué)意義(t=9.072,P=0.003；t=4.202,P=0.025)。 結(jié)論 形覺剝奪可導(dǎo)致軸性近視發(fā)生,近視程度在早期隨時間明顯遞增,形覺剝奪眼眼軸增長；豚鼠早期形覺剝奪眼后極部鞏膜RA及RARβ水平上調(diào)；外源RA可導(dǎo)致軸性近視；形覺剝奪和外源RA誘導(dǎo)的近視眼后極部鞏膜中,細(xì)胞外基質(zhì)分解活躍,MMP-2上調(diào),Decorin下調(diào)；RA參與介導(dǎo)的形覺剝奪性近視的形成作用可被RARβ抑制劑LE540不完全抑制；RA-RARβ途徑可能是導(dǎo)致FDM豚鼠后極部鞏膜重塑的重要機(jī)制之一
[Abstract]:Purpose of study To establish an early form - deprivation myopia ( FDM ) animal model , to detect the level of retinoic acid ( RA ) and retinoic acid receptor 尾 ( RAR尾 ) in the sclera of guinea pig , and to compare the effects of injected RAR尾 specific inhibitor LE540 and injected RA and control group on refractive status , observe the changes of sclera in the posterior pole , and examine the role of RA and RAR尾 in the changes of sclera in the posterior pole of the guinea pig . method In the first part , 30 guinea pigs were randomly divided into three groups : three groups of three - week - old British short - haired three - color guinea pigs . The animals were divided into three groups by random number table method . In the second part , 30 guinea pigs were randomly divided into 4 groups , group 鈪，

本文編號：1460051