糖基化終末產(chǎn)物對(duì)體外培養(yǎng)牛眼小梁細(xì)胞氧化應(yīng)激及凋亡的影響
本文關(guān)鍵詞:糖基化終末產(chǎn)物對(duì)體外培養(yǎng)牛眼小梁細(xì)胞氧化應(yīng)激及凋亡的影響 出處:《眼科新進(jìn)展》2014年07期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的通過(guò)觀察糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end products,AGE)對(duì)體外培養(yǎng)牛眼小梁細(xì)胞凋亡的影響,研究AGE與原發(fā)性開(kāi)角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)之間的關(guān)系,進(jìn)一步探討其發(fā)病機(jī)制。方法體外培養(yǎng)牛眼小梁細(xì)胞,通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察和神經(jīng)元特異性烯醇化酶染色對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行鑒定。將第3代小梁細(xì)胞接種于6孔培養(yǎng)板,在培養(yǎng)基中加入不同濃度(0μg·mL-1、50μg·mL-1、100μg·mL-1、200μg·mL-1)的AGE-BSA培養(yǎng)96 h。終濃度(200μg·mL-1)的AGE-BSA培養(yǎng)液處理細(xì)胞不同時(shí)間(48 h、72 h、96h)。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)小梁細(xì)胞凋亡率;活性氧熒光探針2’,7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平。結(jié)果 50μg·mL-1、100μg·mL-1、200μg·mL-1AGE-BSA作用96h后細(xì)胞凋亡率分別為(5.60±0.25)%、(9.57±0.08)%、(17.68±0.21)%,與對(duì)照組(0μg·mL-1AGE-BSA)細(xì)胞凋亡率(4.45±0.12)%相比均明顯增高,且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.05);200μg·mL-1AGE-BSA作用細(xì)胞48 h、72 h、96 h后凋亡率分別為(10.51±0.28)%、(13.47±0.42)%、(17.68±0.21)%,與對(duì)照組相比也均明顯增高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.05)。與對(duì)照組比較,AGE-BSA處理后細(xì)胞內(nèi)ROS水平顯著提高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),BSA組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論在體外培養(yǎng)的條件下,AGE可能通過(guò)刺激牛眼小梁細(xì)胞產(chǎn)生大量ROS介導(dǎo)小梁細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of advanced glycation end products (ages) on apoptosis of bovine trabecular meshwork cells in vitro. To investigate the relationship between AGE and primary open angle glaucoma (primary open angle glaucoma gaunt). Methods Bovine trabecular meshwork cells were cultured in vitro. The cultured cells were identified by morphological observation and neuron-specific enolase staining. The third passage trabecular cells were inoculated into 6-well culture plate, and different concentrations of 0 渭 g 路mL-1 were added to the culture medium. 50 渭 g 路ml -1 and 100 渭 g 路mL-1. The cells were incubated with 200 渭 g 路ml -1 AGE-BSA for 96 h and with the final concentration of 200 渭 g 路ml -1 AGE-BSA for 48 h. The apoptosis rate of trabecular cells was detected by flow cytometry. The level of reactive oxygen species (Ros) was detected by the reactive oxygen species (Ros) probe 2 ~ (2 +) -dichlorofluorescein yellow diacetate. Results 50 渭 g 路mL ~ (-1) 路L ~ (-1) ~ (-1) 渭 g 路mL-1 of reactive oxygen species was detected. After treated with 200 渭 g 路mL-1AGE-BSA for 96 h, the apoptosis rate was 5.60 鹵0.25% and 9.57 鹵0.08%, respectively. Compared with the control group (0 渭 g 路ml ~ (-1)), the apoptotic rate of AGE-BSAs was significantly higher than that of 4.45 鹵0.12%. The difference was statistically significant (P 0.05). The apoptosis rates of cells treated with 200 渭 g 路mL-1AGE-BSA for 48 h and 72 h and 96 h were 10.51 鹵0.28 and 13.47 鹵0.42%, respectively. Compared with the control group, the difference was statistically significant (P 0.05). The intracellular ROS level was significantly increased after AGE-BSA treatment (P 0.05). Conclusion in vitro culture, age may induce a large number of ROS mediated trabecular cell apoptosis by stimulating bovine trabecular meshwork cells.
【作者單位】: 濱州醫(yī)學(xué)院;濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院;
【分類號(hào)】:R775.2
【正文快照】: 原發(fā)性開(kāi)角型青光眼(primary open angle glau-coma,POAG)是一種常見(jiàn)致盲性眼病,大型流行病學(xué) 研究顯示糖尿病為POAG最常見(jiàn)的病因,與POAG發(fā)病率呈正相關(guān)[1]。糖尿病患者中POAG的發(fā)病率為 4%~11%[2],比一般人群(2%)高。糖尿病與POAG間的關(guān)系密切,但糖尿病患者并發(fā)POAG的發(fā)病
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