藍(lán)光誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)參與視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡機(jī)制研究
發(fā)布時間:2018-01-06 04:24
本文關(guān)鍵詞:藍(lán)光誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)參與視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡機(jī)制研究 出處:《眼科新進(jìn)展》2015年06期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的研究氧化應(yīng)激反應(yīng)參與藍(lán)光誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(human retinal pigment epithelium,hR PE)凋亡的作用機(jī)制及其與時間的關(guān)系。方法用LED藍(lán)光光源建立藍(lán)光損傷體外培養(yǎng)的hR PE細(xì)胞模型,藍(lán)光輻射強(qiáng)度為(4.0±0.5)mW·cm-2,并將細(xì)胞分為光照時間0 h(正常對照組)、0.5 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h、12 h組。透射電鏡觀察細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)活性氧水平,Western Blot技術(shù)檢測Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果各光照組細(xì)胞均有不同程度的胞漿減少、空泡狀改變、線粒體腫脹、微絨毛減少或脫落。正常對照組、光照1 h、2 h、3h、4 h、5 h、6 h、12 h的細(xì)胞凋亡率分別為(5.30±0.64)%、(5.90±0.89)%、(6.80±0.98)%、(7.70±0.76)%、(9.60±1.10)%、(11.45±2.60)%、(14.90±1.60)%及(23.90±1.20)%,與正常對照組比較,光照4 h后細(xì)胞凋亡率明顯升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05)。正常對照組、0.5 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h組hR PE細(xì)胞生成的ROS相對量分別為(12.90±1.18)%、(20.09±0.63)%、(23.91±1.47)%、(29.14±1.94)%、(34.30±1.84)%、(38.97±1.68)%、(44.08±0.83)%、(57.76±2.80)%,光照0.5 h后細(xì)胞產(chǎn)生的ROS明顯升高,與正常對照組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05)。Caspase-3及Bax在3 h后輕微上調(diào),而5~6 h后表達(dá)上調(diào)較明顯,Bcl-2的表達(dá)則在3 h后下調(diào)明顯,與正常對照組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05)。結(jié)論藍(lán)光可通過產(chǎn)生的氧化應(yīng)激反應(yīng)激活細(xì)胞凋亡系統(tǒng)導(dǎo)致細(xì)胞損傷,光照持續(xù)3 h時細(xì)胞可能出現(xiàn)了損傷但不明顯,光照5~6 h后出現(xiàn)了較為明顯的細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Objective To study the mechanism of apoptosis of human retinal pigment epithelium ( hR PE ) induced by oxidative stress reaction in vitro and its relationship with time . The results showed that the apoptosis rate of cells was ( 5.30 鹵 0.64 ) % , ( 5.90 鹵 0.89 ) % , ( 6.80 鹵 0.98 ) % , ( 7.70 鹵 0.76 ) % , respectively . ( 9.60 鹵 1.10 ) % , ( 11.45 鹵 2.60 ) % , ( 14.90 鹵 1.60 ) % and ( 23.90 鹵 1.20 ) % respectively . The relative amounts of ROS produced in normal control group , 0.5 h , 1 h , 2 h , 3 h , 4 h , 5 h , 6 h group were significantly higher than those in normal control group . The expression of Bcl - 2 was down - regulated after 3 h after 5 - 6 h . Conclusion Blue light can activate the apoptosis system by the oxidative stress reaction , which leads to cell injury .
【作者單位】: 廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院眼科;廣州中醫(yī)藥大學(xué);廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院;
【基金】:廣東省科技計劃項(xiàng)目(編號:2011B031800202) 廣東省科學(xué)自然基金項(xiàng)目(編號:S2013010012045)~~
【分類號】:R77
【正文快照】: 人視網(wǎng)膜色素上皮(human retinal pigment epi-養(yǎng)的h RPE細(xì)胞經(jīng)不同光照時間處理后,3500 r·thelium,h RPE)細(xì)胞具有轉(zhuǎn)運(yùn)營養(yǎng)成分、吞噬降解感min-1離心15 min后棄上清液,并用濾紙吸干殘余光細(xì)胞外節(jié)段、視色素轉(zhuǎn)運(yùn)儲存、清除自由基等功液,迅速加入0.8 mL體積分?jǐn)?shù)2.5%戊二醛,4
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1 王泓;許迅;;氧化應(yīng)激反應(yīng)與糖尿病視網(wǎng)膜病變[J];臨床眼科雜志;2009年05期
2 盧永輝;何e,
本文編號:1386287
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