生理低氧對人晶狀體上皮細(xì)胞系基因表達(dá)譜的影響
本文關(guān)鍵詞:生理低氧對人晶狀體上皮細(xì)胞系基因表達(dá)譜的影響 出處:《眼科新進(jìn)展》2015年05期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的探討生理低氧條件下與常規(guī)氧環(huán)境下培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞(human lens epithelial cell,HLEC)在抗氧化能力及基因表達(dá)譜上的差異。方法 HLEC傳代培養(yǎng)24 h后,分別置于體積分?jǐn)?shù)21%常氧培養(yǎng)箱、體積分?jǐn)?shù)1%低氧培養(yǎng)箱孵育24 h,消化、超速離心后收集細(xì)胞上清分別檢測SOD、CAT活性以及GSH含量,Trizol提取細(xì)胞總RNA進(jìn)l 行基因表達(dá)譜檢測,生物信息學(xué)軟件DAVID分析差異基因的功能聚類,qRT-PCR驗(yàn)證差異基因。結(jié)果低氧組細(xì)胞的SOD、CAT酶活性及GSH含量均低于常氧組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.05)。表達(dá)譜芯片結(jié)果顯示:符合差異表達(dá)標(biāo)準(zhǔn)的基因中,在低氧組細(xì)胞上調(diào)的基因有319個(gè),下調(diào)的基因有83個(gè)。Gene Ontology分析顯示:319個(gè)上調(diào)基因聚類于148個(gè)功能分類中,富集值最高的功能分類為低氧反應(yīng)。選取5個(gè)上調(diào)基因進(jìn)行qRT-PCR驗(yàn)證顯示:DDIT4、VEGFA、EDN1、VLDLR、EGLN1在低氧組中的表達(dá)量均高于常氧組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.05)。結(jié)論生理低氧狀態(tài)下HLEC的抗氧化能力弱于常氧組,兩種氧環(huán)境下細(xì)胞的基因表達(dá)譜不同,提示相應(yīng)的抗氧化損傷機(jī)制可能存在差異。
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院眼科;第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助(編號:81370997)~~
【分類號】:R776
【正文快照】: 生理?xiàng)l件下,人晶狀體上皮細(xì)胞(human lens ep-ithelial cells,HLEC)處于低氧環(huán)境中,氧分壓為3~7mm Hg(1 k Pa=7.5 mm Hg),相當(dāng)于體積分?jǐn)?shù)1%的氧含量[1]。晶狀體外周的房水及玻璃體含有抗壞血酸、谷胱甘肽等還原性物質(zhì),對維持晶狀體周圍的低氧環(huán)境起到了重要作用[2]。生理低氧
【共引文獻(xiàn)】
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