鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞中FOLR1相互作用蛋白的驗(yàn)證
本文關(guān)鍵詞:鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞中FOLR1相互作用蛋白的驗(yàn)證 出處:《中南大學(xué)》2014年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:目的:本研究目的是利用已建立的鼻咽癌的親本細(xì)胞系及紫杉醇耐藥細(xì)胞系,對課題組前期研究篩選出的信號分子(Lyn、UBC、 Ncaph2、IRAK3、Cu13)與FOLR1的相互作用進(jìn)行驗(yàn)證,并初步探討目的蛋白與FOLR1可能的相互作用通路。 方法:以免疫共沉淀及Western Blot方法驗(yàn)證體外培養(yǎng)的正常鼻咽上皮細(xì)胞NP69、三株鼻咽癌親本細(xì)胞(CNE-1、HNE-2、5-8F)及紫杉醇耐藥細(xì)胞(CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol、5-8F/Taxol)中FOLR1與Ly、UBC9、Ncaph2、IRAK3及Cu13是否存在相互作用。 結(jié)果:1.以FOLR1抗體對鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞系CNE-1/Taxol、 HNE-2/Taxol以及5-8F/Taxol細(xì)胞總蛋白進(jìn)行免疫共沉淀后,復(fù)合物中可以檢測到Cul3、IRAK3以及Ncaph2的表達(dá),但是無Lyn以及UBC9的表達(dá),而陰性對照中5個抗體均無表達(dá)。2.以Cu13、IRAK3、 Ncaph2、Lyn以及UBC9抗體對鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞系CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol以及5-8F/Taxol細(xì)胞總蛋白進(jìn)行免疫共沉淀后,Cul3、IRAK3以及Ncaph2沉淀的復(fù)合物中可以檢測到FOLR1的表達(dá),而Lyn及UBC9的復(fù)合物中未檢測到FOLR1的表達(dá),陰性對照NP69沉淀物中亦未檢測到FOLR1的表達(dá)。 結(jié)論:1.蛋白FOLR1與Cul3、IRAK3及Ncaph2在人鼻咽癌親本細(xì)胞和鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞中均存在相互作用,而與Lyn及UBC9沒有物理上的相互作用。2.Cu13、IRAK、Ncaph2、Lyn及UBC9在人永生化正常鼻咽上皮細(xì)胞、鼻咽癌親本細(xì)胞及鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞中均有表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】:中南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R739.63
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,本文編號:1317004
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