發(fā)布時間：2017-12-17 15:26

  本文關(guān)鍵詞：siRNA干擾β-catenin基因表達后喉癌Hep-2細胞對順鉑化療敏感性的研究

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【摘要】：目的:探討siRNA干擾β-catenin基因表達后喉癌Hep-2細胞對順鉑化療敏感性的變化。方法:利用RNA干擾技術(shù)干擾喉癌Hep-2細胞β-catenin基因,用RT-PCR和Western blot方法從mRNA和蛋白水平檢測目的基因干擾效果;實驗分為siRNA-β-catenin-Hep-2干擾組、陰性對照組、空白對照組;MTT法檢測不同濃度順鉑對3組細胞的增殖抑制率并計算半數(shù)抑制有效藥物濃度(IC50值),流式細胞儀檢查3組細胞相同濃度順鉑刺激后凋亡率的變化。結(jié)果:合成的β-catenin-siRNA干擾片段可以特異性下調(diào)β-catenin基因mRNA和蛋白的表達水平;RTPCR檢測說明siRNA-β-catenin-Hep-2干擾組mRNA相對表達量較空白對照組下降達70%(P0.05),Western blot結(jié)果顯示干擾組β-catenin蛋白相對表達為(0.545±0.111),較空白對照組(1.507±0.139)和陰性對照組(1.429±0.089)明顯下降(P0.05)。通過計算軟件得出順鉑對3組細胞的IC50值,β-cateninRNAi干擾組和空白對照組IC50分別值為(5.81±0.46)、(10.10±1.01)μg/ml,2組之間的差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。流式細胞儀檢測細胞凋亡率,β-catenin-RNAi干擾組細胞凋亡率為(26.15±0.60)%,明顯高于空白對照組的(14.16±0.05)%,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:干擾β-catenin的表達能有效增強喉癌細胞對化療藥物順鉑的敏感性,與順鉑協(xié)同促進Hep-2細胞的凋亡。這可為減少喉癌化療藥物的用量及減輕其不良反應提供了理論支持。
【作者單位】： 廣州市第十二人民醫(yī)院耳鼻咽喉科;
【基金】：化療藥物促喉癌細胞轉(zhuǎn)化為干細胞樣腫瘤細胞的機制研究(廣東省自然科學基金)
【分類號】：R739.65
【正文快照】： 喉癌是我國常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率有逐年上升的趨勢,盡管近年來惡性腫瘤的治療取得了很大進展,但喉癌患者的術(shù)后復發(fā)、轉(zhuǎn)移仍然是其治療瓶頸。術(shù)前、術(shù)后的放化療對于減少手術(shù)切除范圍、保留喉功能及預防術(shù)后復發(fā)的作用越來越突出,順鉑至今仍是喉癌化療的一線藥物,其耐

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本文編號：1300640