siRNA干擾β-catenin基因表達(dá)后喉癌Hep-2細(xì)胞對(duì)順鉑化療敏感性的研究
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【摘要】:目的:探討siRNA干擾β-catenin基因表達(dá)后喉癌Hep-2細(xì)胞對(duì)順鉑化療敏感性的變化。方法:利用RNA干擾技術(shù)干擾喉癌Hep-2細(xì)胞β-catenin基因,用RT-PCR和Western blot方法從mRNA和蛋白水平檢測(cè)目的基因干擾效果;實(shí)驗(yàn)分為siRNA-β-catenin-Hep-2干擾組、陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組;MTT法檢測(cè)不同濃度順鉑對(duì)3組細(xì)胞的增殖抑制率并計(jì)算半數(shù)抑制有效藥物濃度(IC50值),流式細(xì)胞儀檢查3組細(xì)胞相同濃度順鉑刺激后凋亡率的變化。結(jié)果:合成的β-catenin-siRNA干擾片段可以特異性下調(diào)β-catenin基因mRNA和蛋白的表達(dá)水平;RTPCR檢測(cè)說(shuō)明siRNA-β-catenin-Hep-2干擾組mRNA相對(duì)表達(dá)量較空白對(duì)照組下降達(dá)70%(P0.05),Western blot結(jié)果顯示干擾組β-catenin蛋白相對(duì)表達(dá)為(0.545±0.111),較空白對(duì)照組(1.507±0.139)和陰性對(duì)照組(1.429±0.089)明顯下降(P0.05)。通過(guò)計(jì)算軟件得出順鉑對(duì)3組細(xì)胞的IC50值,β-cateninRNAi干擾組和空白對(duì)照組IC50分別值為(5.81±0.46)、(10.10±1.01)μg/ml,2組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,β-catenin-RNAi干擾組細(xì)胞凋亡率為(26.15±0.60)%,明顯高于空白對(duì)照組的(14.16±0.05)%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:干擾β-catenin的表達(dá)能有效增強(qiáng)喉癌細(xì)胞對(duì)化療藥物順鉑的敏感性,與順鉑協(xié)同促進(jìn)Hep-2細(xì)胞的凋亡。這可為減少喉癌化療藥物的用量及減輕其不良反應(yīng)提供了理論支持。
【作者單位】: 廣州市第十二人民醫(yī)院耳鼻咽喉科;
【基金】:化療藥物促喉癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化為干細(xì)胞樣腫瘤細(xì)胞的機(jī)制研究(廣東省自然科學(xué)基金)
【分類(lèi)號(hào)】:R739.65
【正文快照】: 喉癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì),盡管近年來(lái)惡性腫瘤的治療取得了很大進(jìn)展,但喉癌患者的術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移仍然是其治療瓶頸。術(shù)前、術(shù)后的放化療對(duì)于減少手術(shù)切除范圍、保留喉功能及預(yù)防術(shù)后復(fù)發(fā)的作用越來(lái)越突出,順鉑至今仍是喉癌化療的一線藥物,其耐
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8 岳曉;張志勇;楊e,
本文編號(hào):1300640
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