本文關(guān)鍵詞：人原代晶狀體上皮細(xì)胞中PEDF基因下調(diào)引起波形蛋白和αB-晶狀體蛋白含量的變化

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【摘要】：目的研究人原代晶狀體上皮細(xì)胞中,下調(diào)色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)的表達(dá)對(duì)波形蛋白和αB-晶狀體蛋白表達(dá)的影響。方法取20~35歲青年人晶狀體上皮細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)。構(gòu)建三種短發(fā)卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)以特異性下調(diào)原代人晶狀體上皮細(xì)胞中的PEDF基因RNA表達(dá)水平。感染細(xì)胞后,用Real-time PCR檢測(cè)PEDF基因mRNA的表達(dá)水平,確定RNA干擾效率。人原代晶狀體上皮細(xì)胞PEDF基因RNA干擾48 h后,用Western Blot檢測(cè)其中波形蛋白以及αB-晶狀體蛋白表達(dá)水平的變化,以shRNA-scramble組為陰性對(duì)照組。結(jié)果人原代晶狀體上皮細(xì)胞被成功分離培養(yǎng),帶有綠色熒光蛋白的表達(dá)PEDF shRNA的病毒載體對(duì)人原代晶狀體上皮細(xì)胞的感染效率都在80%左右。Realtime PCR結(jié)果顯示PEDF基因mRNA的表達(dá)明顯被三種shRNA下調(diào)。Western Blot結(jié)果顯示PEDF基因的表達(dá)下調(diào)引起了波形蛋白的表達(dá)下降(在三個(gè)實(shí)驗(yàn)組中分別下降了72%、79%和93%)以及αB-晶狀體蛋白的表達(dá)增加(在三個(gè)實(shí)驗(yàn)組中分別增加了219%、204%、93%)。結(jié)論人原代晶狀體上皮細(xì)胞中PEDF基因下調(diào)可引起維持晶狀體透明性的兩種重要蛋白的改變,提示PEDF與白內(nèi)障形成有一定的聯(lián)系。
【作者單位】： 中山大學(xué)中山眼科中心;
【分類號(hào)】：R776.1
【正文快照】： l l 楊靜生,山東人,博士,住院醫(yī)師。E-mail:hiyangjing101246@hotmail.comAbout YANG Jing:Female,born inNovember,1981.Ph D.E-mail:hiy-angjing101246@hotmail.com色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derivedfactor,PEDF)是絲氨酸蛋白酶抑制劑家族中的一員,可以表達(dá)于眼

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1 楊靜;;人原代晶狀體上皮細(xì)胞中PEDF基因下調(diào)引起波形蛋白和αB-晶狀體蛋白含量的變化[J];眼科新進(jìn)展;2015年08期

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1297963