本文關(guān)鍵詞：MicroRNA-34a對(duì)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤的生長抑制作用及分子機(jī)制研究

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【摘要】：目的:探討MicroRNA-34a(miR-34a)對(duì)鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤的生長抑制作用及其可能的分子機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞系,利用mi R-34a重組質(zhì)粒及Scrambled mi RNA重組質(zhì)粒分別構(gòu)建miR-34a及陰性對(duì)照mi RNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株,q RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)mi R-34a表達(dá)。選取6周齡雄性BLAB/c裸鼠15只,隨機(jī)分為3組:mi R-34a組(5只),Scrambled mi RNA組(5只)及空白對(duì)照組(5只)。于裸鼠背部近右后肢皮下注射重組CNE-2細(xì)胞懸液,建立移植瘤模型,每7 d測(cè)定實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組腫瘤體積變化,飼養(yǎng)35 d后處死,完整取出腫瘤,測(cè)定腫瘤重量及終體積。提取腫瘤組織RNA及蛋白,采用qRT-PCR檢測(cè)腫瘤組織中miR-34a的表達(dá);分別采用q RT-PCR及免疫組化法檢測(cè)細(xì)胞周期調(diào)控基因CDK6及抗凋亡基因Bcl-2 m RNA及蛋白的表達(dá)。結(jié)果:mi R-34a穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CNE-2細(xì)胞后可顯著提高細(xì)胞內(nèi)mi R-34a表達(dá)量(P0.05)。15只裸鼠均成功構(gòu)建皮下移植瘤模型,飼養(yǎng)21 d后,與Scrambled mi RNA組及空白對(duì)照組相比,mi R-34a組腫瘤體積顯著減小(P0.05)。飼養(yǎng)35 d后,mi R-34a組、Scrambled mi RNA組及空白對(duì)照組腫瘤平均重量分別為(0.81±0.13)g、(1.47±0.21)g、(1.58±0.37)g,腫瘤平均終體積分別為(351.37±98.19)mm3、(798.75±91.04)mm3、(849.62±101.32)mm3,mi R-34a組腫瘤平均重量及腫瘤平均終體積均顯著小于其余兩組(P0.05)。mi R-34a組中mi R-34a的表達(dá)量顯著高于其余兩組(P0.05);mi R-34a組中CDK6及Bcl-2 m RNA及蛋白表達(dá)量顯著低于其余兩組(P0.05)。結(jié)論:miR-34a可能通過下調(diào)CNE-2細(xì)胞內(nèi)CDK6及Bcl-2的表達(dá)水平從而抑制CNE-2細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤的生長,發(fā)揮其抗腫瘤作用。
【作者單位】： 蚌埠醫(yī)學(xué)院;第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長海醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(81300748) 安徽省高等學(xué)校自然科學(xué)研究項(xiàng)目(No.KJ2015B0106y) 蚌埠醫(yī)學(xué)院自然科學(xué)基金(BYKY1436)
【分類號(hào)】：R739.63
【正文快照】： 鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)是一種CNE-2細(xì)胞中穩(wěn)定過表達(dá)miR-34a,并構(gòu)建重組惡性程度較高的鼻咽部上皮細(xì)胞來源的惡性腫CNE-2細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤模型,研究miR-34a對(duì)瘤[1],因其病變發(fā)展隱匿,大多數(shù)患者在就診時(shí)已CNE-2細(xì)胞移植瘤的生長的抑制作用。通過檢測(cè)腫處于腫

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本文編號(hào)：1268891