本文關(guān)鍵詞：異丙托溴銨對變應(yīng)性鼻炎小鼠鼻黏膜Th1、Th2、Th17及Treg細胞的影響

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【摘要】：目的：異丙托溴銨作為抗膽堿藥的一種,能夠抑制鼻腔內(nèi)的副交感神經(jīng)纖維,臨床上,可用來控制變應(yīng)性鼻炎的鼻部癥狀的發(fā)作。關(guān)于異丙托溴銨在改善變應(yīng)性鼻炎癥狀同時,能否對機體細胞和體液免疫產(chǎn)生影響,這方面國內(nèi)外鮮有報道。本實驗通過構(gòu)建AR動物模型,探討抗膽堿藥對AR動物模型鼻腔局部免疫環(huán)境的影響,為抗膽堿藥的臨床治療提供理論依據(jù)。 方法：選用32只5-6周齡BALB/c雌性小鼠,隨機分為：16只用于變應(yīng)性鼻炎模型的建立,另16只用于對照。致敏方法：采用經(jīng)典的OVA致敏法構(gòu)建變應(yīng)性鼻炎模型,分別在第0天、第5天通過腹腔注射予以基礎(chǔ)致敏,再從第12天起用OVA進行連續(xù)7天的滴鼻激發(fā),之后再次使用OVA予以間天長期緩慢滴鼻刺激10周,其余各組使用生理鹽水代替。整個建模過程長達4月余,以模擬變應(yīng)性鼻炎發(fā)病的慢性過程。11只小鼠建模成功后,隨機分為模型組(5只)和模型治療組(6只),對照組也分為對照空白組(8只),對照治療組(8只)。模型治療組和對照治療組小鼠即開始予以3mg/ml異丙托溴銨201μl每側(cè)鼻腔滴鼻治療,持續(xù)給藥4周,同時模型組與對照組用等量生理鹽水代替異丙托溴銨滴鼻,在治療期間,模型治療組和模型組均繼續(xù)予以3%OVA溶液10μ1每側(cè)鼻腔間天滴鼻刺激。治療結(jié)束后,取小鼠鼻粘膜,通過HE染色進行組織形態(tài)學觀察對比。由于小鼠死亡等原因,最后用于分析的樣本數(shù)分別為對照組5只,模型組3只,模型治療組5只,對照治療組5只。采用Westernblot法檢測各組小鼠IL-4、IL-17、IFN-γ、Foxp3蛋白含量,同時還用RT-PCR法檢測IL-4、IL-17mRNA含量。 結(jié)果：治療前,模型治療組、模型組行為評分均達到或超過變應(yīng)性鼻炎模型評分標準,建模成功。治療后,模型治療組行為評分低于模型組(P0.05)。Western blot結(jié)果顯示,與對照組比較,在變應(yīng)性鼻炎小鼠模型中,鼻粘膜IL-4及IL-17的表達顯著升高(P0.05),IFN-γ和Foxp3蛋白表達也略有升高,但無統(tǒng)計學意義(P0.05)。變應(yīng)性鼻炎模型經(jīng)異丙托溴銨局部治療后,IL-4表達有顯著下降(P0.05),而Foxp3表達有升高趨勢,但沒有統(tǒng)計學差異(p0.05),而IFN-γ及IL-17細胞因子表達沒有明顯變化(p0.05)。對照組經(jīng)異丙托溴銨治療后,鼻粘膜局部的IL-4、IL-17、Foxp3的表達有升高趨勢。RT-PCR結(jié)果顯示,與對照組比較,變應(yīng)性鼻炎小鼠的IL-4及IL-17的mRNA表達有升高(p0.05),經(jīng)異丙托溴銨治療后,IL-4表達有下降趨勢(p0.05),與Western blot結(jié)果一致；而IL-17表達也有顯著下降(p0.05)。 結(jié)論：1)通過蛋白質(zhì)雜交及定量RT-PCR分析顯示,變應(yīng)性鼻炎小鼠模型的鼻粘膜中存在Th2細胞優(yōu)勢為主的免疫失衡,同時IL-17表達也顯著升高。2)異丙托溴銨在改善變應(yīng)性鼻炎癥狀的同時,能降低鼻粘膜中Th2細胞分泌的細胞因子IL-4,并增強Treg細胞的Foxp3的產(chǎn)生,但沒有改變IL-17及IFN-γ的表達。3)長期使用異丙托溴銨可能對正常小鼠鼻粘膜產(chǎn)生一定程度的炎癥反應(yīng),如細胞因子IL-4, IL-17, Foxp3呈現(xiàn)表達升高的反應(yīng)。圖9幅,表10個,
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R765.21

【共引文獻】

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本文編號：1263523