本文關(guān)鍵詞：免疫性內(nèi)耳病模型的建立及內(nèi)耳干擾素-γ的表達

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【摘要】：目的：建立免疫性內(nèi)耳病模型，并檢測內(nèi)耳干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）的表達變化情況。 方法：20只豚鼠按配對設(shè)計方法，分為實驗組和對照組。實驗組采用鑰孔戚血藍蛋白（Keyhole Limpet Hemocyanin, KLH）在已致敏的豚鼠圓窗龕局部免疫，對照組用磷酸鹽緩沖液（Phosphate Buffered Saline，PBS）代替KLH免疫豚鼠。分別于免疫前和末次免疫2周后，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定血清中特異性抗KLH抗體水平變化，采用聽覺誘發(fā)電位測試系統(tǒng)測試并記錄聽性腦干誘發(fā)電位（authority brainstem response audiometry，ABR）Ⅲ波閾值，之后斷頭和制作內(nèi)耳石蠟切片，光鏡觀察豚鼠內(nèi)耳結(jié)構(gòu)變化，并行酶免疫組織化學(xué)試驗，觀察內(nèi)耳干擾素-γ的表達。 結(jié)果：實驗組免疫前后ABRⅢ波閾值的均值差異有顯著性（P＜0.001），以免疫前全部實驗動物均值加2倍標(biāo)準差（41.10dB）判斷，實驗組有7只動物（12耳）出現(xiàn)聽損，，且免疫后血清中特異性KLH抗體水平較免疫前明顯升高（P＜0.01）。免疫前后對照組ABRⅢ波閾值的均值和血清特異性KLH抗體水平的差異均無顯著性（P＞0.05）。組間對比，免疫后實驗組ABRⅢ波閾值的均值和血清特異性抗KLH抗體水平均高于對照組，差異有著性（P＜0.05）。內(nèi)耳石蠟切片光鏡觀察發(fā)現(xiàn)實驗組免疫后內(nèi)耳組織中有炎細胞浸潤，部分豚鼠內(nèi)耳有迷路積水。酶免疫組織化學(xué)試驗觀察顯示對照組豚鼠內(nèi)耳組織中無明顯褐色反應(yīng)，實驗組褐色反應(yīng)（即抗IFN-γ特異性抗體陽性反應(yīng)）主要分布在以下部位：血管紋，螺旋韌帶，螺旋神經(jīng)節(jié)，Corti器，蝸軸小血管周圍。 結(jié)論：采用KLH在已致敏的豚鼠圓窗龕局部免疫，誘導(dǎo)并造成免疫性內(nèi)耳病模型的成功率較高。正常豚鼠內(nèi)耳中幾乎沒有IFN-γ表達，而在免疫性內(nèi)耳病豚鼠內(nèi)耳中IFN-γ呈顯著表達。依據(jù)其作用機制，提示免疫性內(nèi)耳病發(fā)生發(fā)展可能與IFN-γ表達有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R764.3;R-332

【參考文獻】

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本文編號：1221985