發(fā)布時間：2017-11-22 19:23

  本文關(guān)鍵詞：SMP30及CaM在正常人及不同年齡白內(nèi)障患者晶狀體上皮細(xì)胞中的表達(dá)研究

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【摘要】：目的本實驗通過檢測兩種鈣結(jié)合蛋白-SMP30及CaM在正常人及不同年齡白內(nèi)障患者LECs的表達(dá)情況。以了解這兩種蛋白在正常人和白內(nèi)障患者LECs的表達(dá)是否存在差異性、在不同年齡白內(nèi)障患者LECs的表達(dá)是否有年齡相關(guān)性，及二者之間的關(guān)系。同時應(yīng)用正常細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，觀察正常培養(yǎng)條件下人晶狀體上皮細(xì)胞系SRA01/04細(xì)胞株的形態(tài)改變，衰老狀態(tài)的出現(xiàn)，同時檢測SMP30的表達(dá)是否具年齡相關(guān)性。 方法收集正常青年組(19~45歲)晶狀前囊膜12例；白內(nèi)障患者按不同年齡收集1~18歲兒童組、19~45歲青年組、46~60歲中年組、＞60歲老年組晶狀體前囊膜各12例。對所取囊膜進(jìn)行固定、脫水、石蠟包埋、切片。采用間接免疫熒光法檢測LECs中SMP30及CaM的表達(dá)情況。采用體外正常培養(yǎng)技術(shù)，正常培養(yǎng)人晶狀體上皮細(xì)胞系SRA01/04細(xì)胞，倒置顯微鏡觀察其形態(tài)學(xué)改變并拍照，檢測β-半乳糖苷酶的含量了解細(xì)胞衰老情況，同時細(xì)胞爬片免疫熒光法檢測其SMP30的表達(dá)。 結(jié)果SMP30及CaM在所有標(biāo)本LECs中均有表達(dá)，且均主要在細(xì)胞漿，胞核少量表達(dá)。SMP30在白內(nèi)障青年組（0.181±0.034）LECs的表達(dá)明顯高于正常青年組（0.087±0.007）(P＜0.01)； SMP30在兒童組（0.185±0.020）、青年組、中年組（0.207±0.018）白內(nèi)障患者LECs的表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異(所有P值均＞0.05)，但在老年組（0.126±0.027）的表達(dá)明顯低于其它三組(P值均＜0.01）。CaM在白內(nèi)障青年組（0.507±0.288）LECs的表達(dá)也高于正常青年組（0.297±0.007）(P＜0.05)；而CaM在不同年齡白內(nèi)障組患者兒童組（0.624±0.207）、青年組（0.507±0.288）、中年組（0.704±0.168）、老年組（0.5607±0.288）LECs間的表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異（所有P值均＞0.05）。五組中所有樣本LECs中CaM的表達(dá)均較SMP30高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P值均＜0.05）。SRA01/04細(xì)胞株中，8th代細(xì)胞呈梭形或橢圓形，β-半乳糖苷酶的陽性細(xì)胞率＜5%，SMP30平均IOD為0.0869±0.0148；但28th代細(xì)胞形態(tài)改變，由梭型變成橢圓形或圓形，細(xì)胞變大，胞漿變少，胞漿出現(xiàn)空泡，胞核色淡染，β-半乳糖苷酶的陽性細(xì)胞＞85%，，認(rèn)為出現(xiàn)衰老，SMP30（0.0130±0.0016）表達(dá)明顯低于8th代細(xì)胞（P值均＜0.05）。 結(jié)論SMP30及CaM表達(dá)于正常人及白內(nèi)障患者LECs。SMP30及CaM在白內(nèi)障患者LECs的表達(dá)均較正常人高，可能是晶狀體損傷的標(biāo)志，作為人LECs中一個保護(hù)因子，發(fā)生白內(nèi)障時反應(yīng)性增高。SMP30在白內(nèi)障患者LECs及SRA01/04表達(dá)均具年齡相關(guān)性，＞60歲時其表達(dá)量的下降是年齡相關(guān)性白內(nèi)障發(fā)生的原因之一。CaM在白內(nèi)障患者LECs的表達(dá)無年齡相關(guān)性。CaM在所有樣本LECs中的表達(dá)均較SMP30高，二者在人LECs的鈣調(diào)節(jié)中可能起協(xié)同作用。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R776.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1215799