本文關(guān)鍵詞：1，25-二羥維生素D3抑制小鼠角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的 1觀察1,25-二羥維生素D3[1,25(OH)2D3]對佐劑性關(guān)節(jié)炎(adjuvant arthritis,AA)小鼠免疫功能的影響,探究1,25(OH)2D3對T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫的可能調(diào)節(jié)機(jī)制。 2通過建立同種異體小鼠穿透性角膜移植實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ�，探�?,25(OH)2D3抑制穿透性角膜移植免疫排斥反應(yīng)的可能機(jī)制。 方法 1將C57BL/6小鼠隨機(jī)分成3組，每組6只，分別命名為：正常組、AA模型組和1,25(OH)2D3干預(yù)組。除正常組外，每只小鼠右足跖部皮下注射弗氏完全佐劑誘導(dǎo)AA模型,并于初次注射后一周再次注射相同劑量的弗氏完全佐劑，強(qiáng)化免疫反應(yīng)。從二次注射后當(dāng)天,干預(yù)組腹腔注射1,25(OH)2D3，1次/d，100ng/次,同時其余兩組給予同等劑量生理鹽水，按照此方法，隔日給藥一次,連續(xù)兩周。觀察1,25(OH)2D3對小鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)及外周血T細(xì)胞亞群的影響。 2以C57BL/6小鼠為受體, Bab/c小鼠為供體，建立同種異體穿透性角膜移植聯(lián)合皮膚移植模型。受體小鼠隨機(jī)分為3組，每組6只，分別命名為正常組、移植組和1,25(OH)2D3干預(yù)組。除正常組外，其余小鼠右眼均接受同種異體穿透性角膜移植手術(shù)，背部均接受皮膚移植手術(shù)。術(shù)后當(dāng)天，干預(yù)組腹腔注射1,25(OH)2D3，1次/d，100ng/次,同時其余兩組給予同等劑量生理鹽水，按照此方法，隔日給藥一次,連續(xù)13d。術(shù)后第13d應(yīng)用流式細(xì)胞儀分析各組小鼠外周血CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞比值，γδ T細(xì)胞比例；應(yīng)用實(shí)時熒光定量PCR分析各組脾淋巴細(xì)胞IFNγmRNA、IL-10mRNA和IL-17mRNA表達(dá)量。術(shù)后13d內(nèi)每日觀察角膜植片及皮膚植片的存活情況。 結(jié)果 1實(shí)驗(yàn)第21天，干預(yù)組的脾指數(shù)和胸腺指數(shù)均明顯低于佐劑性關(guān)節(jié)炎模型組，與模型組比較，干預(yù)組CD4+細(xì)胞數(shù)量明顯減少, CD8+細(xì)胞數(shù)量明顯增加, CD4+/CD8+比例明顯減少，差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P 0.05)。 2與移植組相比，1,25(OH)2D3干預(yù)組角膜植片渾濁、水腫及新生血管程度較輕，皮膚植片存活時間較長；術(shù)后第13天，干預(yù)組與移植組外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞比值分別為（2.36±0.41）和（3.19±0.53），P〈0.05，差別有統(tǒng)計學(xué)意義；與正常組相比，移植組脾淋巴細(xì)胞IFN-γ和IL-17mRNA表達(dá)水平顯著升高，IL-10mRNA顯著降低；與移植組相比，1,25-二羥維生素D3干預(yù)組脾淋巴細(xì)胞IFN-γ和IL-17mRNA表達(dá)水平顯著降低，IL-10mRNA顯著升高；移植組外周血γδT細(xì)胞比例顯著高于正常組，，干預(yù)組外周血γδT細(xì)胞比例較移植組有明顯降低。 結(jié)論 11,25(OH)2D3可通過調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞亞群CD4+、CD8+細(xì)胞數(shù)量及比例來改善AA模型小鼠免疫功能紊亂,進(jìn)而抑制病情的進(jìn)展。 21,25(OH)2D3可使同種異體小鼠穿透性角膜移植術(shù)后外周血CD4+T細(xì)胞數(shù)量下降，CD8+T細(xì)胞數(shù)量上升，CD4+/CD8+比值下降，即通過調(diào)節(jié)CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞數(shù)量及比例，抑制T細(xì)胞介導(dǎo)的移植排斥反應(yīng) 31,25(OH)2D3可通過下調(diào)具有促進(jìn)炎癥反應(yīng)作用的γδT細(xì)胞比例，對小鼠穿透性角膜移植后的免疫排斥反應(yīng)產(chǎn)生一定的抑制作用 41,25(OH)2D3能明顯抑制同種異體小鼠穿透性角膜移植術(shù)后Th1細(xì)胞分泌的IFN-γ,Th17細(xì)胞分泌的IL-17,并且顯著提高Th2細(xì)胞分泌的IL-10.
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R779.65

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