抗人CD133單克隆抗體的研制及生物學(xué)活性研究
本文關(guān)鍵詞:抗人CD133單克隆抗體的研制及生物學(xué)活性研究
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【摘要】:目的:本研究擬制備鼠抗人CD133單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株并鑒定其單抗生物活性,為后續(xù)制備抗人CD133單鏈抗體及構(gòu)建免疫毒素并靶向殺傷喉癌干細(xì)胞進(jìn)行免疫治療提供前期工作基礎(chǔ)。 方法:利用純化的CD133抗原免疫Balb/c小鼠,采用PEG促融合技術(shù),取骨髓瘤細(xì)胞SP2/0與上述免疫小鼠脾細(xì)胞進(jìn)行融合,選用ELISA法篩選雜交瘤,培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,同時(shí)多次檢測(cè)雜交瘤活性和抗體亞型后,擴(kuò)大培養(yǎng),陽(yáng)性克隆凍存。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)抗人CD133單克隆抗體與基因工程CHO(CD133~+)細(xì)胞和Hep-2細(xì)胞株中CD133~+細(xì)胞的結(jié)合情況。 結(jié)果:應(yīng)用PEG介導(dǎo)細(xì)胞融合,共融合96孔培養(yǎng)板8塊,融合率約為51.3%。連續(xù)克隆化培養(yǎng),制得1株穩(wěn)定分泌特異性抗CD133分子的雜交瘤細(xì)胞株(aCD133,克隆號(hào)為15),該株單抗經(jīng)體外連續(xù)傳代培養(yǎng)。經(jīng)快速定性試紙法鑒定該單抗亞型為IgG1,輕鏈為к鏈,通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)已制備單抗與CHO細(xì)胞和Hep-2細(xì)胞中CD133抗原的結(jié)合率分別為78.62±8.25%和1.8±0.45%。 結(jié)論:成功制備分泌抗人CD133單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,,該單抗具有CD133+細(xì)胞特異親和性。本實(shí)驗(yàn)為后續(xù)抗人CD133單鏈抗體的制備及構(gòu)建免疫毒素并靶向殺傷喉癌干細(xì)胞的治療奠定基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R739.65
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 張華;李蘇宜;;CD133與腫瘤干細(xì)胞研究進(jìn)展[J];癌癥;2010年03期
2 Monika Olempska;Patricia Alice Eisenach;Ole Ammerpohl;Hendrik Ungefroren;Fred Fandrich;Holger Kalthoff;;Detection of tumor stem cell markers in pancreatic carcinoma cell lines[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2007年01期
3 吳嘉涵;鹿欣;;CA125單克隆抗體治療卵巢癌的研究進(jìn)展[J];國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2009年01期
4 李聰然;石炳毅;蔡明;李州利;王爽;;巴利昔單抗對(duì)腎移植排斥反應(yīng)及移植物存活影響的Meta分析[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2009年08期
5 陳正堂;;腫瘤分子靶向治療的臨床應(yīng)用及其思考[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2007年08期
6 劉瑞振;張長(zhǎng)弓;何瓊;蘇金華;陳彩霞;陳福;莊國(guó)洪;;抗人DcR3單克隆抗體的制備、鑒定及應(yīng)用[J];免疫學(xué)雜志;2009年01期
7 孔君;劉箐;韓躍武;王天昌;劉金芝;;單克隆抗體制備技術(shù)的最新進(jìn)展及應(yīng)用前景[J];免疫學(xué)雜志;2011年02期
8 劉文明;童德文;李立;邢明輝;趙俊;;抗腫瘤單克隆抗體藥物的研究進(jìn)展[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年08期
9 郭粉粉;梁文波;張學(xué)梅;;單克隆抗體制備技術(shù)及應(yīng)用的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年08期
10 衛(wèi)旭東;周梁;程磊;田潔;;CD133作為喉癌腫瘤起始細(xì)胞標(biāo)志的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2006年12期
中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 陳偉;抗人CD133單克隆抗體的制備及CD133抗原在肝癌組織中的表達(dá)[D];蘇州大學(xué);2010年
本文編號(hào):1165990
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