巖茶提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠視網(wǎng)膜光損傷保護(hù)及其機(jī)制的研究
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【摘要】:第一部分 大鼠視網(wǎng)膜光損傷模型建立及病理形態(tài)學(xué)研究 目的: 建立大鼠視網(wǎng)膜光損傷模型,探討慢性視網(wǎng)膜光損傷模型中視網(wǎng)膜病理形態(tài)學(xué)的改變。 方法: 自制光損傷箱,采用白色熒光燈,光照強(qiáng)度平均為4000±200Lux,暗適應(yīng)24小時(shí)持續(xù)照射12小時(shí)建立大鼠視網(wǎng)膜光損傷模型,Sprague-Dawley (SD)大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組,光損傷模型組,分別取視網(wǎng)膜制作石蠟切片,HE染色,通過組織病理學(xué)觀察各組視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果: 1、成功建立光損傷大鼠模型。 2、正常對(duì)照大鼠視網(wǎng)膜形態(tài)正常,結(jié)構(gòu)層次清晰。外核層(outer nuclear layer, ONL)整齊排列,細(xì)胞染色均勻,約10~12層;感光細(xì)胞內(nèi)外節(jié)交界清晰,排列整齊。光損傷模型組視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)疏松,層間分界不清晰;內(nèi)核層(inter nuclear layer, INL)排列疏松紊亂,核層減少;外核層變薄,約3-4個(gè)細(xì)胞厚度,細(xì)胞間隙增大,部分細(xì)胞核固縮;感光細(xì)胞內(nèi)外節(jié)交界不清,疏松排列,見大量空泡變性。 3、光照后,與正常組比較,模型組視網(wǎng)膜外核層厚度變薄(P0.05)。 結(jié)論: 4000±200Lux持續(xù)12小時(shí)照射造成視網(wǎng)膜組織慢性光損傷,導(dǎo)致細(xì)胞退行性改變,損傷主要累及光感受器和外核層。 第二部分 巖茶提取物對(duì)大鼠視網(wǎng)膜光損傷保護(hù)作用 目的: 通過對(duì)光損傷大鼠尾靜脈注射巖茶提取物,觀察光損傷大鼠視網(wǎng)膜病理形態(tài),生化指標(biāo)的變化,探討巖茶提取物對(duì)大鼠視網(wǎng)膜光損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制,為臨床治療提供理論依據(jù)。 方法: 40只SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組,光損傷模型組,光損傷給藥組,其中給藥組分為高劑量組和低劑量組。自制光損傷箱,采用平均光照強(qiáng)度4000±200Lux的白色熒光燈,持續(xù)照射12小時(shí)建立視網(wǎng)膜光損傷模型,光照前暗適應(yīng)24小時(shí),采用尾靜脈注射給藥,于光照前3天及光照后7天,每日一次用藥,至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。處死大鼠取眼球,左眼球視網(wǎng)膜用于檢測(cè)超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性以及丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量,右眼球用于制作石蠟切片,進(jìn)行HE染色,觀察形態(tài)變化。 結(jié)果: 1、形態(tài)學(xué)檢查:光損傷模型組視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)疏松,層間分界不清晰;外核層水腫、變性、變薄,約3-4個(gè)細(xì)胞厚度,細(xì)胞間隙增大,部分細(xì)胞核固縮;感光細(xì)胞內(nèi)外節(jié)交界不清,疏松排列,見大量空泡變性。高劑量組形態(tài)相對(duì)完好,結(jié)構(gòu)清晰,外核層稍微變薄,感光細(xì)胞的內(nèi)、外節(jié)排列較為規(guī)則。低劑量組外核層排列紊亂,變薄,感光細(xì)胞內(nèi)外節(jié)見少量空泡。 2、SOD、MDA檢測(cè):光照后7天,正常組SOD活力為57.88±6.32U/mgprot, MDA含量為3.99±0.59nmol/mgprot,模型組SOD活力降低、MDA含量升高(P0.05)。與模型組比較,光損傷給藥組SOD活力升高、MDA含量降低(P0.05),其中高劑量組較低劑量組變化明顯,P值0.05。 3、外核層厚度檢測(cè):光照后,與正常組相比,模型組視網(wǎng)膜外核層厚度明顯變薄(P0.05),給藥組有所改善,其中高劑量組改善明顯(P0.05)。 結(jié)論: 1、巖茶提取物對(duì)光損傷大鼠視網(wǎng)膜形態(tài)具有保護(hù)作用,有助于維持正常生理功能。 2、巖茶提取物可以增強(qiáng)大鼠視網(wǎng)膜組織中SOD的活性,同時(shí)使MDA含量明顯下降,提示其可減輕光損傷引起的視網(wǎng)膜氧化應(yīng)激反應(yīng),具有抗氧化作用,對(duì)延緩視網(wǎng)膜光損傷、保護(hù)視細(xì)胞可能具有一定的作用。 3、巖茶提取物對(duì)視網(wǎng)膜光損傷的保護(hù)具有明顯的劑量依賴關(guān)系。
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R774.1
【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1165551
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