本文關鍵詞：多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1通過激活NF-κB途徑導致高糖人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞凋亡

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【摘要】：目的探討多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[poly(adenosine diphosphate-ribose)polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在高糖人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞(retinal vascular endothelial cells,RVEC)中的相互作用及其在人RVEC中的表達定位及作用機制。方法體外培養(yǎng)人RVEC及HEK293T細胞,并進行傳代,同時構建高糖人RVEC細胞模型。構建PARP-EGFP及Flag-NF-κB質(zhì)粒,酶切鑒定后轉(zhuǎn)染高糖培養(yǎng)的人RVEC,Western blot法檢測重組質(zhì)粒表達目的基因的效果,并應用Western blot法和免疫共沉淀法檢測高糖人RVEC中PARP-1和NF-κB的相互作用。PARP-EGFP和Flag-NF-κB質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染人RVEC,激光共聚焦掃描顯微鏡檢測PARP-1和NF-κB在高糖人RVEC中的定位及其相互作用。結果人RVEC復蘇后24 h貼壁,細胞呈扁平梭形,3 d左右細胞開始融合呈鋪路石樣,單層生長,鋪滿瓶底,并可見接觸抑制現(xiàn)象。成功構建PARP-EGFP及Flag-NF-κB質(zhì)粒,并有效表達目的基因。免疫共沉淀結果顯示PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白質(zhì),高糖組NF-κB p50的條帶比正常對照組明顯增粗,并且高糖情況下PARP-1結合NF-κB的量較正常對照組明顯增加。激光共聚焦掃描顯微鏡結果顯示PARP和NF-κB均表達于正常的人RVEC的細胞核和核周區(qū)域,當受到高濃度葡萄糖影響后,PARP-1和NF-κB均集中表達于細胞核內(nèi),尤以NF-κB最顯著。結論 PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白質(zhì),血糖增高時,PARP-1可能進入細胞核內(nèi)并結合同時進入細胞核的NF-κB,激活NF-κB信號通路,引起RVEC凋亡,導致DR的發(fā)生。
【作者單位】： 大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院眼科;上海交通大學附屬上海市第一人民醫(yī)院眼科;
【基金】：國家自然科學基金資助(編號:81300737)~~
【分類號】：R587.2;R774.1
【正文快照】： l l l l 秦秀虹出生,河北保定人,博士,副主任醫(yī)師。聯(lián)系電話:0411-83635963;E-mail:18098876506@163.comAbout LU Jian-Min:Male,born inApril,1980.Medical doctor,associatechief physician.Tel:+86-411-83635963;E-mail:18098876506@163.com修回日期:2014-11-05Accepted da

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2 王文舉;李鴻鈞;孫茂盛;;NF-κB與持久炎癥及腫瘤發(fā)生關系[J];生命的化學;2007年03期

3 楊季云;NF-κB活化與腫瘤細胞對治療的敏感性[J];中國腫瘤生物治療雜志;2001年03期

4 李憲孟 ,李麗;NF-κB及其在腫瘤中的作用[J];廣西醫(yī)學;2003年11期

5 齊詠;郭悅鵬;袁曉梅;李金蘭;馬利軍;;慢性阻塞性肺疾病患者單核細胞NF-κB活性的研究(英文)[J];新鄉(xiāng)醫(yī)學院學報;2006年06期

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7 李勇;張培建;金成;;NF-κB與肝臟缺血再灌注損傷的研究進展[J];中國現(xiàn)代普通外科進展;2008年01期

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本文編號：1155543