本文關(guān)鍵詞：色素上皮衍生因子多肽對(duì)氧誘導(dǎo)小鼠視網(wǎng)膜病新生血管的抑制作用

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【摘要】：目的：觀察本課題組自行研制的色素上皮衍生因子(PEDF)多肽對(duì)高氧誘導(dǎo)新生小鼠視網(wǎng)膜病新生血管的抑制作用。方法：C57BL/6J新生小鼠在生后(P)第7天至12天日齡(P7-P12)吸入75%高氧后,返回空氣中,制備氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病(0IR)小鼠模型。通過兩種方式給予OIR小鼠PEDF多肽,即玻璃體腔內(nèi)注射和直接滴眼。玻璃體腔內(nèi)注射組選擇右眼注射,采用不同的注射濃度(0.5μg/μL,1μg/μL,2μL/μL),注射量均為1μL,注射時(shí)間均為P12、P14各一次,左眼作為自身對(duì)照。直接滴眼組亦采用不同的滴眼濃度(0.5μg/μL,1μg/μL,2μL/μL)滴入量均為3 μμL,滴入時(shí)間均為P12-P16連續(xù)5 d,每天一次。各組在P17取材做視網(wǎng)膜鋪片和切片,對(duì)視網(wǎng)膜新生血管進(jìn)行形態(tài)觀察和新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核計(jì)數(shù)的定量研究。最后,各組取最低劑量的亞組,通過實(shí)時(shí)熒光PCR及免疫組化的方式,檢測各亞組PEDF-mRNA及PEDF蛋白的表達(dá)水平,與OIR組及空氣組進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果：(1)注射組不同給藥濃度結(jié)果：在P12、P14各一次右眼注射3種劑量的PEDF多肽,計(jì)數(shù)突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核,結(jié)果顯示0.5μ∥μL,1μg/μL,2μ/μL組右眼細(xì)胞核數(shù)分別為(44.41±1.46)個(gè)、 (43.46±1.20)個(gè)(38.06+0.95)個(gè),其中0.5 μμg/μμL與1μg/μL組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,2μg/μL組細(xì)胞核數(shù)低于1μg/μL組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。三組右眼細(xì)胞核數(shù)均低于OIR組(69.51±1.74個(gè)),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。三組右眼細(xì)胞核數(shù)亦均低于左眼組(69.12±+1.60個(gè)),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。而OIR組與玻璃體腔內(nèi)注射左眼組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.839)。(2)滴眼組不同給藥濃度結(jié)果：在P12～P16連續(xù)5d每天一次雙眼滴入3種劑量的PEDF多肽,計(jì)數(shù)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核,結(jié)果顯示0.5 μg/μL,1μg/μL,2μg/μL組細(xì)胞核數(shù)分別為(48.81±1.18)個(gè)、(52.85±1.68)個(gè)、 (50.96±1.72)個(gè),三組之間兩兩比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。三組細(xì)胞核數(shù)均低于OIR組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(3)注射組及滴眼組抑制血管新生作用的比較：結(jié)果顯示注射組細(xì)胞核數(shù)均低于滴眼組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(4)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測空氣組、OIR組、0.5μg/μL注射組(OIR iv0.5μg/μL組)、0.5μg/μL滴眼組(OIR dr0.5μg/μL組)視網(wǎng)膜PEDF-mRNA表達(dá)水平：結(jié)果顯示后三組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但均低于空氣組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(5)免疫組化檢測空氣組、OIR組、OIR iv0.5 μg/μL組、OIR dr0.5 μg/μL組視網(wǎng)膜色素上皮層PEDF蛋白表達(dá)水平：結(jié)果顯示后三組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但均低于空氣組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論：玻璃體腔內(nèi)注射PEDF多肽及直接滴入PEDF多肽均能對(duì)高氧誘導(dǎo)新生小鼠的視網(wǎng)膜新生血管有顯著的抑制作用。玻璃體腔內(nèi)注射的效果存在劑量依賴性,2μg/μL組抑制作用更佳。滴眼組的效果未表現(xiàn)出劑量依賴性,比注射組抑制作用較弱,可能需要更高的濃度方能顯示更好的效果。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能為早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病的藥物治療提供依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R774.1

【參考文獻(xiàn)】

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1 朱麗;陳超;石文靜;王玉環(huán);單海冬;趙培泉;;早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病多中心篩查及發(fā)病率調(diào)查[J];中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志;2006年06期

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本文編號(hào)：1147009