本文關(guān)鍵詞：Pou4f3基因突變致小鼠耳聾的聽力學(xué)機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： Pou4f3(Brn3.1/Brn3c) DFNA15 靜纖毛 Espin Myo6

【摘要】：【目的】Pou4f3 8堿基缺失突變可引起DFNA15非綜合征型語后聾,是臨床較常見的顯性遺傳性聾。至今人們?nèi)詿o法了解該疾病的臨床病理全過程,亦無有效的預(yù)防及對因治療方法。本課題以完全模擬人DFNA15的突變方式及遺傳規(guī)律而建立的Pou4f3點突變小鼠為模型,探究DFNA15耳聾的發(fā)病機(jī)制�！痉椒ā坷脴�(gòu)建的Pou4f3點突變小鼠,經(jīng)基因型鑒定將小鼠分為突變組(Pou4f3mutant/+)及對照組(Pou4f3+/+),在前期已對5周至9月齡小鼠的聽力測試的基礎(chǔ)上又分別選取年齡比較大的小鼠(12-13月齡、16-17月齡),分別行聽性腦干反應(yīng)(ABR)對其聽功能進(jìn)行測定;選取4-5月齡小鼠進(jìn)行畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射檢查(DPOAE);行為學(xué)方法分析小鼠前庭功能;透射電鏡分析耳蝸毛細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),完善小鼠的表型及形態(tài)學(xué)分析。通過構(gòu)建p GL3Basic-Espin/Myo6啟動子表達(dá)載體,并與Pou4f3野生型及Pou4f3(8bp缺失)突變型載體共轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,利用雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)體外分析轉(zhuǎn)錄因子Pou4f3野生型及突變型對Espin及Myo6基因的表達(dá)調(diào)控影響�！窘Y(jié)果】ABR結(jié)果示:Pou4f3mutant/+出生時聽力正常,與對照組無明顯差異(P0.05)。隨著年齡的增大,聽功能呈進(jìn)行性緩慢下降,并逐漸發(fā)展為全頻聽功能閾值升高,聽力圖呈緩降型,當(dāng)年齡達(dá)12月以上時Pou4f3mutant/+及Pou4f3+/+小鼠聽力表現(xiàn)為重度甚至極重度耳聾,未見明顯差異。DPOAE結(jié)果顯示突變及對照小鼠其畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射均可引出,但突變小鼠DPOAE振幅明顯減低,各頻率對照及突變組差異均勻意義(P0.05)。透射電鏡觀察耳蝸毛細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)顯示Pou4f3mutant/+小鼠內(nèi)毛細(xì)胞中出現(xiàn)線粒體明顯水腫,空化的現(xiàn)象。我們成功構(gòu)建了p GL3 Basic-Espin/Myo6啟動子表達(dá)載體,雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測示:野生型的轉(zhuǎn)錄因子POU4F3可以負(fù)調(diào)控Espin基因的表達(dá),對Myo6基因的表達(dá)與本底表達(dá)無明顯差別,但導(dǎo)入突變型POU4F3可明顯上調(diào)Espin基因的表達(dá),而抑制Myo6基因表達(dá)�！窘Y(jié)論】Pou4f3基因突變后影響內(nèi)毛細(xì)胞線粒體的結(jié)構(gòu)功能,進(jìn)而影響內(nèi)毛細(xì)胞對聲音的感知,為DFNA15提供可能的細(xì)胞學(xué)機(jī)制。DFNA15型耳聾的發(fā)病機(jī)制之一,可能是由于轉(zhuǎn)錄因子POU4F3突變,產(chǎn)生一截短的具有顯性負(fù)效應(yīng)的突變體蛋白,影響下游Espin、Myo6基因的表達(dá),進(jìn)而導(dǎo)致毛細(xì)胞纖毛的極性生長,出現(xiàn)纖毛融合及巨纖毛現(xiàn)象,使外來信號機(jī)電轉(zhuǎn)換過程異常,最終引起聽功能下降。
【關(guān)鍵詞】：Pou4f3(Brn3.1/Brn3c) DFNA15 靜纖毛 Espin Myo6
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R764.43
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 前言8-10
• 第一部分Pou4f3~(mutant/+)小鼠的表型分析及形態(tài)學(xué)研究10-36
• 材料與方法12-20
• 實驗結(jié)果20-30
• 討論30-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 第二部分 轉(zhuǎn)錄因子Pou4f3對Espin、Myo6基因的表達(dá)調(diào)控影響36-66
• 材料與方法37-53
• 實驗結(jié)果53-60
• 討論60-63
• 參考文獻(xiàn)63-66
• 第三部分 文獻(xiàn)綜述66-78
• 參考文獻(xiàn)73-78
• 附錄 縮略詞表78-80
• 碩士期間發(fā)表論文80-82
• 致謝82

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳錫暄;人類螺旋器靜纖毛間的交叉連接[J];國外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊;1985年06期

2 ;豚鼠正常和積水耳蝸靜纖毛橫鏈的結(jié)構(gòu)及成分[J];國外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊;1994年04期

3 吳皓,李兆基;包括靜纖毛-蓋膜復(fù)合體的螺旋器的活性非線性機(jī)械學(xué)特性[J];國外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊;2000年06期

4 孫建和,楊偉炎,方耀云,朱光明,侯寧;豚鼠耳蝸毛細(xì)胞靜纖毛連接橋的超微結(jié)構(gòu)觀察[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2005年11期

5 孫建和,楊偉炎,方耀云,朱光明,侯寧;豚鼠耳蝸毛細(xì)胞靜纖毛連接橋的掃描電鏡觀察[J];電子顯微學(xué)報;2005年04期

6 孫建和,姜泗長,方耀云,朱光明,張曙光;豚鼠耳蝸毛細(xì)胞靜纖毛的掃描電鏡觀察[J];解剖學(xué)報;2000年01期

7 孫建和;胡吟燕;翟所強(qiáng);楊偉炎;朱光明;;豚鼠耳蝸毛細(xì)胞靜纖毛變異的掃描電鏡觀察[J];電子顯微學(xué)報;2006年S1期

8 王爾貴;;人和豚鼠前庭器毛細(xì)胞靜纖毛之間的交鏈[J];國外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊;1988年04期

9 楊軍;脊椎動物毛細(xì)胞的機(jī)械換能作用——靜纖毛束的結(jié)構(gòu)與功能[J];國外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊;1996年06期

10 李采,吳t 雯,遲放魯;不同日齡小鼠聽性腦干反應(yīng)和靜纖毛形態(tài)的發(fā)育特性[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2003年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 楊琳;戴培東;華誠;張?zhí)煊?丁光宏;王克強(qiáng);王正敏;;蓋膜與內(nèi)毛細(xì)胞靜纖毛相互作用的生物力學(xué)分析[A];2008年全國生物流變學(xué)與生物力學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2008年

2 孫建和;楊偉炎;方耀云;朱光明;侯寧;;豚鼠耳蝸毛細(xì)胞靜纖毛連接橋的掃描電鏡觀察[A];2005年全國電子顯微學(xué)會議論文集[C];2005年

3 孫建和;胡吟燕;翟所強(qiáng);楊偉炎;朱光明;;豚鼠耳蝸毛細(xì)胞靜纖毛變異的掃描電鏡觀察[A];2006年全國電子顯微學(xué)會議論文集[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 ;能聽出癌病變細(xì)胞開始的神奇聽診器[N];云南科技報;2001年

2 尹宏毅;納米耳將使你聞所未聞[N];科技日報;2001年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 馬登濱;Pou4f3基因突變致小鼠耳聾的聽力學(xué)機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

2 王茁;甘肅鼢鼠（Myospalax cansu）耳蝸結(jié)構(gòu)研究[D];陜西師范大學(xué);2010年

3 丁艷;中國非綜合征型耳聾患者Taperin基因的初步分析[D];中南大學(xué);2012年

，

本文編號：1125314