海帶多糖抗人鼻咽癌作用的實驗研究
本文關(guān)鍵詞:海帶多糖抗人鼻咽癌作用的實驗研究
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【摘要】:目的鼻咽癌是中國東南部地區(qū)高發(fā)的頭頸部惡性腫瘤,98%屬于低分化鱗狀鱗狀細(xì)胞癌,目前主要采用以放療為主,輔助化療的綜合治療。常規(guī)放、化療對鼻咽癌細(xì)胞有很強的殺傷作用,但是由于發(fā)揮作用時沒有選擇性,同時對人體正常組織產(chǎn)生嚴(yán)重?fù)p傷,出現(xiàn)較多嚴(yán)重并發(fā)癥,嚴(yán)重影響的病人的治療效果和生活質(zhì)量。因此,,目前從天然動植物中尋找具有增強放化療的抗癌作用,并能減輕放化療造成損傷的高效低毒抗腫瘤藥物,已成為抗腫瘤藥物選擇及減少治療并發(fā)癥研究的重要組成部分。海帶多糖(laminaria japonica polysaccharides,LJP)是一種從海帶中提取的含有多種單糖和硫酸基的水溶性雜多糖。大量研究證明海帶多糖具有多種生物活性,如抗腫瘤、抗突變、提高免疫力、防輻射等[1-4],但其在鼻咽癌防治作用方面的研究較少,僅本課題組對其作用機理的初步探索實驗[5-7]。本研究為進一步證明LJP對多種人鼻咽癌細(xì)胞的體外抑制作用,并尋找對LJP的敏感細(xì)胞株,通過對人鼻咽癌細(xì)胞株HONE1體內(nèi)、外抑制作用的研究,探尋LJP抗鼻咽癌的作用機理。 方法體外實驗采用MTT法檢測不同濃度的LJP對人鼻咽癌HONE1、HNE1、5-8F、6-10B、CNE2、鼻咽部正常上皮NP69細(xì)胞凋亡作用的影響,選取HONE1細(xì)胞株,采用Hoechst33258熒光染色法和細(xì)胞劃痕實驗檢測不同濃度LJP對人鼻咽癌HONE1細(xì)胞凋亡檢測和遷移能力的影響;建立人鼻咽癌HONE1細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤模型,設(shè)立對照組和低、中、高LJP組行體內(nèi)藥物干預(yù),通過透射電鏡觀察(transmission electronmicroscopy,TEM)LJP組和對照組對移植瘤癌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及LJP組肝腎組織細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的影響,并采用Western blot(WB)法檢測Bax、Bcl-2、Caspase-3、8、9以及VEGF蛋白的表達(dá)。 結(jié)果MTT結(jié)果顯示LJP對多種人鼻咽癌細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用,其作用具有濃度和時間依賴性,而對鼻咽部正常上皮細(xì)胞抑制作用較弱。Hoechst33258熒光染色法和細(xì)胞劃痕實驗提示隨著LJP濃度的增加,人鼻咽癌HONE1染色細(xì)胞減少,而細(xì)胞核濃縮、核破裂的數(shù)量增多,并且具有抑制HONE1細(xì)胞遷移的作用。TEM結(jié)果提示癌細(xì)胞及癌組織內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞呈現(xiàn)凋亡特征的改變,肝腎正常組織細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞則不受影響。WB檢測結(jié)果提示,隨著LJP濃度的增加,Bax/Bcl-2、Caspase-3、8、9蛋白的相對表達(dá)量增高(P<0.05);VEGF蛋白的相對表達(dá)量降低(P<0.05)。 結(jié)論LJP能夠抑制多種人鼻咽癌細(xì)胞的生長作用,對人正常鼻咽部細(xì)胞抑制作用較弱,并且具有抑制人鼻咽癌HONE1細(xì)胞遷移的作用,對人鼻咽癌HONE1裸鼠移植瘤的抑制作用可能是通過促進癌細(xì)胞凋亡及抑制移植瘤內(nèi)血管生成,減少血液供應(yīng)實現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】:人鼻咽癌細(xì)胞 海帶多糖 抑制瘤 抑制作用 凋亡
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R739.63
【目錄】:
- 縮略詞表4-5
- 摘要5-7
- ABSTRACT7-10
- 前言10-12
- 第一部分 海帶多糖體外抑制鼻咽癌細(xì)胞的實驗研究12-31
- 1 材料12-13
- 2 試驗方法13-19
- 3 實驗結(jié)果19-28
- 4 討論28-31
- 第二部分 海帶多糖對人鼻咽癌細(xì)胞株 HONE1 裸鼠移植瘤的抑制作用31-46
- 1 實驗材料31-33
- 2 試驗方法33-39
- 3 實驗結(jié)果39-43
- 4 討論43-46
- 全文總結(jié)46-48
- 參考文獻48-51
- 茶多酚抑制鼻咽癌及輻射防護作用的研究進展51-62
- 參考文獻58-62
- 海帶多糖抑制鼻咽癌及放療防護作用的研究進展62-68
- 參考文獻66-68
- 致謝68-69
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章69
【參考文獻】
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本文編號:1109803
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