發(fā)布時間：2017-10-28 11:09

  本文關(guān)鍵詞：Sirtuins在喉癌細胞及其耐藥株中表達水平的實驗研究

  更多相關(guān)文章： Sirtuins MDR1 MRP 喉癌 耐藥

【摘要】：目的：喉癌是頭頸部常見的惡性腫瘤，治療手段通常為手術(shù)輔以抗腫瘤綜合治療，盡管幾十年來對其治療水平不斷挺高，但據(jù)統(tǒng)計喉癌患者的5年生存率并沒有呈現(xiàn)顯著的提升。細胞多藥耐藥的產(chǎn)生是導致化療效果欠佳的重要因素，細胞耐藥相關(guān)基因MDR1及MRP可通過兩種不同途徑介導細胞產(chǎn)生耐藥性。Sirtuins基因與細胞應(yīng)激及氧化所致疾病有著密切的關(guān)聯(lián)，，其在不同腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用已逐漸被知曉，但Sirtuins在喉癌細胞及其耐藥株中所發(fā)揮的作用仍不明確，本研究擬探討Sirtuins在人喉癌細胞株Hep-2及其耐藥株Hep-2/v中的表達及調(diào)控作用，以及Sirtuins與耐藥基因的相關(guān)性，為喉癌的抗腫瘤治療提供新的可能的途徑。 方法：通過實時定量RT-PCR對Sirtuins和MDR1在Hep-2和Hep-2/v中的表達進行定量分析，采用免疫熒光染色檢測Sirtuins及耐藥相關(guān)基因MDR1、MRP在Hep-2和Hep-2/v中的表達情況，利用免疫組化SP染色方法檢測14例喉癌的組織標本中Sirtuins、MDR1及MRP基因的表達水平，并將結(jié)果進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果：1.實時定量RT-PCR結(jié)果顯示，多藥耐藥性人喉癌細胞Hep-2/v中Sirtuins蛋白及MDR1的mRNA水平較Hep-2中明顯升高； 2.免疫熒光染色顯示，多藥耐藥性人喉癌細胞Hep-2/v中SirT1、SirT3、SirT6、MDR1及MRP蛋白表達水平較Hep-2中顯著提高。 3.免疫組化結(jié)果顯示，SirT1、SirT3、SirT6、MDR1及MRP抗體陽性表達為棕黃色顆粒，均定位于細胞漿。在喉癌組織中以上5種抗體的蛋白表達較癌旁組織均有所增高。對喉癌及癌旁組織中MDR1和MRP的蛋白表達量與Sirtuins表達的關(guān)系進行直線回歸分析，結(jié)果顯示： MDR1蛋白表達量與SirT1的變化呈正的直線相關(guān)（r=0.4，p0.01），MRP蛋白表達量與SirT6的變化呈正的直線相關(guān)（r=0.61, p0.01）。 結(jié)論：Sirtuins蛋白在多藥耐藥性人喉癌細胞中的高表達，提示其可能在喉癌細胞耐藥機制中發(fā)揮著重要作用，并與腫瘤多藥耐藥性基因MDR1、MRP的轉(zhuǎn)錄和表達相關(guān)。推測未來可能采用Sirtuins抑制劑或基因靶向治療，為人喉癌及其他相關(guān)腫瘤耐藥性的治療提供了一種新的方法。
【關(guān)鍵詞】：Sirtuins MDR1 MRP 喉癌 耐藥
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R739.65
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 第1章 緒論11-22
• 1.1 引言11-12
• 1.2 綜述去乙酰化酶 SIRTUINS 與腫瘤關(guān)系的研究進展12-22
• 1.2.1 Sirtuins 蛋白的分類和分子功能13-14
• 1.2.2 Sirtuins 的細胞定位與生物活性14-16
• 1.2.3 Sirtuins 與腫瘤發(fā)生及對腫瘤相關(guān)基因的調(diào)控16-18
• 1.2.4 Sirtuins 蛋白抑癌作用的相關(guān)研究18-21
• 1.2.5 展望21-22
• 第2章 SIRTUINS 在喉癌細胞及其耐藥株中的表達與意義22-39
• 2.1 實驗材料與方法23-31
• 2.1.1 細胞株23
• 2.1.2 主要儀器23-24
• 2.1.3 主要試劑24-25
• 2.1.4 試劑配制25-27
• 2.1.5 實驗方法27-31
• 2.2 結(jié)果31-35
• 2.2.1 實時定量 RT-PCR 檢測 Sirtuins 蛋白的表達31-32
• 2.2.2 免疫熒光檢測細胞中 Sirtuins 蛋白的表達32-35
• 2.3 討論35-39
• 第3章 SIRTUINS 在喉癌細胞組織中表達的臨床意義39-48
• 3.1 實驗材料與方法39-41
• 3.1.1 標本來源及臨床資料39
• 3.1.2 主要儀器39
• 3.1.3 主要試劑39-40
• 3.1.4 試劑配制40
• 3.1.5 免疫組織化學染色40-41
• 3.2 結(jié)果41-45
• 3.2.1 免疫組化樣本統(tǒng)計41-42
• 3.2.2 免疫組化染色檢測 MDR1 及 MRP 在喉組織中的表達42-43
• 3.2.3 免疫組化染色檢測 Sirtuins 在喉組織中的表達43
• 3.2.4 Sirtuins 及耐藥基因在喉組織中表達的相關(guān)性43-45
• 3.3 討論45-48
• 第4章 全文總結(jié)48-49
• 參考文獻49-55
• 作者簡介及在讀期間取得的科研成果55-56
• 致謝56

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 楊征;黃志剛;鐘琦;范爾鐘;付維;楊登化;;喉癌中p53與MDR1及MRP表達的相關(guān)性研究[J];中國耳鼻咽喉頭頸外科;2008年05期

2 時小燕;杜麗敏;;Sirtuin家族成員及其生物學特性[J];國際藥學研究雜志;2011年05期

3 吳德峰;劉承宜;朱玲;;SIRTUIN1介導的NIH3T3成纖維細胞晝夜節(jié)律時鐘基因表達抑制的光生物調(diào)節(jié)作用[J];體育科學;2011年02期

4 尹萬忠;王蘋;祝威;;人喉癌長春新堿耐藥細胞株的建立及其生物學特性[J];中國免疫學雜志;2010年02期

本文編號：1107966