發(fā)布時(shí)間：2017-10-19 03:33

  本文關(guān)鍵詞：慶大霉素中毒大鼠耳蝸中p75NTR和TrkB的表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 受體 慶大霉素 p75NTR TrkB

【摘要】：研究背景 目前，聽(tīng)力障礙仍是一種普遍的疾病，嚴(yán)重影響病人的生活質(zhì)量。據(jù)有關(guān)部門提供的資料統(tǒng)計(jì)，我國(guó)大約有2780萬(wàn)人遭受著聽(tīng)力障礙的困擾，其中7歲以下兒童有80萬(wàn)人，老年人949萬(wàn)人。由于各種原因，如遺傳、感染、疾病、環(huán)境噪聲污染、意外事故等，新生兒中每年增加約3萬(wàn)名的聾兒。這些患者中,小部分是先天性的,絕大部分都是后天性形成的。后天性耳聾的病因中，藥物性耳聾占絕大多數(shù)，而藥物性耳聾的患者中多數(shù)是由于濫用氨基糖苷類抗生素引起的，其中應(yīng)用最多的慶大霉素，它將造影永久性不可逆的聽(tīng)力損失。 雖然人工耳蝸的植入可以在一定程度上提高患者的聽(tīng)力，但人工耳蝸仍有很多限制。另外，人工耳蝸植入所作用的靶細(xì)胞是螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(spiralganglion neurons，SGN)，耳聾患者耳蝸損傷會(huì)引起繼發(fā)性螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞變性，從而降低人工耳蝸植入的效果。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的變性至少有部分原因是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的供應(yīng)不足所致。國(guó)內(nèi)外的許多研究也都證實(shí)，無(wú)論是在體或是離體，給予一定量的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子均能夠保護(hù)螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，抵抗外源性因素對(duì)聽(tīng)覺(jué)器官的損害。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子是通過(guò)與神經(jīng)元細(xì)胞表面的受體結(jié)合而發(fā)揮作用的，可以推測(cè)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體在內(nèi)耳的發(fā)育以及損傷過(guò)程中也是至關(guān)重要的。國(guó)內(nèi)關(guān)于神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體在耳聾中作用的研究很少，因此本實(shí)驗(yàn)中建立大鼠耳聾的動(dòng)物模型，通過(guò)免疫組化法觀察神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體在耳聾耳蝸中的表達(dá)情況。 研究目的： 1.觀察中毒大鼠耳蝸中神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體p75NTR及TrkB的表達(dá)變化情況。 2.探討神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體在耳蝸的表達(dá)與氨基糖苷類抗生素所致的耳聾之間的關(guān)系。 材料和方法： 1動(dòng)物模型的建立 將30只健康成年的SD雄鼠（由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供）,隨機(jī)分成2組：實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組15只。實(shí)驗(yàn)組：腹腔注射硫酸慶大霉素160mg/kg，1次/天，連續(xù)給藥14天，第15天處死；對(duì)照組：腹腔注射等量的生理鹽水，1次/天，連續(xù)給藥14天，第15天處死。給藥前和處死前每組動(dòng)物均行聽(tīng)性腦干反應(yīng)（ABR）測(cè)試，記錄ABR測(cè)試結(jié)果。 2耳蝸取材和免疫組化染色 腹腔注射10%水合氯醛，劑量為0.4ml/100g，麻醉生效后，分別用生理鹽水和4%多聚甲醛行心臟灌注，然后迅速短頭，，取出聽(tīng)泡，去除多余骨質(zhì)，開(kāi)放卵圓窗和圓窗，置于4%多聚甲醛中固定48小時(shí)，取出標(biāo)本PBS緩沖液沖洗后置入10%EDTA中脫鈣，連續(xù)10天。修剪標(biāo)本，自來(lái)水沖洗，然后進(jìn)行梯度酒精脫水，石蠟包埋，平行于蝸軸連續(xù)切片，每個(gè)標(biāo)本切片4張，分別進(jìn)行HE染色，P75NTR免疫組化染色，TrkB免疫組化染色和陰性對(duì)照。SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 1.成功建立了慶大霉素中毒的耳聾動(dòng)物模型。 2.實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物平均ABR閾值較對(duì)照組明顯增加。 3.HE染色示：實(shí)驗(yàn)組耳蝸Corti’s器破壞，螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞核深染，血管紋變薄，對(duì)照組耳蝸形態(tài)正常。 4.免疫組化結(jié)果示：實(shí)驗(yàn)組TrkB表達(dá)量較對(duì)照組明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；而實(shí)驗(yàn)組p75NTR表達(dá)量較對(duì)照組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 1.利用硫酸慶大霉素腹腔注射可以成功建立大鼠耳毒性藥物損傷的耳聾模型。 2.耳聾大鼠耳蝸的TrkB表達(dá)降低、p75NTR表達(dá)增強(qiáng)，反映了這兩種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體在耳蝸損傷過(guò)程中發(fā)揮了不同的作用，p75NTR可能誘導(dǎo)凋亡。
【關(guān)鍵詞】：神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 受體 慶大霉素 p75NTR TrkB
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R764
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 中英文縮略詞對(duì)照11-12
• 前言12-15
• 材料和方法15-21
• 結(jié)果21-23
• 討論23-29
• 結(jié)論29-30
• 附圖30-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 綜述36-50
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷及在讀學(xué)位期間發(fā)表的論文50-51
• 致謝51

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 蔣明;張永全;賀廣湘;孫虹;;羥基磷灰石納米顆粒介導(dǎo)NT-3基因?qū)﹄嗍笈d奮毒性損傷耳蝸的保護(hù)作用[J];中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年04期

2 魏運(yùn)軍,張學(xué)淵;豚鼠耳蝸微血管內(nèi)皮細(xì)胞的跨內(nèi)皮細(xì)胞電阻及對(duì)牛血清白蛋白的通透性[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2002年12期

3 鄧志宏,王錦玲,邱建華,劉順利,王成濟(jì),楊安鋼;神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3基因轉(zhuǎn)染對(duì)慶大霉素性耳聾保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2004年04期

4 王傳銘,李濤洪,潘蓄林,張旭東;氨基糖苷類抗生素的抗HIV潛力[J];生命的化學(xué);2005年03期

5 楊旭春,方耀云;不同年齡組大鼠聽(tīng)性腦干反應(yīng)結(jié)果分析[J];聽(tīng)力學(xué)及言語(yǔ)疾病雜志;2004年01期

6 翟所強(qiáng),郭維,胡吟燕,陳謙,汪家政;腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)的保護(hù)作用[J];中華耳鼻咽喉科雜志;2002年02期

7 陳曉巍,李紅,曹克利,魏朝剛,金昕;神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3和膠質(zhì)細(xì)胞衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子共轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)小鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2003年17期

8 路露;陳美婉;羅煥敏;;神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體的研究進(jìn)展[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2010年01期

本文編號(hào)：1058817