本文關(guān)鍵詞：顯微拉曼光譜技術(shù)用于眼組織的應(yīng)用研究

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【摘要】：隨著各學(xué)科的交叉發(fā)展,先進(jìn)的物理學(xué)方法已越來(lái)越多地應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,為生物醫(yī)學(xué)發(fā)展開(kāi)辟了一條新的途徑。從物質(zhì)結(jié)構(gòu)的角度來(lái)研究生物分子結(jié)構(gòu)發(fā)生的特征性變化無(wú)疑具有重要的意義。目前研究生物空間結(jié)構(gòu)的方法有X-射線衍射法、圓二色譜法、紅外光譜法、拉曼光譜法等等,這些方法都能提供分子結(jié)構(gòu)信息,但各有其優(yōu)缺點(diǎn)。X-射線衍射技術(shù)測(cè)定結(jié)果不易說(shuō)明蛋白質(zhì)等在生理狀態(tài)下結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系；圓二色光譜測(cè)量結(jié)果僅在含A-螺旋成份較多的蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定中較為準(zhǔn)確；紅外光譜法在測(cè)試時(shí)需要將樣品干燥處理,該方法技術(shù)成熟,用于物質(zhì)分析的譜圖庫(kù)齊全,是生物醫(yī)學(xué)研究中一種重要的物質(zhì)分析手段,但受水的影響較大,應(yīng)用到生物樣品的結(jié)構(gòu)研究中也受到一定的限制。而拉曼光譜因自身獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)可以很好地被應(yīng)用到生物分子結(jié)構(gòu)的研究中。 當(dāng)組織細(xì)胞發(fā)生病變時(shí),歸根結(jié)底是由于組成細(xì)胞的蛋白質(zhì)、核酸、脂類(lèi)和糖類(lèi)等分子的變化造成的,與原正常組織相比各成分的組成比例和分子的空間物理化學(xué)排列將發(fā)生變化,這些分子成分及分子結(jié)構(gòu)的變化是組織及細(xì)胞發(fā)生病變的物質(zhì)基礎(chǔ)。近年來(lái)對(duì)生物組織的研究顯示,分子成分及結(jié)構(gòu)變化可用于鑒別病變的性質(zhì)。生物組織的改變,可通過(guò)探測(cè)其內(nèi)部的結(jié)構(gòu)特征而展現(xiàn)出來(lái),拉曼光譜正是測(cè)量物質(zhì)成分的有效工具。 光譜技術(shù)因?qū)ξ覀兝斫馍锝Y(jié)構(gòu)、揭示生命現(xiàn)象發(fā)揮著重大作用而倍受關(guān)注。傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡受衍射極限和光源的限制,分辨率已達(dá)到極限。激光出現(xiàn)以后,拉曼光譜等顯微成像光譜技術(shù)得到了突破性的發(fā)展。共焦顯微拉曼光譜技術(shù)是一種激光為基礎(chǔ)的分析技術(shù),將拉曼光譜分析技術(shù)與顯微分析技術(shù)結(jié)合,采用低功率激光器,高轉(zhuǎn)換效率的全息CCD技術(shù),更易于直接獲得大量的價(jià)值信息,具有非破壞性、非侵入性、精細(xì)的分辨能力,不用試劑和高度自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn),能夠快速和非侵入性的對(duì)組織細(xì)胞進(jìn)行生化分析,并能提供活體的分子結(jié)構(gòu)信息。 本論文旨在運(yùn)用顯微拉曼光譜技術(shù)的優(yōu)越特性,結(jié)合眼解剖的特殊性,開(kāi)展其在眼病的實(shí)驗(yàn)研究。論文主要包含如下幾部分： 論文第一部分概述了拉曼光譜的技術(shù)特點(diǎn)。共焦顯微拉曼光譜技術(shù)是一種激光為基礎(chǔ)的分析技術(shù),具有非破壞性、非侵入性、精細(xì)的分辨能力,不用試劑和高度自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn),能夠快速和非侵入性的對(duì)組織細(xì)胞進(jìn)行生化分析,并能提供活體的分子結(jié)構(gòu)信息。介紹了論文中使用的拉曼光譜系統(tǒng)的重要參數(shù)及系統(tǒng)性能。 論文第二部分概述了拉曼光譜在生物醫(yī)學(xué)中研究現(xiàn)狀。拉曼光譜因自身獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)可以很好地被應(yīng)用到生物分子結(jié)構(gòu)的研究中,當(dāng)組織細(xì)胞發(fā)生病變時(shí),歸根結(jié)底是由于組成細(xì)胞的蛋白質(zhì)等分子的變化造成的,這些分子成分及分子結(jié)構(gòu)的變化是組織及細(xì)胞發(fā)生病變的物質(zhì)基礎(chǔ)。生物組織的改變,可通過(guò)探測(cè)其內(nèi)部的結(jié)構(gòu)特征而展現(xiàn)出來(lái)。拉曼光譜正是測(cè)量物質(zhì)成分的有效工具,蛋白質(zhì)等成分發(fā)生改變時(shí),可出現(xiàn)相應(yīng)的拉曼譜,由此我們能探測(cè)到其結(jié)構(gòu)的特征變化。 論文第三部分首先運(yùn)用顯微拉曼光譜技術(shù)的優(yōu)勢(shì)來(lái)比較分析正常結(jié)膜組織和翼狀胬肉組織,對(duì)其拉曼光譜進(jìn)行對(duì)比、分析,結(jié)果顯示翼狀胬肉在1583cm-1和1639cm-1處的拉曼光譜峰強(qiáng)明顯增強(qiáng)。1583cm-1對(duì)應(yīng)于脂質(zhì)的延伸C=C鍵不飽和脂肪酸,1639cm-1對(duì)應(yīng)于酰胺Ⅰ,這些結(jié)果說(shuō)明翼狀胬肉組織中彈性蛋白和膠原纖維的增加,這一結(jié)果也符合翼狀胬肉的病理改變特征。 論文第四部分運(yùn)用拉曼光譜技術(shù)用于白內(nèi)障晶狀體核分級(jí)中的研究,拉曼光譜技術(shù)是研究晶狀體非常有價(jià)值的非侵害性技術(shù),可以加深和擴(kuò)展對(duì)晶狀體正常老化和病理過(guò)程的認(rèn)識(shí)。在這項(xiàng)研究中,根據(jù)Emery晶狀體核硬度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),對(duì)年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者的晶狀體核硬度進(jìn)行分級(jí)分組,對(duì)三組晶狀體核組織的拉曼光譜通過(guò)主成分分析加以分類(lèi)與分析。 最后,論文對(duì)拉曼光譜技術(shù)在眼科領(lǐng)域中的應(yīng)用研究做了一些簡(jiǎn)單的展望,認(rèn)為拉曼光譜技術(shù)有廣泛的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：顯微拉曼光譜技術(shù) 翼狀胬肉 年齡相關(guān)性白內(nèi)障
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R777.33;R776.1
【目錄】：

• 摘要3-6
• ABSTRACT6-10
• 第一章 拉曼光譜技術(shù)的基本原理10-18
• 1.1 拉曼光譜儀的成像系統(tǒng)與光路11-14
• 1.2 拉曼光譜技術(shù)的發(fā)展14-16
• 1.3 主成分分析16-18
• 第二章 拉曼光譜技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)中研究的應(yīng)用18-21
• 第三章 拉曼光譜技術(shù)在冀狀胬肉中的研究應(yīng)用21-27
• 3.1 引言21-22
• 3.2 材料和方法22-23
• 3.3 結(jié)果和討論23-26
• 3.4 小結(jié)26-27
• 第四章 拉曼光譜技術(shù)在白內(nèi)障中的應(yīng)用研究27-37
• 4.1 引言27-29
• 4.2 材料和方法29-31
• 4.3 結(jié)果31-33
• 4.4 小結(jié)33-37
• 總結(jié)與展望37-38
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 碩士期間發(fā)表論文及成果42-43
• 致謝43-44

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

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本文編號(hào)：1042628