發(fā)布時間：2017-10-12 17:28

  本文關鍵詞：堿性成纖維細胞生長因子滴眼液對苯扎氯銨誘導小鼠干眼的療效和機制

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【摘要】：目的探討堿性成纖維細胞生長因子滴眼液(bFGF)對苯扎氯銨誘導的小鼠干眼的治療作用及其可能的機制。 方法選用BALB/c雄性小鼠75只（150眼），使用0.2％的苯扎氯銨溶液局部滴眼以誘導干眼。在誘導的第23天時根據(jù)淚膜破裂時間、角膜熒光染色、炎癥指數(shù)等參數(shù)選擇干眼表現(xiàn)程度相似的眼并隨機分為A、B、C、D四組。A組為干眼對照組，B、C、D組分別為溶劑對照組，5000IU堿性成纖維細胞生長因子滴眼液治療組，25000IU堿性成纖維細胞生長因子滴眼液治療組。治療后第0、1、3、5天進行角膜炎癥程度的評估、淚膜破裂時間及角膜上皮熒光素鈉染色。治療結束后摘取小鼠眼球，進行HE及過碘酸-希夫（PAS）染色，Ki-67免疫組化，角蛋白19（cytokeratin19，K19）免疫熒光標記，以及Western blot檢測角結膜組織中MUC-1及P63表達水平，分析各組差異。 結果經篩選共80只眼入選進行治療實驗，每組20只眼。統(tǒng)計結果顯示治療后第0、1、3天各組角膜炎癥程度、淚膜破裂時間及角膜上皮熒光素鈉染色無統(tǒng)計學差異。在治療第5天后，A、B、C、D各組的淚膜破裂時間分別是（2.176±0.828）、（1.941±0.464）、（2.389±0.719）、（2.833±0.924），其中C、D兩組的BUT較A、B組延長，，且D組表現(xiàn)更明顯，差異具有統(tǒng)計學意義（F=4.426，P=0.007）；各組間角膜熒光染色評分、炎癥指數(shù)無顯著性差異（F=0.401，P=0.753）、（F=0.719，P=0.544）。HE結果顯示bFGF治療組角膜上皮厚度與正常眼相當，且C、D兩組角膜上皮較A、B兩組光滑規(guī)整；PAS染色顯示bFGF滴眼液治療組杯狀細胞數(shù)量與正常眼相當，均相對多于A組和B組，但差異無統(tǒng)計學意義（F=4.481，P=0.060），然而，bFGF滴眼液治療組能增加角膜MUC-1的表達水平。同時，bFGF滴眼液治療組能顯著增加干眼狀態(tài)下角膜上皮Ki-67（F=73.418，P=0.000）及K19的陽性細胞數(shù)量，增加P63在角膜的表達，減少角膜上皮K10的表達；此種作用在D組更為明顯。 結論堿性成纖維細胞生長因子滴眼液對苯扎氯銨誘導的小鼠干眼有一定的治療作用，改善淚膜破裂時間、增強角膜上皮損傷修復為其可能的作用機制。
【關鍵詞】：干眼 堿性成纖維細胞生長因子 滴眼液 小鼠 治療
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R777.34
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-12
• 材料與方法12-21
• 2.1 材料與設備12-14
• 2.1.1 主要耗材與試劑12-13
• 2.1.2 主要器械與設備13-14
• 2.2 構建小鼠干眼模型14-15
• 2.2.1 構建小鼠干眼模型的方法14
• 2.2.2 評價小鼠干眼模型的指標14-15
• 2.2.3 選擇干眼模型組別的方式15
• 2.3 實驗方法15-21
• 2.3.1 冰凍切片16
• 2.3.2 蘇木素-伊紅染色 （H&E 染色）16-17
• 2.3.3 石蠟切片17
• 2.3.4 過碘酸-希夫染色（PAS 染色）17-18
• 2.3.5 組織切片免疫熒光染色18-19
• 2.3.6 組織切片免疫組織化學染色19-20
• 2.3.7 Western blot 蛋白檢測20-21
• 2.4 統(tǒng)計學分析21
• 結果21-26
• 3.1 BAC 誘導小鼠干眼模型結果21-22
• 3.2 藥物治療后臨床指標的結果22-26
• 3.2.1 bFGF 對淚膜穩(wěn)定，角膜組織形態(tài)的影響22-23
• 3.2.2 bFGF 對角膜上皮細胞增殖的影響23-24
• 3.2.3 bFGF 對角膜鱗狀上皮化生的影響24-25
• 3.2.4 bFGF 對杯狀細胞及粘蛋白的影響25-26
• 討論26-30
• 結論30-31
• 參考文獻31-36
• 附錄1. 縮略詞索引36-38
• 附錄2. 綜述38-49
• 參考文獻44-49
• 附錄3.碩士期間相關成果目錄49-50
• 致謝50-51

【共引文獻】

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本文編號：1019997