本文關(guān)鍵詞：RHL抑制2k1c大鼠高血壓及心臟、腎臟纖維化的研究

  更多相關(guān)文章： 賴氨大黃酸 兩腎一夾 TGF-β1 CTGF 心肌纖維化

【摘要】：目的通過建立兩腎一夾(two-kidney,one-clip:2k1c)腎血管性高血壓大鼠的實驗模型,觀察2k1c大鼠心臟、腎臟纖維化的情況,探討賴氨大黃酸(RHL)對2k1c大鼠的高血壓、心臟及腎臟纖維化的作用,并進一步闡明RHL抑制大鼠心臟及腎臟纖維化的可能機制。為RHL降低腎血管性高血壓、抑制心臟和腎臟纖維化的研究提供實驗依據(jù)。方法1建造模型:本實驗需要雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠35只,其中28只采用兩腎一夾的手術(shù)方法來構(gòu)建腎血管性高血壓(RVH)大鼠模型,剩余7只為對照組(對照組即為假手術(shù)組)。術(shù)后四周測量各組大鼠的尾動脈收縮壓(SBP),如果SBP較術(shù)前升高≥20mm Hg(1mm Hg=0.133k Pa),且高于140mm Hg為造模成功(共26只造模成功,造模成功率為93.33%)。2實驗分組:對照組6只,從造模成功的26只大鼠中隨機抽取24只分為模型組、賴氨酸組、大黃酸組和賴氨大黃酸組四組,每組6只。3在術(shù)后8周處死各組大鼠,并分別提取各組大鼠心臟及腎臟組織。4檢測:(1)分別測量手術(shù)前、手術(shù)后4周、手術(shù)后8周時各組大鼠SBP。(2)分別測量各組大鼠的左心室的重量(LVW)、全身重量(BW)、左心室與全身體重的比值(LVW/BW),并提取心臟、腎臟組織進行下一步實驗。(3)應用HE染色法觀察各組大鼠心臟及腎臟的病理變化。(4)應用Masson三色染色觀察各組大鼠心臟及腎臟纖維組織含量與分布。(5)應用免疫組織化學染色法觀察各組大鼠心臟及腎臟中TGF-β1和CTGF因子的表達情況。(6)應用免疫熒光組織化學染色法觀察各組大鼠心臟及腎臟中TGF-β1和CTGF因子的表達情況。結(jié)果1 SBP比較結(jié)果:(1)與術(shù)前比較:術(shù)后4周時的模型組及其它實驗組四組大鼠的SBP均已上升40mm Hg,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),且高于140mm Hg,表明2k1c大鼠高血壓模型建造成功。(2)術(shù)后8周時各組大鼠SBP比較:模型組與對照組相比,SBP明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);賴氨酸組與模型組比較,SBP無明顯變化,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);賴氨大黃酸組與賴氨酸組比較,SBP明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);賴氨大黃酸組與大黃酸組比較,SBP明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2左心室與全身體重的比值(LVW/BW)比較結(jié)果:模型組與對照組相比,LVW/BW明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);賴氨酸組與模型組相比,LVW/BW無明顯變化,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);賴氨大黃酸組與賴氨酸組相比,LVW/BW明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);賴氨大黃酸組與大黃酸組相比,LVW/BW稍降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3 HE染色:結(jié)果顯示,對照組大鼠的心肌及腎臟基本正常,無明顯病理變化;模型組與對照組相比,大鼠心臟及腎臟可觀察到纖維化程度增加;賴氨酸組與模型組相比,大鼠心臟及腎臟纖維化程度無明顯變化;賴氨大黃酸組與賴氨酸組的比較,心臟及腎臟纖維化程度有所減輕。賴氨大黃酸組與大黃酸組相比,心臟及腎臟纖維化程度有所減輕。4Masson三色染色:模型組與對照組比較,大鼠心臟及腎臟組織中纖維含量顯著增多(P0.05);賴氨酸組與模型組比較,大鼠心臟及腎臟組織纖維含量無明顯差別(P0.05);經(jīng)RHL治療后,大鼠心臟及腎臟組織中纖維含量顯著減少(P0.05);與大黃酸組比較,RHL組較大黃酸組纖維含量明顯減少(P0.05)。5免疫組織化學染色:結(jié)果顯示,對照組的心臟及腎臟的TGF-β1及CTGF輕微表達;模型組與對照組比較,大鼠心臟及腎臟的TGF-β1及CTGF表達增強(P0.05);賴氨酸組與模型組比較,大鼠心臟及腎臟的TGF-β1及CTGF的表達無明顯差異(P0.05);賴氨大黃酸組與賴氨酸組比較,大鼠心臟及腎臟TGF-β1及CTGF表達明顯減輕(P0.05);賴氨大黃酸組與大黃酸組比較,大鼠心臟及腎臟TGF-β1及CTGF表達明顯減輕(P0.05)。6免疫熒光組織化學染色:結(jié)果顯示,對照組的心臟及腎臟的TGF-β1及CTGF輕微表達;模型組與對照組比較,大鼠心臟及腎臟的TGF-β1及CTGF表達增強(P0.05);賴氨酸組與模型組比較,大鼠心臟及腎臟的TGF-β1及CTGF的表達無明顯差異(P0.05);賴氨大黃酸組與賴氨酸組比較,大鼠心臟及腎臟TGF-β1及CTGF表達明顯減輕(P0.05);賴氨大黃酸組與大黃酸組比較,大鼠心臟及腎臟TGF-β1及CTGF表達明顯減輕(P0.05)。結(jié)論1 2k1c高血壓大鼠模型建造成功,術(shù)后8周時可以導致大鼠心臟及腎臟纖維化增強。2賴氨大黃酸可以明顯降低兩腎一夾大鼠的高血壓。3賴氨大黃酸可以減輕2k1c大鼠心臟及腎臟的纖維化程度。4 2k1c高血壓大鼠的心臟及腎臟中的TGF-β1、CTGF因子表達增多,賴氨大黃酸能部分地抑制它們的過度表達,賴氨大黃酸可能通過抑制TGF-β1、CTGF的表達來降低心臟及腎臟纖維化的程度。
【關(guān)鍵詞】：賴氨大黃酸 兩腎一夾 TGF-β1 CTGF 心肌纖維化
【學位授予單位】：華北理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R544.1;R692
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 英文縮略表11-12
• 引言12-13
• 第1章 RHL抑制兩腎一夾大鼠的高血壓及其導致的心肌、腎臟纖維化的研究13-55
• 1.1 實驗動物、試劑和儀器13-14
• 1.1.1 實驗動物13
• 1.1.2 實驗試劑13
• 1.1.3 實驗儀器13-14
• 1.2 試驗方法14-25
• 1.2.1 動物飼養(yǎng)14
• 1.2.2 實驗大鼠兩腎一夾的模型制作14-15
• 1.2.3 實驗動物分組及給藥方法15
• 1.2.4 大鼠血壓與體重的測定15-16
• 1.2.5 大鼠腎臟及心臟的提取16
• 1.2.6 大鼠HE染色檢測心臟組織病理學改變16-17
• 1.2.7 大鼠HE染色檢測腎臟組織病理學改變17
• 1.2.8 大鼠Masson染色檢測心臟組織纖維化改變17-18
• 1.2.9 大鼠Masson染色檢測腎臟組織纖維化改變18-19
• 1.2.10 大鼠免疫組織化學染色（immunohistochemical staining，IHC）檢測心臟組織中TGF-β1 的表達19-20
• 1.2.11 大鼠免疫組化檢測心臟組織中CTGF的表達20
• 1.2.12 大鼠免疫組化檢測腎臟組織中TGF-β1 的表達20-21
• 1.2.13 大鼠免疫組化檢測腎臟組織中CTGF的表達21-22
• 1.2.14 大鼠免疫熒光組織化學染色（Immunofluorescence staining，IF）檢測心臟組織中TGF-β1 的表達22-23
• 1.2.15 大鼠免疫熒光檢測心臟組織中CTGF的表達23
• 1.2.16 大鼠免疫熒光檢測腎臟組織中TGF-β1 的表達23-24
• 1.2.17 大鼠免疫熒光檢測腎臟組織中CTGF的表達24
• 1.2.18 統(tǒng)計分析24-25
• 1.3 結(jié)果25-45
• 1.3.1 各組大鼠術(shù)前血壓結(jié)果25-26
• 1.3.2 各組大鼠術(shù)后4周時血壓結(jié)果26-27
• 1.3.3 各組大鼠術(shù)后8周時血壓結(jié)果27-28
• 1.3.4 賴氨大黃酸對大鼠左心室與全身體重比值的影響28-29
• 1.3.5 各實驗組大鼠心臟組織HE染色結(jié)果29-30
• 1.3.6 各實驗組大鼠腎臟組織HE染色的表達結(jié)果30-31
• 1.3.7 各實驗組大鼠心臟Masson染色結(jié)果31-33
• 1.3.8 各實驗組大鼠腎臟Masson染色結(jié)果33-34
• 1.3.9 各實驗組大鼠心臟組織中TGF-β1 免疫組化的表達結(jié)果34-35
• 1.3.10 各實驗組大鼠心臟組織中CTGF免疫組化的表達結(jié)果35-37
• 1.3.11 各實驗組大鼠腎臟組織TGF-β1 免疫組化的表達結(jié)果37-38
• 1.3.12 各實驗組大鼠腎臟組織CTGF免疫組化的表達結(jié)果38-39
• 1.3.13 各實驗組大鼠心臟組織中TGF-β1 免疫熒光的表達結(jié)果39-41
• 1.3.14 各實驗組大鼠心臟組織中CTGF免疫熒光的表達結(jié)果41-42
• 1.3.15 各實驗組大鼠腎臟組織TGF-β1 免疫組化的表達結(jié)果42-43
• 1.3.16 各實驗組大鼠腎臟組織CTGF免疫熒光的表達結(jié)果43-45
• 1.4 討論45-51
• 1.4.1 腎性高血壓動物模型的建立45-46
• 1.4.2 高血壓對心臟及腎臟的影響46-47
• 1.4.3 賴氨大黃酸對兩腎一夾高血壓的大鼠的血壓的影響47-48
• 1.4.4 賴氨大黃酸對腎性高血壓大鼠的腎臟抗纖維化的作用48-50
• 1.4.5 賴氨大黃酸對腎性高血壓大鼠的心臟抗纖維化的作用50-51
• 1.5 小結(jié)51
• 參考文獻51-55
• 第2章 綜述 心肌纖維化模型的研究進展55-70
• 2.1 心肌纖維化的發(fā)病機制55-58
• 2.1.1 心肌纖維化與腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAAS）56
• 2.1.2 調(diào)節(jié)心肌纖維化的細胞因子56-57
• 2.1.3 心肌纖維化與氧化應激和炎性因子57-58
• 2.1.4 心肌纖維化與血管內(nèi)皮功能障礙及其衍生物的分泌失調(diào)58
• 2.1.5 心肌纖維化與細胞內(nèi)鈣離子58
• 2.2 心肌纖維化模型58-64
• 2.2.1 遺傳型心肌纖維化模型59
• 2.2.2 基因工程型心肌纖維化模型59
• 2.2.3 環(huán)境型心肌纖維化模型59-60
• 2.2.4 手術(shù)型心肌纖維化模型60-62
• 2.2.5 藥物型心肌纖維化模型62
• 2.2.6 病毒型心肌纖維化模型62-63
• 2.2.7 免疫損傷型心肌纖維化模型63-64
• 2.3 心肌纖維化模型的評價方法64-65
• 2.3.1 病理學檢查64-65
• 2.3.2 心功能檢查65
• 2.3.3 血清學檢查65
• 2.4 小結(jié)65-66
• 參考文獻66-70
• 結(jié)論70-71
• 致謝71-72
• 導師簡介72-73
• 作者簡介73-74
• 學位論文數(shù)據(jù)集74

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳同度,張昌穎;素食大鼠的貧血現(xiàn)象[J];營養(yǎng)學報;1957年04期

2 陳偉強;趙善廣;;自制注射用大鼠固定裝置[J];上海實驗動物科學;1992年04期

3 肖柳英,林培英,馮昭明,張丹;不同周齡的SD大鼠生理、生化及體重的正常值測定[J];中藥新藥與臨床藥理;1996年03期

4 李淑云;簡易大鼠灌胃器的制作[J];錦州醫(yī)學院學報;2001年04期

5 楊明智,陳積圣;一種大鼠抓取與固定的新工具介紹[J];上海實驗動物科學;2001年03期

6 戴英,陸群;復方H_(505)對Wistar大鼠外周血的血液流變學指標的影響[J];中國血液流變學雜志;2001年01期

7 韋應波,孫喜慶,曹新生,姚永杰,馮岱雅,楊長斌;+Gz暴露時間對大鼠記憶功能和行為的影響[J];航天醫(yī)學與醫(yī)學工程;2003年01期

8 呂學軍,郭俊生,李敏,周利梅,張永娟;暈船大鼠體內(nèi)鐵含量的變化[J];中國職業(yè)醫(yī)學;2003年04期

9 湯仁仙,王迎偉,王慧,周峰;201A中藥合劑對大鼠抗腎小球基底膜腎炎病變的影響[J];徐州醫(yī)學院學報;2003年06期

10 孫同柱,付小兵,翁立新,梁雪梅,陳偉;介紹一種簡易的大鼠保定方法[J];上海實驗動物科學;2004年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 尹音;孫振宇;胡敏;李冬霞;;持續(xù)性高正加速度對大鼠顳頜關(guān)節(jié)損傷的作用[A];第八屆全國顳下頜關(guān)節(jié)病學及（牙合）學大會論文匯編[C];2011年

2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;，

本文編號：985859