本文關(guān)鍵詞：重組9型腺相關(guān)病毒轉(zhuǎn)染小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

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【摘要】：背景:重組9型腺相關(guān)病毒對(duì)心肌細(xì)胞具有良好的親和力,是目前研究基因治療心肌梗死的理想載體。目的:觀察攜帶增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因的重組9型腺相關(guān)病毒(r AAV9-e GFP)對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。方法:將攜帶增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因的重組9型腺相關(guān)病毒以不同感染復(fù)數(shù)(1×105,1×106,1×107)轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的第4代小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,并在轉(zhuǎn)染后1-7 d連續(xù)用熒光倒置顯微鏡觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中增強(qiáng)型綠色熒光蛋白陽性表達(dá)情況,尋找最佳感染條件;采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)最佳感染復(fù)數(shù)下攜帶增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因的重組9型腺相關(guān)病毒對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果與結(jié)論:轉(zhuǎn)染后第1天,感染復(fù)數(shù)為1×107組可見增強(qiáng)型綠色熒光蛋白開始表達(dá),轉(zhuǎn)染后第2天,感染復(fù)數(shù)為1×105、1×106組開始表達(dá);各組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白表達(dá)強(qiáng)度隨感染復(fù)數(shù)值的增高而增強(qiáng),同時(shí)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白的表達(dá)強(qiáng)度隨著時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增強(qiáng);轉(zhuǎn)染后第5天達(dá)到高峰,此時(shí)感染復(fù)數(shù)為1×107組轉(zhuǎn)染效率約8%,結(jié)果表明攜帶增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因的重組9型腺相關(guān)病毒對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率較低。
【作者單位】： 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟中心;
【關(guān)鍵詞】： 小鼠 骨髓 間質(zhì)干細(xì)胞 轉(zhuǎn)染 干細(xì)胞 骨髓干細(xì)胞 重組型腺相關(guān)病毒 國(guó)家自然科學(xué)基金
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81260022)~~
【分類號(hào)】：R542.22
【正文快照】： 0引言Introduction干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死后心力衰竭是目前的研究熱點(diǎn),骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞獲得容易,不存在倫理問題,易于培養(yǎng),且在體外多次傳代后仍能保持干細(xì)胞的一些基本的生物學(xué)特性[1],因此,它在干細(xì)胞治療中成為首選,但也存在移植后存活率低和向心肌分化效率低的問題[

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