本文關鍵詞：血管緊張素-（1-7）抑制氧化低密度脂蛋白所致的內質網應激及凋亡

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【摘要】：目的:通過氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)誘導人臍靜脈內皮細胞(HUVECs),檢測內質網應激(endoplasmic reticulum stress,ERS)指標及凋亡指標的表達,觀察給予血管經張素-(1-7)[Angiotensin 1-7 Ang-(1-7)]及其MAS受體拮抗劑A-779后上述指標的變化,探究其對ox-LDL所誘導的HUVECs內質網應激的影響,為動脈粥樣硬化的防治提供新的思路和方法。方法:用含12%胎牛血清(FBS)的1640完全培養(yǎng)基培養(yǎng)HUVECs,每1-2天換液,待細胞長到80%左右進行傳代。在倒置顯微鏡下觀察,HUVECs呈橢圓形或短梭形,取長勢良好的第3代到第4代細胞用于實驗。待細胞長至50%左右,換用不含F(xiàn)BS的4ml 1640饑餓12h,后棄去不含F(xiàn)BS的1640,換用含12%FBS的1640培養(yǎng)液4ml,將實驗分為5組,對照組:不作處理;ox-LDL組:加入濃度為75mg/L的ox-LDL處理細胞24h;Ang-(1-7)+ox-LDL組:先加入濃度為1000nmol/L的Ang-(1-7)處理細胞30min,后加入濃度為75mg/L的ox-LDL處理細胞24h;A-779+Ang-(1-7)+ox-LDL組:先加入濃度為1000nmol/L的A-779處理細胞30min,再加入濃度為1000nmol/L的Ang-(1-7)處理細胞30min,最后加入濃度為75mg/L的ox-LDL處理細胞24h;A-779+ox-LDL組:先加入濃度為1000nmol/L的A-779處理細胞30min,再加入濃度為75mg/L的ox-LDL處理細胞24h。caspase-3、Tunel檢測細胞凋亡,Bradford法檢測HUVECs總蛋白含量,Western blot、RT-q PCR檢測內質網應激指標的表達。結果:與對照組相比,ox-LDL組內質網應激指標在基因及蛋白水平表達增加,細胞調亡增多,說明ox-LDL可以導致HUVECs發(fā)生ERS,進而導致細胞凋亡;與ox-LDL組相比,Ang-(1-7)+ox-LDL組內質網應激指標在基因及蛋白水平表達減少,細胞凋亡減少,說明Ang-(1-7)可以部分抑制ox-LDL誘導的ERS,減輕HUVECs的凋亡;與Ang-(1-7)+ox-LDL組相比,A-779+Ang-(1-7)+ox-LDL組內質網應激指標在基因及蛋白水平表達增加,細胞凋亡增加,提示Ang-(1-7)通過MAS受體發(fā)揮其保護作用。結論:ox-LDL可以誘導HUVECs發(fā)生ERS,導致細胞凋亡;Ang-(1-7)可以部分抑制ox-LDL對HUVECs的損傷,并且這種保護作用可以被MAS受體拮抗劑所阻斷。
【關鍵詞】：血管緊張素-(1-7) 氧化低密度脂蛋白 人臍靜脈內皮細胞 內質網應激
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R543.5
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用縮寫詞中英文對照表9-11
• 前言11-13
• 1 材料與方法13-21
• 1.1 實驗材料13-15
• 1.2 實驗方法15-21
• 2 結果21-34
• 2.1 caspase-321-22
• 2.2 RT-qPCR22-27
• 2.3 western blot27-31
• 2.4 TUNEL31-34
• 3 討論34-36
• 4 結論36-37
• 參考文獻37-41
• 綜述41-51
• 參考文獻46-51
• 致謝51-52
• 在學期間承擔/參與的科研課題與研究成果52-53
• 個人簡歷53

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本文編號：892377