本文關(guān)鍵詞：金、銀納米粒子的表面功能化及其在血栓檢測與治療方面的初步研究

  更多相關(guān)文章： 金納米粒子 肝素 抗凝血酶III 銀納米粒子 蘆丁 抗血栓形成

【摘要】：血栓形成是一種嚴(yán)重威脅人類健康的病理過程,與多種疾病,如腫瘤、感染性疾病、外傷和產(chǎn)科事故的發(fā)生都有著密切的關(guān)系。隨著科技的發(fā)展,人類解決了諸多以前束手無策的疑難雜癥,但對血栓形成的預(yù)防與治療還遠(yuǎn)未能達(dá)到理想水平。對于血栓前狀態(tài)(Prethrombotic state)人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一系列可檢測的分子標(biāo)志物,但是檢測方法的發(fā)展仍相對滯后。目前已發(fā)現(xiàn)了一些天然抗凝藥物如蘆丁等,能夠多途徑、多系統(tǒng)發(fā)揮作用且不良反應(yīng)發(fā)生率較低,在血栓形成的預(yù)防與治療方面顯現(xiàn)出巨大的潛力。但是較低的生物利用度與溶解度限制了其進(jìn)一步應(yīng)用。金、銀納米粒子因具有特殊的光學(xué)效應(yīng)、小尺寸效應(yīng)和良好的生物親和性,廣泛地應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷與治療。同時,金、銀納米粒子的表面功能化更拓寬了其應(yīng)用范圍。因此,本研究分別將肝素和蘆丁通過巰基(-SH)修飾于金納米粒子和銀納米粒子表面,探討了表面功能化的金、銀納米粒子在血栓診斷與治療方面的應(yīng)用:(1)肝素修飾的金納米粒子的制備及其對人抗凝血酶III的檢測研究利用肝素和抗凝血酶III(AT-III)可特異性識別的性質(zhì),將肝素巰基化后固定在金納米粒子表面,用于抗凝血酶III的檢測。制備了四種具有不同粒徑的肝素化金納米粒子(Hep-Au NPs),透射電子顯微鏡觀測結(jié)果表明其分散性良好,平均粒徑在修飾前后無明顯變化,分別為15 nm、42 nm、66 nm和100 nm。熱失重分析結(jié)果表明四種Hep-Au NPs表面肝素結(jié)合量分別為24.95%、23.90%、22.64%和19.32%。通過對比不同Hep-Au NPs對AT-III的測試結(jié)果,發(fā)現(xiàn)在1~26μmol/L濃度范圍內(nèi),平均粒徑為15 nm的Hep-Au NPs在531 nm處的吸光值變化與AT-III濃度呈良好線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)(R2)為0.996,檢出限(3σ)為0.003μmol/L,檢測重復(fù)性好,有望用于臨床AT-III檢測。(2)具有p H和葡萄糖響應(yīng)性的蘆丁-銀納米粒子的制備及其抗血栓形成研究以聚乙烯吡咯烷酮(PVP)為保護(hù)劑,制備了粒徑均一的銀納米粒子(Ag NPs),然后將蘆丁(Rutin)結(jié)合到Ag NPs表面,得到穩(wěn)定、水溶性良好的Rutin-Ag NPs復(fù)合物,并對其進(jìn)行了表征,結(jié)果顯示Rutin-Ag NPs修飾前后分散性和形貌均無明顯變化,Rutin-Ag NPs表面結(jié)合蘆丁的重量比為12.5%。此外,Rutin-Ag NPs有著良好的血清穩(wěn)定性和血液相容性,在體外表現(xiàn)出良好的p H和葡萄糖響應(yīng)性控釋行為,體外藥物釋放完全,釋放時間可達(dá)144 h。細(xì)胞實驗表明,Rutin-Ag NPs不具有明顯的細(xì)胞毒性。體外抗凝實驗表明,Rutin-Ag NPs有著良好的抗凝活性;動物實驗進(jìn)一步表明Rutin-Ag NPs在體內(nèi)可長效抑制血栓形成,并且減少出血風(fēng)險。
【關(guān)鍵詞】：金納米粒子 肝素 抗凝血酶III 銀納米粒子 蘆丁 抗血栓形成
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R543;TB383.1
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 第一章 緒論8-18
• 1.1 金、銀納米粒子概述8-10
• 1.1.1 金納米粒子8-9
• 1.1.2 銀納米粒子9
• 1.1.3 金、銀納米粒子的制備9-10
• 1.2 金、銀納米粒子特性10
• 1.3 金、銀納米粒子的表面功能化10-12
• 1.3.1 非共價作用11
• 1.3.2 共價作用11-12
• 1.4 功能化金、銀納米粒子在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用12-14
• 1.4.1 生物檢測分析12-13
• 1.4.2 金、銀納米粒子與藥物傳遞13-14
• 1.5 血栓形成的危害及分類14
• 1.6 血栓前狀態(tài)及其識別性檢測14-15
• 1.7 抗血栓藥物研究現(xiàn)狀15-16
• 1.7.1 抗凝血藥研究進(jìn)展15-16
• 1.7.2 蘆丁類化合物抗凝血作用研究進(jìn)展16
• 1.8 本文主要研究內(nèi)容及意義16-18
• 第二章 肝素修飾的金納米粒子的制備及其對人抗凝血酶III的檢測研究18-27
• 2.1 引言18-19
• 2.2 實驗材料19-20
• 2.2.1 實驗試劑19
• 2.2.2 實驗儀器19-20
• 2.3 實驗方法20-21
• 2.3.1 巰基肝素的制備20
• 2.3.2 肝素金納米粒子的制備20
• 2.3.3 Hep-AuNPs表面肝素結(jié)合量及其形貌表征20
• 2.3.4 AT-III檢測方法的建立20-21
• 2.4 結(jié)果與討論21-26
• 2.4.1 巰基肝素的表征21
• 2.4.2 Hep-AuNPs的表征21-22
• 2.4.3 粒徑對Hep-AuNPs檢測效果的影響22-24
• 2.4.4 Hep-AuNPs對AT-III的檢測24-25
• 2.4.5 方法的重復(fù)性和穩(wěn)定性考察25-26
• 2.5 本章小結(jié)26-27
• 第三章 具有pH和葡萄糖響應(yīng)性的蘆丁-銀納米粒子的制備及其抗血栓形成研究27-43
• 3.1 引言27-28
• 3.2 實驗材料28-29
• 3.2.1 實驗試劑28
• 3.2.2 實驗動物及細(xì)胞來源28-29
• 3.2.3 實驗儀器29
• 3.3 實驗方法29-32
• 3.3.1 銀納米粒子的制備29
• 3.3.2 蘆丁修飾的銀納米粒子的制備29
• 3.3.3 Rutin-AgNPs表面蘆丁結(jié)合量及其形貌表征29-30
• 3.3.4 穩(wěn)定性研究30
• 3.3.5 Rutin-AgNPs體外釋放研究30-31
• 3.3.6 Rutin-AgNPs體外細(xì)胞毒性31
• 3.3.7 體外抗凝活性31-32
• 3.3.8 小鼠尾部血栓實驗32
• 3.3.9 小鼠尾部出血實驗32
• 3.4 結(jié)果與討論32-41
• 3.4.1 Rutin-AgNPs的合成32-34
• 3.4.2 熱重及紅外分析34-35
• 3.4.3 血清穩(wěn)定性及血液相容性35-36
• 3.4.4 Rutin-AgNPs體外藥物釋放行為36-38
• 3.4.5 細(xì)胞毒性研究38-39
• 3.4.6 Rutin-AgNPs的體外抗凝活性39-40
• 3.4.7 抗小鼠尾部血栓形成研究40-41
• 3.4.8 小鼠尾部出血研究41
• 3.5 本章小結(jié)41-43
• 主要結(jié)論與展望43-45
• 主要結(jié)論43
• 展望43-45
• 致謝45-46
• 參考文獻(xiàn)46-51
• 附錄: 作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文51

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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本文編號：881225