本文關(guān)鍵詞：糞腸球菌心內(nèi)膜炎抗原EfaA在大鼠心內(nèi)膜炎中的作用

  更多相關(guān)文章： 糞腸球菌 心內(nèi)膜炎抗原 大鼠心內(nèi)膜炎 贅生物 生物膜

【摘要】：目的:探討糞腸球菌心內(nèi)膜炎抗原(Efa A)在大鼠感染性心內(nèi)膜炎中的作用,為臨床上預(yù)防和治療糞腸球菌感染性心內(nèi)膜炎的后續(xù)研究奠定基礎(chǔ)。方法:1、心內(nèi)膜炎大鼠模型的建立及評(píng)價(jià)右側(cè)頸動(dòng)脈導(dǎo)管插入術(shù)建立糞腸球菌心內(nèi)膜炎大鼠模型。將PE-50導(dǎo)管從大鼠右側(cè)頸動(dòng)脈插入,皮下固定,24小時(shí)后,經(jīng)大鼠尾靜脈注射0.5ml過(guò)夜培養(yǎng)的糞腸球菌菌液(1×108CFU/ml),72小時(shí)后腹腔麻醉處死大鼠。解剖大鼠剝離心臟,取出主動(dòng)脈瓣瓣膜贅生物,稱取贅生物濕重,計(jì)數(shù)贅生物分離培養(yǎng)菌落數(shù)(CFU/g),主動(dòng)脈瓣病理組織HE染色觀察,綜合評(píng)價(jià)心內(nèi)膜炎大鼠模型是否建立成功。2、糞腸球菌efa A-野生株和efa A+轉(zhuǎn)化株引起大鼠心內(nèi)膜炎的比較對(duì)大鼠進(jìn)行分組,導(dǎo)管插入成功后24小時(shí),經(jīng)大鼠尾靜脈分別注射0.5ml過(guò)夜培養(yǎng)的糞腸球菌efa A-野生株、糞腸球菌efa A+轉(zhuǎn)化株和糞腸球菌efa A-空白轉(zhuǎn)化對(duì)照株菌液,菌密度均為1×108CFU/ml。72小時(shí)后腹腔麻醉處死大鼠,解剖大鼠剝離心臟,取出主動(dòng)脈瓣瓣膜贅生物,比較3組大鼠的贅生物濕重、瓣膜贅生物研磨勻漿后細(xì)菌計(jì)數(shù)(CFU/g)及主動(dòng)脈瓣病理組織HE染色情況。3、糞腸球菌efa A-野生株和efa A+轉(zhuǎn)化株引起大鼠心內(nèi)膜炎的死亡率比較對(duì)大鼠進(jìn)行分組,導(dǎo)管插入成功后24小時(shí),經(jīng)大鼠尾靜脈分別注射0.5ml過(guò)夜培養(yǎng)的糞腸球菌efa A-野生株、糞腸球菌efa A+轉(zhuǎn)化株和糞腸球菌efa A-空白轉(zhuǎn)化對(duì)照株菌液,菌密度均為1×108CFU/ml。3天后觀察大鼠每天死亡數(shù)。4、糞腸球菌efa A-空白對(duì)照株和efa A+轉(zhuǎn)化株引起大鼠心內(nèi)膜炎的贅生物的藥物敏感性比較K-B紙片擴(kuò)散法檢測(cè)糞腸球菌efa A+轉(zhuǎn)化株對(duì)常見(jiàn)抗生素的藥物敏感性;根據(jù)抑菌圈直徑大小選擇糞腸球菌efa A+轉(zhuǎn)化株較為敏感的抗生素—青霉素,測(cè)其MBC值;分別取efa A+轉(zhuǎn)化株、efa A-空白對(duì)照株菌液感染的心臟瓣膜贅生物,每組分別于青霉素溶液(濃度為160μg/ml)中和生理鹽水中浸泡24小時(shí),分別研磨勻漿細(xì)菌計(jì)數(shù)。結(jié)果:1.大鼠心臟瓣膜可見(jiàn)贅生物形成,贅生物平均重量為15.3 mg,贅生物勻漿后分離培養(yǎng),平均菌落計(jì)數(shù)為6.79×1010CFU/g,心臟瓣膜病理組織HE染色觀察可見(jiàn)主動(dòng)脈瓣膜上有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),并見(jiàn)大量由血小板、纖維素、壞死組織、炎癥細(xì)胞、大量細(xì)菌及肉芽組織所構(gòu)成的贅生物附著在動(dòng)脈瓣膜組織上。成功建立心內(nèi)膜炎大鼠模型。2.糞腸球菌efa A-野生株和efa A+轉(zhuǎn)化株引起大鼠心內(nèi)膜炎的比較結(jié)果如下:efa A+轉(zhuǎn)化株組,贅生物濕重平均值為15.33mg,細(xì)菌計(jì)數(shù)為6.79×1010CFU/g;野生株組贅生物濕重平均值為7.27mg,細(xì)菌計(jì)數(shù)為3.40×1010CFU/g;空白對(duì)照組贅生物濕重平均值為8.51mg,細(xì)菌計(jì)數(shù)為3.32×1010CFU/g。①轉(zhuǎn)化株組與野生株組比較贅生物濕重值更高(P0.05),細(xì)菌計(jì)數(shù)更高(P0.05),主動(dòng)脈瓣炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)更多,炎癥更加明顯;②野生株組與空白對(duì)照組比較贅生物濕重值、細(xì)菌計(jì)數(shù)以及主動(dòng)脈瓣炎癥情況均差異不大(P0.05)。3.空白對(duì)照組與野生株組注射菌液7天死亡率分別為30%和40%,而轉(zhuǎn)化株組7天死亡率為70%,其余大鼠1周后處死解剖均可見(jiàn)不同程度的心內(nèi)膜炎。4.糞腸球菌efa A-空白對(duì)照株和efa A+轉(zhuǎn)化株引起大鼠心內(nèi)膜炎的贅生物的藥物敏感性比較結(jié)果如下:轉(zhuǎn)化株組贅生物用青霉素溶液處理和生理鹽水處理活細(xì)菌數(shù)均值分別為5.759×1010CFU/g、6.204×1010CFU/g,比值為0.928;空白對(duì)照組贅生物用青霉素溶液處理和生理鹽水處理活細(xì)菌數(shù)均值分別為1.058×1010CFU/g、2.754×1010CFU/g,比值為0.384。結(jié)論:1.成功構(gòu)建心內(nèi)膜炎大鼠模型;2.糞腸球菌Efa A蛋白有利于大鼠感染性心內(nèi)膜炎的發(fā)生發(fā)展。3.糞腸球菌efa A+轉(zhuǎn)化株在心內(nèi)膜炎中所形成的生物膜更為致密,對(duì)抗生素的敏感性較差。糞腸球菌efa A基因在體內(nèi)有助于生物膜的形成及感染性心內(nèi)膜炎的發(fā)生發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：糞腸球菌 心內(nèi)膜炎抗原 大鼠心內(nèi)膜炎 贅生物 生物膜
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R542.41
【目錄】：

• 中英文對(duì)照5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-13
• 材料和方法13-24
• 1. 材料13-14
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、導(dǎo)管和菌株13
• 1.2 主要儀器設(shè)備13
• 1.3 主要試劑13-14
• 1.4 主要溶液的配置14
• 2. 方法14-24
• 2.1 心內(nèi)膜炎大鼠模型的建立與評(píng)價(jià)14-19
• 2.2 糞腸球菌efa A-野生株和efa A+轉(zhuǎn)化株引起大鼠心內(nèi)膜炎的比較19-20
• 2.3 糞腸球菌efa A-野生株和efa A+轉(zhuǎn)化株引起大鼠心內(nèi)膜炎的死亡率比較20
• 2.4 心內(nèi)膜炎贅生物的藥敏實(shí)驗(yàn)20-24
• 結(jié)果24-32
• 1. 心內(nèi)膜炎大鼠模型的建立及評(píng)價(jià)24-25
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心臟贅生物濕重及分離培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)24
• 1.2 主動(dòng)脈瓣病理組織學(xué)HE染色24-25
• 2. 糞腸球菌efa A-野生株和efa A+轉(zhuǎn)化株引起大鼠心內(nèi)膜炎的比較25-28
• 2.1 贅生物稱重25-26
• 2.2 贅生物細(xì)菌計(jì)數(shù)26-27
• 2.3 病理組織HE染色27-28
• 3. 糞腸球菌efa A-野生株和efa A+轉(zhuǎn)化株引起大鼠心內(nèi)膜炎的死亡率比較28
• 4. 心內(nèi)膜炎贅生物的藥敏實(shí)驗(yàn)28-32
• 4.1 K-B紙片擴(kuò)散法藥敏實(shí)驗(yàn)28-29
• 4.2 MBC值測(cè)定29-30
• 4.3 贅生物抗生素浸泡后活細(xì)菌數(shù)比較30-32
• 討論32-37
• 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-40
• 綜述40-45
• 參考文獻(xiàn)43-45
• 致謝45

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2 徐瑞q，

本文編號(hào)：771846