本文關(guān)鍵詞：ApoE基因型和5XFAD基因背景對小鼠主動脈粥樣硬化及相關(guān)炎癥分子的影響

  更多相關(guān)文章： 載脂蛋白 E 動脈粥樣硬化 炎癥分子 絲裂原活化蛋白激酶5XFAD 基因

【摘要】：目的:載脂蛋白E(Apo E)是人血漿中的重要脂蛋白之一,與脂質(zhì)代謝有密切的關(guān)系,其多態(tài)性與多種疾病有密切相關(guān),如動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)、阿爾茲海默病(Alzheimer disease,AD)。本研究旨在探討有/無AD基因背景下,不同Apo E基因型對小鼠血脂、主動脈粥樣硬化和炎癥分子ICAM-1(Intercelluar Adhesion Molecule-1)、VCAM-1(Vascular Cell Adhesion Molecule-1)、MCP-1(Monocyte Chemoattractant Protein-1)表達的影響,以及MAPKs信號通路在其中的可能調(diào)控機制。方法:SPF級雄性、12月齡小鼠,分組:C57BL/6J對照組,Apo E基因敲除(Apo E-/-)組,Apo E2、Apo E3、Apo E4組(分別表達人E2、E3、E4基因的轉(zhuǎn)基因小鼠,Apo E-TR),含有APP/PS1 5XFAD基因背景的Apo E-/-/5XFAD、Apo E2/5XFAD、Apo E3/5XFAD、Apo E4/5XFAD組(Apo E-TR/5XFAD),每小組6-12只。正常飲食喂養(yǎng)12個月后處死動物。收集血清,采用酶法檢測血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)。取小鼠主動脈(主動脈根部至主動脈弓)進行冰凍連續(xù)切片,應(yīng)用蘇木素-依紅染色(HE染色)和蘇丹Ⅳ染色后,觀察和檢測小鼠動脈粥樣硬化斑塊的組織學(xué)特點和病變情況,Image Pro Plus軟件測量血管內(nèi)膜面積;組織免疫熒光法觀察主動脈內(nèi)炎癥分子(VCAM-1、MCP-1)表達情況。取小鼠胸腹主動脈(自主動脈根部至髂總動脈分叉處),蛋白印跡法檢測主動脈內(nèi)ICAM-1、VCAM-1蛋白表達量、MAPKs(ERK、JNK、P38)表達及磷酸化水平的變化。結(jié)果:1、血脂水平的變化:(1)與對照組相比較,Apo E-/-組和Apo E-/-/5XFAD組血清TC、TG、LDL-C水平均顯著升高,分別是對照組的8.3、4.9、26.1倍和19.5、5.2、31.0倍,non-HDL-C水平也明顯升高,分別為對照組的33.4倍和54.0倍(P0.05);(2)Apo E2、Apo E2/5XFAD小鼠的TC、TG、LDL-C、non-HDL-C同樣較野生型明顯升高,是對照組的6.3、4.4、16.3、18.4倍和7.0、2.8、10.1、12.4倍(P0.05);(3)Apo E-TR組和Apo E-TR/5XFAD組中Apo E3、Apo E4兩組的血清TC、TG、LDL-C和non-HDL-C水平與對照組比較均無顯著性差異(P0.05);(4)與單純Apo E-/-組比較,Apo E-/-/5XFAD組TC和non-HDL-C水平明顯升高,分別為前者的2.3倍和1.6倍(P0.05)。2、動脈粥樣硬化病變程度:(1)Apo E-/-組和Apo E-/-/5XFAD組的主動脈根部動脈粥樣硬化病變明顯,可見斑塊形成,內(nèi)膜面積較對照組有明顯增大,分別為58107.6±7339.0μm2(Apo E-/-組)、96208.6±32032.5μm2(Apo E-/-/5XFAD組)VS 18819.3±2162.7μm2(對照組)(P0.05);(2)Apo E2/5XFAD組主動脈可見少量斑塊形成,但是分析其內(nèi)膜面積與對照組比較沒有顯著差異(40078.7±25272.5μm2 VS 18819.3±2162.7μm2,P0.05);(3)無論有無AD基因背景,Apo E3、Apo E4組小鼠主動脈未見明顯動脈粥樣硬化病變,其內(nèi)膜面積與對照組比較無顯著差異(P0.05)。3、主動脈炎癥分子的表達:(1)主動脈提取物ICAM-1蛋白的表達在Apo E-/-組和Apo E-/-/5XFAD組顯著高于對照組(P0.05);無論有否AD基因,Apo E-TR各組(Apo E2、Apo E3、Apo E4)組和Apo E-TR/5XFAD各組(Apo E2/5XFAD、Apo E3/5XFAD、Apo E4/5XFAD)ICAM-1蛋白的表達與對照組比較均無顯著差異(P0.05);(2)主動脈提取物中VCAM-1蛋白表達在Apo E-/-組、Apo E-/-/5XFAD組和Apo E2/5XFAD組顯著高于對照組(P0.05);Apo E-TR各組(Apo E2、Apo E3、Apo E4)組和Apo E3/5XFAD、Apo E4/5XFAD組VCAM-1蛋白表達與對照組比較均無顯著差異(P0.05);(3)在主動脈免疫熒光染色中,VCAM-1和MCP-1熒光強度在Apo E-/-組、Apo E-/-/5XFAD組和Apo E2/5XFAD組增強。4、MAPKs磷酸化水平:(1)與對照組比較,ERK1/2磷酸化水平在Apo E-/-、Apo E2和所有Apo E-TR/5XFAD組中升高(P0.05);(2)JNK磷酸化水平僅在Apo E-/-組中升高(P0.05),在其他Apo E-TR組和所有Apo E-TR/5XFAD組中無顯著變化(P0.05);(3)在所有組別中P38磷酸化水平未見顯著差異(P0.05)。結(jié)論:1、無論有否AD基因背景,Apo E基因缺失小鼠均可導(dǎo)致嚴(yán)重的高脂血癥、主動脈AS斑塊和ICAM-1、VCAM-1等炎癥分子高表達;Apo E2基因型可引起明顯高脂血癥,但其促主動脈AS和上述炎癥分子高表達還受到AD基因背景的影響;含Apo E3、E4小鼠未見明顯脂質(zhì)代謝紊亂、AS病變和ICAM-1、VCAM-1等炎癥分子高表達。2、5XFAD基因背景可在一定程度上加劇Apo E-/-小鼠的脂質(zhì)代謝紊亂,加重Apo E-/-小鼠和Apo E2小鼠AS病變程度,促進炎癥分子高表達。3、在Apo E-/-、Apo E2和Apo E-TR/5XFAD小鼠主動脈中ERK1/2信號通路被激活。
【關(guān)鍵詞】：載脂蛋白 E 動脈粥樣硬化 炎癥分子 絲裂原活化蛋白激酶5XFAD 基因
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R543.5
【目錄】：

• 縮略詞表4-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-14
• 材料和方法14-21
• 結(jié)果21-33
• 1. Apo E基因型和 5XFAD基因背景對血脂代謝的影響21-23
• 2. Apo E基因型和 5XFAD基因背景對主動脈粥樣硬化的影響23-26
• 3. Apo E基因型和 5XFAD基因背景對主動脈炎癥分子表達的影響26-31
• 4. Apo E基因型和 5XFAD基因背景對主動脈MAPKs磷酸化的影響31-33
• 討論33-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻40-43
• 綜述43-49
• 參考文獻47-49
• 致謝49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 張清德;曲忠森;;阿爾茨海默病患者血脂及內(nèi)皮功能的變化[J];中國實用神經(jīng)疾病雜志;2008年08期

2 崔虎;關(guān)立克;;絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)在動脈粥樣硬化中的意義[J];吉林醫(yī)學(xué);2013年01期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 于笑峰;載脂蛋白E基因多態(tài)性與頸動脈粥樣硬化的相關(guān)性研究[D];青島大學(xué);2006年

，

本文編號：751394