本文關(guān)鍵詞：環(huán)磷腺苷葡胺誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的實驗研究及對舒張性心力衰竭患者的療效分析

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【摘要】：第一部分環(huán)磷腺苷葡胺對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的影響及機制研究目的:探討環(huán)磷腺苷葡胺(Meglumine Cyclic Adenylate MCA)對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的影響及作用機制。方法:采用全骨髓貼壁法培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells BMSCs),流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞表面抗原CD44、CD90、CD45的表達(dá)情況。1)取生長旺盛的P3代細(xì)胞分為3組:正常對照組、MCA組、5氮雜胞苷(5-Aza)組,培養(yǎng)至4w后利用RT-PCR測定BMSCs心肌特異性基因Gata-4m RNA、Cx43m RNA的表達(dá)情況,Western-blotting法檢測心肌特異蛋白c Tn T、Cx43的表達(dá)。2)第3代細(xì)胞分為3組:正常對照組、MCA組、MCA+LY294002組,培養(yǎng)至4w后Western-blotting法檢測細(xì)胞通路蛋白PI3K、p-AKT、p-Foxo3a、DOK5的表達(dá)。結(jié)果:通過全骨髓貼壁體外培養(yǎng)獲得的BMSCs經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)鑒定后,細(xì)胞表面抗原符合BMSCs基本特征標(biāo)志。1)1×10-3mol/L MCA誘導(dǎo)干預(yù)3d后GATA-4m RNA,Cx43m RNA相對表達(dá)量最高(P0.01),心肌特異蛋白c Tn T、Cx43表達(dá)量較正常對照組、5-Aza組明顯升高(P0.01)。2)MCA組PI3K、p-AKT、p-Foxo3a、DOK5的相對表達(dá)量較正常對照組、MCA+LY294002組明顯升高(P0.01)。結(jié)論:MCA(1×10-3mol/L)誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞3d,可發(fā)揮最佳誘導(dǎo)分化作用,其機制可能與PI3K/AKT細(xì)胞信號通路相關(guān)。第二部分環(huán)磷腺苷葡胺對舒張性心力衰竭患者的療效分析目的:探討MCA治療舒張性心力衰竭(diastolic heart failure,DHF)患者的療效及可能機制。方法:1)按照2012年ESC心衰指南標(biāo)準(zhǔn)通過臨床癥狀、心臟彩超等檢查確診DHF患者66例,其中31例患者應(yīng)用常規(guī)藥物治療(如β受體阻滯劑、ACEI或ARB、利尿劑等),設(shè)為對照組;35例患者除應(yīng)用常規(guī)藥物治療外,加用注射用MCA治療,設(shè)為實驗組。2)分別收集對照組及實驗組入院24小時內(nèi)及治療一個周期(治療后第15天)后的外周血液各2管。其中1管測定血漿NT-Pro BNP數(shù)值濃度的大小,分析兩組治療前后心功能改變情況。3)將另1管血利用人淋巴細(xì)胞分離液分離提取單個核細(xì)胞,并提取出總RNA,采用RT-PCR法測定兩組治療前后GATA-4、Cx43基因的相對表達(dá)量變化。結(jié)果:1)66例患者均積極配合治療,治療過程中無一例退出,無死亡病例出現(xiàn)。2)兩組患者入院時檢測NT-Pro BNP數(shù)值濃度無明顯差異,實驗組及對照組治療前后NT-Pro BNP數(shù)值濃度均有所改善,其中實驗組治療后NT-Pro BNP數(shù)值濃度明顯降低,并且實驗組與對照組治療后血NT-Pro BNP下降的程度,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),MCA可以提高DHF的療效。3)兩組患者入院時檢測心肌特異性基因GATA-4 m RNA、Cx43m RNA表達(dá)無明顯差異(P0.05),實驗組治療后較對照組治療后GATA-4m RNA、Cx43 m RNA相對表達(dá)量明顯增高(P0.01),比較實驗組與對照組治療前后GATA-4 m RNA、Cx43 m RNA的上升程度,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:MCA可以提高DHF患者的治療療效,機制可能與MCA可以誘導(dǎo)外周血中的BMSCs向心肌樣細(xì)胞分化相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：環(huán)磷腺苷葡胺 干細(xì)胞 心肌細(xì)胞 分化 環(huán)磷腺苷葡胺 舒張性心力衰竭 療效 NT-Pro BNP 心功能
【學(xué)位授予單位】：濟寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R54
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• Abstract8-12
• 符號說明12-14
• 第一部分 環(huán)磷腺苷葡胺對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的影響及機制研究14-32
• 前言14-17
• 材料和方法17-26
• 結(jié)果26-28
• 討論28-31
• 結(jié)論31-32
• 第二部分 環(huán)磷腺苷葡胺對舒張性心力衰竭患者的療效分析32-44
• 前言32-34
• 材料和方法34-37
• 結(jié)果37-39
• 討論39-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻44-49
• 綜述49-61
• 參考文獻57-61
• 附錄61-66
• 致謝66-68
• 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果68

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本文編號：737893