本文關鍵詞：慢性心衰大鼠胰島素通路mRNA變化及代謝輪廓觀察

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【摘要】：目的:測定慢性心力衰竭大鼠糖代謝能力的變化,包括機體葡萄糖代謝能力、胰島素敏感性以及胰島素分泌能力;觀察心衰狀態(tài)下大鼠肝臟、脂肪及骨骼肌等組織中胰島素受體及其亞型、胰島素受體底物-1和2、葡萄糖轉運體-1和4m RNA表達的改變;應用代謝組學試驗方法對慢性心力衰竭大鼠的肝臟,脂肪及骨骼肌等組織進行分析;結合網(wǎng)絡數(shù)據(jù)庫,查找特征性物質(zhì)數(shù)據(jù),從代謝角度探索慢性心衰代謝變化規(guī)律。方法:4-6周Wistar雄性大鼠40只,采用隨機數(shù)字表法分為心衰組和假手術組,每組20只。心衰組行腹主動脈縮窄手術,對照組行假手術,術后飼養(yǎng)24周,檢測超聲心動,行腹腔胰島素耐量(IPITT),靜脈葡萄糖耐量(IVGTT)和靜脈胰島素釋放試驗(IRT)。通過RT-PCR和Real-time PCR方法檢測肝臟,脂肪及骨骼肌中胰島素受體及其亞型、胰島素受體底物-1和2、葡萄糖轉運體-1和4m RNA表達。應用Accela超高液相色譜系統(tǒng)與LTQ Orbitrap XL質(zhì)譜聯(lián)用技術分析慢性心衰大鼠肝臟,脂肪及骨骼肌組織。使用Mzmine2.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行數(shù)據(jù)篩選及處理。利用SIMCA-P軟件對數(shù)據(jù)進行主成分分析及正交偏最小二乘分析,進行變異性分析,構建疾病區(qū)分模型。運用非參數(shù)檢驗篩選出慢性心衰后肝臟、脂肪、骨骼肌的特征物質(zhì),利用SPSS 19.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,最終得到特征代謝物質(zhì)。結果:成功構建大鼠慢性心衰模型,超聲心動示心功能衰竭、射血分數(shù)減低、心室壁厚度增加、主動脈流速減低。病理切片示心肌細胞排列紊亂,層次感消失,心肌纖維增粗,細胞核畸形、偏向胞體一側,局部可見空泡變性。肝組織鏡下主要表現(xiàn)為肝臟淤血性損害�？梢姼窝]增寬,細胞出現(xiàn)輕度腫脹,細胞核出現(xiàn)深染、核固縮改變,靜脈系統(tǒng)內(nèi)淤血明顯,肝細胞出現(xiàn)大面積壞死,尤其以中央靜脈周圍多見,局部仍還有散在的形態(tài)正常的細胞團。腎臟病理示腎皮質(zhì)變薄、腎皮質(zhì)中的腎單位減少,并存在不同程度的腎小動脈壁增厚改變。與SHAM組相比,CHF組空腹血糖和血清胰島素水平無明顯差異,但對外源性葡萄糖的處理能力和維持正常血糖的能力明顯減弱(P0.05),對胰島素反應性明顯降低(P0.05),外源性胰島素的降糖能力減弱(P0.05)。IRT證實在處理同等劑量的葡萄糖,CHF組胰島素分泌量顯著多于對照組(P0.01),胰島素需求量增加。與SHAM組比,CHF組Ins R在肝臟,脂肪和骨骼肌中出現(xiàn)明顯降低(P0.001),IRS-1、2在脂肪中明顯降低(P0.001)、肝臟和骨骼肌中無明顯統(tǒng)計學差異。GLUT-1在脂肪和骨骼肌中明顯降低(P0.001)。GLUT-4在脂肪中明顯降低(P0.001),在肝臟中出現(xiàn)上調(diào)趨勢(P0.05),差異有統(tǒng)計學意義。代謝組學分析結果從肝臟組織中確定了12種特征物質(zhì),脂肪組織中確定了3種特征物質(zhì),肌肉組織中確定了3種特征物質(zhì)。CHF組中變化異常物質(zhì)主要與葡萄糖-氨基酸代謝,脂質(zhì)代謝、蛋白質(zhì)合成相關物質(zhì)。結論:慢性心力衰竭在發(fā)生發(fā)展過程中存在機體糖代謝紊亂和胰島素抵抗的發(fā)生,是一種合并代謝紊亂的綜合癥。心衰狀態(tài)下肝臟、脂肪、骨骼肌胰島素通路相關成分在基因水平發(fā)生明顯變化,以脂肪組織為重。利用代謝組學平臺發(fā)現(xiàn)了和心衰代謝紊亂相關的特征代謝物,對心力衰竭和對照組之間差異有關的代謝物主要為溶血磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰乙醇胺,油酸,甘氨膽酸,硫酸脫氫表雄酮、植烷酸、前列素類、肌肽等與葡萄糖-氨基酸代謝,脂質(zhì)代謝、蛋白質(zhì)合成相關物質(zhì)。
【關鍵詞】：慢性心力衰竭 大鼠 胰島素抵抗 基因變化 代謝組學
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R541.6
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語/符號說明11-12
• 前言12-20
• 研究現(xiàn)狀、成果12-17
• 研究目的、方法17-20
• 一、大鼠慢性心力衰竭模型的建立、機體糖代謝紊亂與胰島素抵抗的測定20-29
• 1.1 大鼠慢性心力衰竭模型建立20-23
• 1.1.1 模型的制備20
• 1.1.2 心臟超聲結果比較20-21
• 1.1.3 病理切片和HE染色21-23
• 1.2 機體胰島素抵抗、糖代謝紊亂23-26
• 1.2.1 口服糖耐量試驗23
• 1.2.2 腹腔注射胰島素耐受試驗23-24
• 1.2.3 靜脈糖耐量試驗和靜脈胰島素釋放實驗24
• 1.2.4 統(tǒng)計學方法24
• 1.2.5 結果24-26
• 1.3 討論26-29
• 二、大鼠慢性心力衰竭模型組織胰島素通路mRNA表達變化29-37
• 2.1 對象及方法29-32
• 2.1.1 儀器與試劑29
• 2.1.2 取樣與樣本處理29-32
• 2.2 肝臟、脂肪、肌肉組織中胰島素通路mRNA表達變化32-35
• 2.2.1 肝臟組織中胰島素通路mRNA表達變化32
• 2.2.2 脂肪組織中胰島素通路mRNA表達變化32-33
• 2.2.3 肌肉組織中胰島素通路mRNA表達變化33-35
• 2.3 討論35-36
• 2.4 小結36-37
• 三、慢性心力衰竭大鼠模型組織代謝組學輪廓觀察37-51
• 3.1 對象及方法37-41
• 3.1.1 儀器與試劑37-39
• 3.1.2 取樣與樣本處理39-40
• 3.1.3 樣本分析40
• 3.1.4 數(shù)據(jù)分析40-41
• 3.1.5 物質(zhì)鑒定41
• 3.2 結果41-48
• 3.2.1 質(zhì)控分析41
• 3.2.2 對照組與心衰組的肝臟、脂肪、肌肉組織的總離子流程圖41-43
• 3.2.3 肝臟組織數(shù)據(jù)主要成分分析及偏最小二乘法辨別分析43-44
• 3.2.4 肝臟組織潛在代謝標志物的初步鑒定44-46
• 3.2.5 脂肪組織數(shù)據(jù)主要成分分析及偏最小二乘法辨別分析46
• 3.2.6 脂肪組織潛在代謝標志物的初步鑒定46-47
• 3.2.7 肌肉組織數(shù)據(jù)主要成分分析及偏最小二乘法辨別分析47
• 3.2.8 肌肉組織潛在代謝標志物的初步鑒定47-48
• 3.3 討論48-51
• 結論51-52
• 參考文獻52-58
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明58-59
• 綜述 慢性心力衰竭與胰島素抵抗59-64
• 綜述參考文獻61-64
• 致謝64-65
• 個人簡歷65

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鄭明奇;劉剛;田立;;溶血磷脂酰膽堿對T型鈣離子通道的心肌細胞內(nèi)信號調(diào)控機制[J];中華心臟與心律電子雜志;2013年01期

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本文編號：685253