本文關(guān)鍵詞：鈉泵介導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與心肌缺血再灌注損傷

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【摘要】：目的:在細胞水平上,探討鈉泵與心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)損傷的關(guān)系、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與心肌缺血再灌注損傷的相關(guān)性。進一步研究鈉泵信號通路是否通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)參與心肌缺血再灌注損傷。方法:原代心肌細胞培養(yǎng)成功后,細胞水平上構(gòu)建缺氧復(fù)氧模型。缺氧復(fù)氧過程中,對各組采用不同的干預(yù)處理。實驗分四組:(1)、正常對照組,(2)、缺氧復(fù)氧組(I/R),(3)、缺氧復(fù)氧+哇巴因組(Ouabain-I/R),(4)、缺氧復(fù)氧+地高辛抗血清組(Anti-Digoxin-I/R)。缺氧復(fù)氧完成后通過流式細胞儀,采用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡;采用Western blot檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激指標及信號分子GRP-78以及促凋亡蛋白Bax表達水平。結(jié)果:1、流式結(jié)果:與對照組相比,I/R組細胞活性下降,凋亡率增高(P0.05)。與I/R組相比,Ouabain-I/R組細胞凋亡率增高(P0.05),Anti-Digoxin-I/R組細胞凋亡率減少(P0.05)。2、Western blot結(jié)果:與對照組相比,I/R組細胞Bax、GRP78蛋白表達量增高(P0.05)。與I/R組相比,Ouabain-I/R組細胞Bax、GRP78蛋白表達量增高(P0.05),Anti-Digoxin-I/R組細胞Bax、GRP78蛋白表達量減少(P0.05)。結(jié)論:1、缺氧/復(fù)氧加重心肌細胞凋亡。2、抑制鈉泵活性加重缺血再灌注細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、加重心肌細胞凋亡,激活鈉泵活性能夠減輕缺血再灌注細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、減輕心肌細胞凋亡。3、鈉泵可能通過誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與心肌缺血再灌注損傷。
【關(guān)鍵詞】：心肌缺血再灌注損傷 鈉泵 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 細胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R541.4
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-9
• 摘要9-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-17
• 研究內(nèi)容與方法17-31
• 1.研究材料17-21
• 1.1 主要儀器17
• 1.2 主要試劑及耗材17-18
• 1.3 試劑配制18-21
• 2.研究方法21-30
• 2.1 心肌細胞原代培養(yǎng)21-23
• 2.2 免疫組化23-24
• 2.3 細胞缺氧復(fù)氧實驗24
• 2.4 流式細胞儀檢測細胞凋亡24-25
• 2.5 Western blot25-30
• 3.統(tǒng)計學(xué)方法30-31
• 結(jié)果31-35
• 討論35-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻43-49
• 綜述 心肌缺血再灌注損傷的研究進展49-64
• 參考文獻58-64
• 附圖64-65
• 作者簡介及讀研期間主要科研成果65-66
• 致謝66

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本文編號：651207