本文關(guān)鍵詞：高表達(dá)miR-133的大鼠BMSCs治療心肌梗死的療效分析

  更多相關(guān)文章： miR-133 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 心肌梗死

【摘要】：目的:通過(guò)構(gòu)建攜帶micro RNA-133(mi R-133)的慢病毒質(zhì)粒感染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),使得mi R-133在BMSCs中高表達(dá),觀察其移植入大鼠心梗區(qū)域后對(duì)心肌梗死的治療作用,并對(duì)其作用機(jī)制作初步研究。方法:在分離、培養(yǎng)SD大鼠BMSCs方面我們采用的是骨髓差異貼壁法,然后對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增和鑒定;使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染mi R-133-agomir(過(guò)表達(dá))或mi R-133antagomir(抑制)以調(diào)控mi R-133在BMSCs內(nèi)的表達(dá)水平,之后收集BMSCs并觀察mi R-133對(duì)BMSCs的活力、凋亡的影響,再與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)觀察心肌細(xì)胞中Snail1基因的表達(dá)變化。構(gòu)建攜帶綠色熒光蛋白(GFP)的mi R-133慢病毒載體并感染BMSCs,建立mi R-133高表達(dá)的BMSCs。然后采用冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎法建立大鼠心梗模型后,通過(guò)心肌內(nèi)注射方法,分別將BMSCs-p CDH-mi R-133組,BMSCs-p CDH-vecto組,正常培養(yǎng)的BMSCs組及PBS組移植至心梗周邊區(qū)域,并在術(shù)后第7天及第28天分別檢測(cè)大鼠心梗后心功能變化,28天后取出心臟測(cè)算心梗面積評(píng)估治療效果。結(jié)果:mi R-133-agomir轉(zhuǎn)染后的BMSCs組中細(xì)胞凋亡的數(shù)量明顯減少,在與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中此組也顯著降低了Snail1基因的表達(dá);我們成功構(gòu)建mi R-133的慢病毒質(zhì)粒并高效轉(zhuǎn)染BMSCs,發(fā)現(xiàn)BMSCs-mi R-133移植組可以通過(guò)減少心梗后心臟的炎癥侵潤(rùn),減少梗死區(qū)域面積來(lái)起到緩解心肌梗死的作用,對(duì)心功能的恢復(fù)起到促進(jìn)效果。結(jié)論:綜上所述,mi R-133高表達(dá)可以減少BMSCs的凋亡;本研究成功構(gòu)建高表達(dá)mi R-133的BMSCs;BMSCs-mi R133可以顯著改善心梗后心臟功能,減少心臟梗死區(qū)域面積,這可能與BMSCs凋亡減少以及mi R-133抑制了心肌細(xì)胞(CMs)中Snail1基因的表達(dá)有關(guān)。本研究將為以后進(jìn)一步利用基因修飾的BMSCs且使其更加適用于相關(guān)疾病的治療提供了理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：miR-133 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 心肌梗死
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R542.22
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-11
• 第一部分 轉(zhuǎn)染R-133對(duì)BMSCS和心肌細(xì)胞的影響分析11-24
• 第一節(jié) BMSCs、CMs 的分離、培養(yǎng)及 BMSCs 的鑒定11-15
• 第二節(jié) 轉(zhuǎn)染 miR-133 對(duì) BMSCs 影響的分析15-24
• 第二部分 高表達(dá)MIR-133質(zhì)粒的構(gòu)建24-30
• 1.實(shí)驗(yàn)儀器和實(shí)驗(yàn)試劑24
• 2.實(shí)驗(yàn)方法24-27
• 3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-30
• 第三部分 高表達(dá)MIR-133的BMSCS對(duì)心梗的療效評(píng)估30-38
• 1.實(shí)驗(yàn)儀器和實(shí)驗(yàn)試劑30-31
• 2.實(shí)驗(yàn)方法31-33
• 3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-38
• 討論38-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-51
• 綜述51-59
• 參考文獻(xiàn)56-59
• 中英文對(duì)照縮略詞表59-60
• 攻讀碩士學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文60-61
• 致謝61-63

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 趙云峰;高表達(dá)miR-133的大鼠BMSCs治療心肌梗死的療效分析[D];蘇州大學(xué);2016年

2 魯文東;病毒性心肌炎患兒循環(huán)血miR-1和miR-133的表達(dá)變化及臨床意義研究[D];山東大學(xué);2013年

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本文編號(hào)：620969