發(fā)布時間：2017-07-29 23:17

  本文關鍵詞：低濃度過氧化氫通過上調(diào)WDR26促進心肌細胞H9c2的增殖

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【摘要】：WDR26是從經(jīng)歷短暫缺血-再灌注的大鼠心肌組織中發(fā)現(xiàn)并表達上調(diào)的基因,又被命名為缺血預適應上調(diào)基因2(myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2,MIP2),其Gen Bank登錄號是AY221751。它的最大開放閱讀框為1497bp,編碼498個氨基酸。其編碼肽鏈的C-端含5個WD40結構域,故為典型的WD-重復蛋白。該基因被證實對缺血-再灌注引起的心肌損傷有保護作用。缺血預適應、后適應發(fā)揮內(nèi)源性心肌保護作用時,機體的活性氧產(chǎn)生也是增加的,但活性氧在其中所起的保護作用機制尚不清楚。本實驗采用大鼠心室肌H9c2細胞株,運用外源性低濃度過氧化氫作用于細胞,通過不同作用時間及不同作用濃度,采用MTT比色法、流式細胞術等方法,觀察低濃度過氧化氫對細胞的增殖影響。結果顯示:低濃度的H2O2(12~50μmol/L)刺激后的細胞數(shù)目及570 nm的吸光度值增加,活細胞數(shù)目增多;細胞流式術顯示低濃度過氧化氫細胞的DNA合成增加,細胞增殖明顯,說明低濃度的H2O2有明顯的促進細胞增殖的作用。結果還顯示,中等劑量的H2O2(500μmol/L)可引起H9c2細胞散在性固縮壞死及溶解壞死。說明不同劑量的過氧化氫作用于H9c2細胞,會引起明顯不同的生物學效應。我們前期實驗顯示,WDR26與心肌缺血預適應的發(fā)生密切相關,且WDR26有抑制過氧化氫誘導的細胞凋亡的作用,那么活性氧促細胞增殖的機理是否與WDR26有關,目前還不清楚。本實驗選擇以Western Blot和RT-PCR的方法,研究WDR26在不同濃度及不同時間的H2O2處理H9c2心肌細胞后其表達的動態(tài)變化。結果發(fā)現(xiàn),低濃度H2O2(12~50μM)處理后,WDR26的m RNA表達增加,于4h達高峰,然后逐步降低,24h時仍高于非處理組。WDR26蛋白質(zhì)表達水平隨著H2O2濃度的增加而升高。運用RNA干擾將WDR26基因沉默后,其促增殖作用明顯減弱。上述結果說明,低濃度的H2O2是通過上調(diào)WDR26的表達來促進H9c2心肌細胞的增殖。
【關鍵詞】：過氧化氫 低濃度 WDR26 心肌細胞 增殖
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R541.4
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 第1章 緒論11-15
• 第2章 低濃度過氧化氫促進H9c2 細胞增殖的研究15-20
• 2.1 實驗材料15-16
• 2.2 實驗方法16-17
• 2.3 實驗結果17-19
• 2.4 小結19-20
• 第3章 H_2O_2促H9c2 細胞增殖過程中WDR26 基因的表達20-31
• 3.1 實驗材料20-23
• 3.2 實驗方法23-27
• 3.3 實驗結果27-29
• 3.4 小結29-31
• 第4章 討論31-33
• 第5章 結論33-34
• 參考文獻34-39
• 文獻綜述39-49
• 參考文獻43-49
• 作者攻讀學位期間的發(fā)表的論文49-51
• 致謝51

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 榮彥生;呂鵬;王洪武;;腺苷聯(lián)合冷血含鉀停搏液在冠狀動脈旁路移植術中的應用[J];山東醫(yī)藥;2014年36期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳蒙蒙;一種非去極化心臟停跳液對血管內(nèi)皮的保護作用及機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2014年

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本文編號：591557