本文關(guān)鍵詞：構(gòu)建捕獲EPC的生物功能化磁性納米粒子

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【摘要】：目前冠心病治療方法主要有藥物治療、心臟搭橋手術(shù)和介入治療三大類,介入治療由于操作簡單、創(chuàng)傷小、見效快等優(yōu)勢,已成為治療冠心病的一種最重要的手段,其中冠狀動脈血管支架植入術(shù)是冠心病介入治療中最有效的技術(shù)之一。然而支架置入過程中會導(dǎo)致血管內(nèi)皮的損傷,形成血栓并產(chǎn)生再狹窄。研究發(fā)現(xiàn),加速血管支架快速再內(nèi)皮化會抑制再狹窄和晚期血栓的發(fā)生。因此通過捕獲內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs),歸巢至血管損傷內(nèi)皮部位是目前生理性修復(fù)血管內(nèi)皮損傷的有效調(diào)控手段。目前捕獲EPCs的手段中,磁性納米粒子正在受到關(guān)注。本課題利用沒食子酸(GA)修飾Fe304并結(jié)合CD34抗體,獲得具有良好磁響應(yīng)性和特異性識別EPCs的磁性納米粒子(MNP@GA-CD34);傅里葉紅外光譜(FT-IR)、X射線光電子能譜(XPS)和透射電子顯微鏡(TEM)結(jié)果表明GA和CD34抗體對Fe304的成功修飾。粒徑分析(DLS)、場發(fā)射掃描電子顯微鏡(SEM)和振動樣品測磁儀(VSM)分別表征修飾前后納米粒子的水合粒徑,形貌以及磁飽和強(qiáng)度。DLS結(jié)果顯示裸Fe304納米粒子粒徑比修飾過的納米粒子大,這是由于表而活性劑GA的分散作用；SEM的結(jié)果也顯示Fe304納米粒子團(tuán)聚嚴(yán)重,而且粒徑較大,而MNP@GA與MNP@GA-CD34顆粒輪廓清晰,粒徑減小。因為難以保證抗體與納米粒子的一一結(jié)合,所以MNP@GA-CD34沒有MNP@GA分散均一,粒徑也偏大。VSM結(jié)果顯示三種樣品的飽和磁化強(qiáng)度呈逐漸降低趨勢。其次評價上述生物功能化的磁性納米粒子對體外誘導(dǎo)成功的EPCs的粘附,增殖和凋亡的影響以及標(biāo)記效果；結(jié)果表明：五組濃度為12、24、48、96、120μg/ml的MNP@GA-CD34標(biāo)記細(xì)胞時多結(jié)合在細(xì)胞膜表面。細(xì)胞的標(biāo)記效果呈現(xiàn)低濃度細(xì)胞鋪展良好,且當(dāng)濃度升高,細(xì)胞出現(xiàn)脫落。增殖和粘附結(jié)果表明當(dāng)MNP@GA-CD34濃度高于24μg/ml時,顯著抑制細(xì)胞正常增殖和粘附,而且24μg/ml的MNP@GA-CD34細(xì)胞組未出現(xiàn)明顯的凋亡現(xiàn)象。因此篩選出做磁場捕獲的MNP@GA-CD34最適濃度是24μg/ml。研究外加磁場短期和長期作用下,MNP@GA-CD34將EPCs富集于磁靶向部位的效果。結(jié)果顯示MNP@GA-CD34組的細(xì)胞數(shù)目比MNP@GA組和對照組多,而且長期施加磁場捕獲的數(shù)量也比短期顯著增加。在蠕動泵循環(huán)體系中,結(jié)合支架比較有無外加磁場時MNP@GA-CD34對細(xì)胞的捕獲情況：磁場組的支架表面比無磁場組粘附的細(xì)胞數(shù)量多。初步表明,MNP@GA-CD34對EPCs有捕獲效果。
【關(guān)鍵詞】：磁性納米粒子 沒食子酸 CD34抗體 捕獲 內(nèi)皮祖細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：西南交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R541.4;TB383.1
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-12
• 第一章 緒論12-25
• 1.1 引言12-13
• 1.2 內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)13-18
• 1.2.1 EPCs的來源及表面標(biāo)記物13-15
• 1.2.2 EPCs參與血管損傷的機(jī)制15-16
• 1.2.3 EPCs的捕獲16-18
• 1.4 磁性納米粒子18-23
• 1.4.1 合成18-19
• 1.4.2 磁性納米粒子的表面修飾與穩(wěn)定19-22
• 1.4.3 磁場和納米粒子在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用22-23
• 1.5 本課題研究目的及意義23
• 1.6 本課題研究內(nèi)容和技術(shù)路線23-25
• 1.6.1 研究內(nèi)容23-24
• 1.6.2 技術(shù)路線24-25
• 第二章 生物功能化的納米粒子的制備與表征25-36
• 2.1 制備穩(wěn)定劑修飾的Fe_3O_4納米粒子25-34
• 2.1.1 材料準(zhǔn)備25
• 2.1.2 實驗步驟25-28
• 2.1.3 樣品表征28-29
• 2.1.4 結(jié)果與討論29-34
• 2.2 本章小結(jié)34-36
• 第三章 生物功能化納米粒子對內(nèi)皮祖細(xì)胞功能活動的影響36-49
• 3.1 引言36-37
• 3.2 內(nèi)皮祖細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定37-40
• 3.2.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及誘導(dǎo)37-38
• 3.2.2 內(nèi)皮祖細(xì)胞的鑒定38-40
• 3.3 體外評價生物功能化納米粒子對內(nèi)皮祖細(xì)胞的影響40-47
• 3.3.1 MNP@GA-CD34對EPC的標(biāo)記40-41
• 3.3.2 MNP@GA-CD34對EPC增殖能力的影響41-42
• 3.3.3 MNP@GA-CD34對EPC粘附的影響42-43
• 3.3.4 MNP@GA-CD34對EPC凋亡的影響43
• 3.3.5 實驗結(jié)果及分析43-47
• 3.4 本章小結(jié)47-49
• 第四章 利用磁性納米粒子捕獲EPC49-58
• 4.1 引言49
• 4.2 MNP@CD-34抗體對EPC的識別49-50
• 4.2.1 材料準(zhǔn)備49-50
• 4.2.2 實驗步驟50
• 4.3 MNP@GA-CD34對EPCs的動態(tài)捕獲50-52
• 4.3.1 短期施加磁場對EPC的捕獲50-51
• 4.3.2 長期施加磁場對EPC的捕獲51-52
• 4.4 磁場和鐵支架結(jié)合,研究MNP@GA-CD34對細(xì)胞的捕獲能力52-53
• 4.4.1 材料準(zhǔn)備52
• 4.4.2 實驗步驟52-53
• 4.5 實驗結(jié)果及分析53-56
• 4.5.1 MNP@GA-CD34抗體對EPC的識別53
• 4.5.2 MNP@GA-CD34對EPCs的動態(tài)捕獲53-56
• 4.5.3 磁場和鐵支架結(jié)合,研究MNP@GA-CD34對細(xì)胞的捕獲56
• 4.6 本章小結(jié)56-58
• 結(jié)論58-60
• 致謝60-61
• 參考文獻(xiàn)61-69

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 羊欽裕;白海濤;;淺談內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管的再生[J];求醫(yī)問藥(下半月);2011年09期

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本文編號：571271