本文關(guān)鍵詞：ABCA1基因啟動(dòng)子區(qū)突變鑒定及其對(duì)豬血漿高密度脂蛋白水平的影響

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【摘要】：高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)在調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)血漿膽固醇水平的動(dòng)態(tài)平衡起到了關(guān)鍵性的作用。血漿中的膽固醇過(guò)量的累積會(huì)導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化。大量的實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)了 ATP 結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)介導(dǎo)了血漿HDL生成,將體內(nèi)過(guò)量的膽固醇和各類(lèi)脂蛋白轉(zhuǎn)化為磷脂從而形成HDL。血漿中高密度脂蛋白水平越高,一些心血管疾病的發(fā)生概率就越低。在大量的人類(lèi)疾病和動(dòng)物模型的研究中已經(jīng)證實(shí)了提高肝臟ABCA1的活性能夠增加血漿高密度脂蛋白的水平。本實(shí)驗(yàn)以ABCA1作為候選基因,挖掘ABCA1基因啟動(dòng)子區(qū)域的單核苷酸多態(tài)性(Single nucleotide polymorphism,SNP)位點(diǎn),分析其與ABCA1基因表達(dá)水平及血漿HDL水平的關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)取高低組HDL樣品各30個(gè)進(jìn)行DNA混池測(cè)序,將ABCA1啟動(dòng)子全部區(qū)域測(cè)序,進(jìn)行高低組之間比較。得到了在HDL高組和低組中等位基因分布模式存在差異的兩個(gè)SNP位點(diǎn),分別為c.-608AG和c.-418TA。采用等位基因特異性PCR技術(shù)對(duì)這兩個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行基因分型,通過(guò)對(duì)526個(gè)四元雜交豬的大群分型驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)位點(diǎn)是完全連鎖的,并且只形成了 G-A和A-T兩種單倍型。結(jié)果顯示,G-A/G-A基因型比A-T/A-T基因型擁有更高的血漿HDL水平。對(duì)兩組各12個(gè)不同基因型個(gè)體的ABCA1表達(dá)水平分析,結(jié)果表明G-A/G-A基因型表達(dá)水平顯著高于A-T/A-T基因型(p0.05)。通過(guò)雙熒光素酶活性報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)兩種單倍型啟動(dòng)子的活性,結(jié)果表明G-A啟動(dòng)子比A-T啟動(dòng)子具有更高的活性,二者差異顯著(P0.05)。點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)顯示,c.-418 TA是引起ABCA1轉(zhuǎn)錄活性發(fā)生變化的關(guān)鍵位點(diǎn),堿基T突變?yōu)锳能夠引起ABCA1基因啟動(dòng)子活性升高,并且促進(jìn)了 ABCA1基因表達(dá)水平升高,從而提高了血漿HDL水平。本研究通過(guò)鑒定ABCA1基因啟動(dòng)子區(qū)與血漿HDL水平相關(guān)的功能性變異,進(jìn)一步豐富了血漿HDL水平變異的遺傳學(xué)機(jī)制和理論,為預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis,As)和冠心病的治療提供了新的思路。
【關(guān)鍵詞】：HDL ABCA1 啟動(dòng)子 SNP
【學(xué)位授予單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R54
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 縮略詞10-12
• 引言12-13
• 第一章 文獻(xiàn)綜述13-25
• 1 高密度脂蛋白研究概況13-20
• 1.1 高密度脂蛋白的分級(jí)13-15
• 1.2 高密度脂蛋白的蛋白組15-16
• 1.3 高密度脂蛋白的生成與代謝16-18
• 1.4 高密度脂蛋白的作用18-20
• 2 ABCA1的研究概括20-25
• 2.1 ABCA1的結(jié)構(gòu)20-21
• 2.2 ABCA1的功能21-22
• 2.3 ABCA1介導(dǎo)RCT22-23
• 2.4 ABCA1的調(diào)控23-25
• 第二章 ABCA1基因調(diào)控區(qū)多態(tài)性篩選25-39
• 1 實(shí)驗(yàn)材料25-27
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物25
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑25-26
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)溶劑配方26
• 1.4 主要儀器及實(shí)驗(yàn)器械26-27
• 1.5 網(wǎng)絡(luò)資源與生物信息學(xué)軟件27
• 2 實(shí)驗(yàn)方法27-31
• 2.1 豬高密度脂蛋白的測(cè)定27
• 2.2 ABCA1基因表達(dá)量與豬高密度脂蛋白的相關(guān)性27-29
• 2.3 ABCA1基因啟動(dòng)子區(qū)SNP的篩選29-30
• 2.4 突變位點(diǎn)基因分型30-31
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-36
• 3.1 豬ABCA1基因啟動(dòng)子的獲取31
• 3.2 ABCA1基因表達(dá)量與HDL的相關(guān)性31-33
• 3.3 ABCA1基因啟動(dòng)子區(qū)SNP位點(diǎn)的篩選33-34
• 3.4 SNP位點(diǎn)基因分型34-36
• 4 討論36-39
• 第三章 ABCA1基因調(diào)控區(qū)SNP位點(diǎn)對(duì)啟動(dòng)子活性的影響39-57
• 1 實(shí)驗(yàn)材料39-40
• 1.1 實(shí)驗(yàn)樣品39
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑39
• 1.3 主要儀器及實(shí)驗(yàn)器械39-40
• 1.4 網(wǎng)絡(luò)資源與生物信息學(xué)軟件40
• 2 實(shí)驗(yàn)方法40-50
• 2.1 構(gòu)建pGL3-GA/AT兩種雙熒光素酶報(bào)告載體40-45
• 2.2 構(gòu)建點(diǎn)突變雙熒光素酶報(bào)告載體45-47
• 2.3 雙熒光素酶報(bào)告載體的啟動(dòng)子活性分析47-50
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果50-55
• 3.1 菌液PCR鑒定構(gòu)建載體50-51
• 3.2 雙酶切鑒定構(gòu)建載體51
• 3.3 測(cè)序驗(yàn)證點(diǎn)突變重組載體51-52
• 3.4 ABCA1不同單倍型啟動(dòng)子活性分析52-54
• 3.5 轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測(cè)54-55
• 4 討論55-57
• 全文結(jié)論57-59
• 參考文獻(xiàn)59-71
• 致謝71-73
• 碩士期間發(fā)表的論文73

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1 趙慧,鄭文嶺,崔東,馬文麗;泛素啟動(dòng)子的研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué);2003年12期

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4 吳志香;邵敬偉;袁鳳山;;胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1啟動(dòng)子的克隆與序列分析[J];生物技術(shù)通訊;2005年06期

5 王秀亮;陳衛(wèi);梁光萍;陳建;蘇踴躍;楊程;羅向東;;人β1整合素啟動(dòng)子核心啟動(dòng)序列初步分析[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2009年01期

6 周天鴻,李月琴,朱嘉明,云泓若,肖小敏;真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)啟動(dòng)T7啟動(dòng)子起始的研究[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2000年03期

7 朱立紅;倪培華;應(yīng)雅韻;張潔;金磊;樊綺詩(shī);;血脂與肝脂酶啟動(dòng)子514C/T多態(tài)性的關(guān)系[J];診斷學(xué)理論與實(shí)踐;2005年06期

8 朱愛(ài)華,彭大新,劉秀梵,張如寬;雞痘病毒載體啟動(dòng)子的優(yōu)化[J];病毒學(xué)報(bào);2000年04期

9 丁清泉,戴順英;σ~(38)識(shí)別的啟動(dòng)子-35區(qū)核酸序列特征研究[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);1999年01期

10 黃小東,張俊武,陽(yáng)學(xué)賢,王以弘,趙華路;人Aγ-珠蛋白基因-173T→C突變對(duì)啟動(dòng)子功能的影響[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);1999年04期

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1 徐昌杰;胡桂兵;張上隆;;果實(shí)成熟特異啟動(dòng)子研究進(jìn)展[A];中國(guó)園藝學(xué)會(huì)第五屆青年學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2002年

2 蕭鳳回;段承俐;薛剛平;;快速檢測(cè)干旱和脫水可誘導(dǎo)植物啟動(dòng)子瞬間表達(dá)特性的方法[A];中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)七屆一次青年研討會(huì)暨上海高校模式生物E——研究院第一屆模式生物學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2005年

3 龍海濤;李洪清;李玲;;藍(lán)豬兒捕獲啟動(dòng)子系統(tǒng)建立[A];2006中國(guó)植物細(xì)胞發(fā)育與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

4 楊俊;劉繼紅;郭小林;王濤;王軍凱;陳美元;王少剛;葉章群;;人腎組織GGCX基因啟動(dòng)子區(qū)克隆與活性分析[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

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6 陳慧峰;林育純;林麗娜;方飛;陳雯;林忠寧;;蛋白磷酸酶2A不同亞基基因啟動(dòng)子區(qū)遺傳變異性位點(diǎn)篩查[A];遺傳學(xué)進(jìn)步與人口健康高峰論壇論文集[C];2007年

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10 王小華;姜廣水;吳欽貞;姜萍萍;劉浩;江浩;;二價(jià)雙啟動(dòng)子防齲DNA疫苗的構(gòu)建及鑒定[A];2007年第七次全國(guó)牙體牙髓病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

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1 記者　錢(qián)錚;人類(lèi)DNA上啟動(dòng)子數(shù)量可能超過(guò)十九萬(wàn)[N];人民日?qǐng)?bào);2006年

2 錢(qián)錚;人類(lèi)DNA上啟動(dòng)子數(shù)量可能超過(guò)19萬(wàn)個(gè)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

3 ;兒童系統(tǒng)性紅斑狼瘡中白細(xì)胞介素－10啟動(dòng)子區(qū)單核苷酸多態(tài)性對(duì)自身表達(dá)水平的影響[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

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1 馬洪鑫;ZHX2調(diào)控脂蛋白脂酶參與脂肪肝及肝細(xì)胞肝癌的作用及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

2 宋劍平;基質(zhì)金屬蛋白酶-3基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)與散發(fā)性腦動(dòng)靜脈畸形的遺傳易感性分析與功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

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7 楊予濤;一個(gè)光合組織特異表達(dá)啟動(dòng)子的克隆、功能分析及其轉(zhuǎn)錄因子的鑒定[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

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本文編號(hào)：570036