本文關(guān)鍵詞：黃芩苷對(duì)OX-LDL干預(yù)刺激后人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞及VE-鈣粘蛋白表達(dá)水平影響的作用機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景隨著我國(guó)社會(huì)老齡人口的增加,動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis, AS)導(dǎo)致的心腦血管疾病的發(fā)病率和死亡率呈逐年上升的趨勢(shì)。AS是一種由多因素綜合作用導(dǎo)致的疾病,是缺血性心腦血管疾病的重要病理生理基礎(chǔ),發(fā)病機(jī)制復(fù)雜。近年來大量的基礎(chǔ)和臨床研究認(rèn)為,AS是一種慢性炎癥性疾病,炎癥是導(dǎo)致AS斑塊發(fā)生、發(fā)展及進(jìn)一步演變的重要因素,各種炎癥因子如IL-6、粘附分子如PEC AM-1在促進(jìn)炎癥發(fā)生發(fā)展,從而導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷,在動(dòng)脈粥樣硬化過程中發(fā)揮重要作用。血管內(nèi)皮-鈣粘蛋白(vasoendothelial-cadherin, VE-cadherin)屬于鈣粘蛋白家族成員,它存在于不同類型血管的內(nèi)皮細(xì)胞,可與細(xì)胞內(nèi)介導(dǎo)蛋白相互作用而形成血管內(nèi)皮-鈣粘附素/連環(huán)蛋白復(fù)合體。它在維持內(nèi)皮細(xì)胞的完整性及調(diào)節(jié)微血管內(nèi)皮通透性方面扮演了重要角色。新近發(fā)現(xiàn)VE-鈣粘蛋白(VE-cadherin)通過介導(dǎo)炎癥反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展病理生理過程中起到關(guān)鍵作用。 黃芩是(Scutellaria baicalensis Georgi)臨床常用藥,黃芩苷(baicalin)是從其干燥根中提取的一種黃酮類單體化合物,是黃芩及其制劑的主要質(zhì)量控制成分。據(jù)國(guó)內(nèi)外一系列研究報(bào)道,黃芩苷具有抗炎、抑制血管平滑肌的增殖及抗氧化、調(diào)節(jié)免疫等多種藥理作用,本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),黃芩苷具有調(diào)節(jié)血脂、恢復(fù)凝血-纖溶系統(tǒng)精細(xì)平衡的作用。從理論上來講,抗炎、抗氧化、調(diào)節(jié)血脂,抑制血管平滑肌的增殖都使黃芩苷可作為預(yù)防AS發(fā)生發(fā)展的有效天然藥物應(yīng)用。但是黃芩苷對(duì)AS發(fā)生發(fā)展的干預(yù)作用及具體機(jī)制如何,動(dòng)脈粥樣硬化疾病的炎癥狀態(tài)對(duì)VE-鈣粘蛋白的表達(dá)有何影響,黃芩苷抗炎治療后對(duì)其表達(dá)水平有無影響,國(guó)內(nèi)外鮮有報(bào)道。本研究擬通過體外干預(yù)ox-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞,明確黃芩苷的抗炎機(jī)制內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)亡干預(yù)作用及其對(duì)VE-鈣粘蛋白表達(dá)水平的影響,并進(jìn)一步探討其在AS發(fā)生發(fā)展中的作用,為天然藥物單體在動(dòng)脈粥樣硬化疾病的防治提供新的理論依據(jù)。 目的：通過培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,給予高低不同劑量組OX-LDL刺激,再給予高低劑量黃芩苷干預(yù)后,測(cè)定各組炎癥因子(hs-CRP、TNF-α、IL-6)和VE-cadherin及血管內(nèi)皮粘附分子(ICAM-1和PEC AM-1)的陽(yáng)性表達(dá)水平,分析內(nèi)皮細(xì)胞損傷發(fā)生發(fā)展過程中以及黃芩苷干預(yù)后上述指標(biāo)的變化；探討VE-鈣粘蛋白在內(nèi)皮損傷發(fā)生發(fā)展中作用及黃芩苷對(duì)內(nèi)皮損傷的干預(yù)作用的可能機(jī)制。 方法：將培養(yǎng)瓶置于敷箱中。三天后換液一次,用無菌吸管吸出之前的培養(yǎng)液,再向培養(yǎng)瓶中加入新的培養(yǎng)液5m1,待細(xì)胞密度達(dá)90%左右后進(jìn)行細(xì)胞傳代。光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況,待細(xì)胞生長(zhǎng)融合至90%左右后,重復(fù)上一步操作步驟,將培養(yǎng)的細(xì)胞按照1：2的比例傳代繼續(xù)培養(yǎng)。待細(xì)胞傳至第三代后,將內(nèi)皮細(xì)胞分別接種到6孔板中,以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。取一塊六孔板接種,加入等量生理鹽水,不做其他處理,列為正常對(duì)照組。模型組分為(10ug/ml、25ug/ml、50ug/ml)三個(gè)濃度加入ox-LDL,黃芩苷治療組分三個(gè)濃度(10ug/ml、25ug/mk、50ug/ml)預(yù)先給與干預(yù),6h后加入ox-LDL(濃度50ug/ml),24h后吸取細(xì)胞培養(yǎng)上清液檢測(cè)VE-鈣粘蛋白的表達(dá)及血清炎癥因子(Hs-CRP、TNF-α、IL-6)、粘附分子(ICAM-1、PECAM-1)等指標(biāo)濃度；使用流式細(xì)胞檢測(cè)儀檢測(cè)三個(gè)組中細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果(1)試驗(yàn)結(jié)束后,細(xì)胞培養(yǎng)液中VE-鈣粘蛋白表達(dá)及炎癥因子(Hs-CRP、TNF-α、IL-6)、粘附分子(ICAM-1、PECAM-1)水平與正常組對(duì)比陽(yáng)性表達(dá)明顯升高滬0.01或p0.05),且與ox-LDL濃度成正比；黃芩苷處理后,治療組的細(xì)胞培養(yǎng)液中VE-鈣粘蛋白表達(dá)及炎癥因子(Hs-CRP、TNF-α、IL-6)、粘附分子(ICAM-1、PECAM-1)水平顯著降低(p＜0.01或P005),且與黃芩苷濃度呈反比；三個(gè)組中,與正常對(duì)照組相比,模型組細(xì)胞凋亡顯著增加(p0.05),且與ox-LD1濃度成正相關(guān)；(2)與正常對(duì)照組相比,治療組內(nèi)皮細(xì)胞凋亡顯著增加(p0.05)；與模型組相比,治療組內(nèi)皮細(xì)胞凋亡顯著降低(p0.05),且與黃芩苷濃度成反比。 結(jié)論黃琴苷對(duì)ox-LDI誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷有一定的保護(hù)作用,其機(jī)制可能是通過抑制炎癥因子(Hs-CRP、TNF-α、IL-6)、粘附分子(ICAM-1、PECAM-1)以及VE-鈣粘蛋白的表達(dá),從而減輕內(nèi)皮細(xì)胞損傷、抑制細(xì)胞凋亡,保持血管內(nèi)皮細(xì)胞的完整性來實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：動(dòng)脈粥樣硬化 炎癥 內(nèi)皮細(xì)胞 黃芩苷 VE-鈣粘蛋白
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R543.5
【目錄】：

• 第一部分6-44
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 符號(hào)說明11-12
• 引言12-14
• 材料與方法14-18
• 結(jié)果18-20
• 討論20-32
• 結(jié)論32-33
• 附表附圖33-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 第二部分44-51
• 綜述44-51
• 摘要44-49
• 參考文獻(xiàn)49-51
• 致謝51-52
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文52-53
• 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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10 馬s，

本文編號(hào)：442462