IL-22對HUVECs細胞因子表達、增殖功能及屏障功能的影響
發(fā)布時間:2017-06-10 03:05
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【摘要】:目的:通過檢測IL-22(白細胞介素22)在細胞因子表達、細胞增殖功能以及屏障功能方面對HUVECs(人臍靜脈內(nèi)皮細胞)的影響,來探討IL-22對血管炎發(fā)生發(fā)展的影響。方法:1.用半定量RT-PCR技術(shù)檢測IL-22R1在HUVECs中的表達情況。2.實時定量PCR技術(shù)以及Western blot技術(shù)分別用于檢測IL-22作用前后IL-6,IL-8,CCL2,ICAM1,VCAM1,CXCR4及CCL20等細胞因子在HUVECs中m RNA水平以及蛋白質(zhì)水平的表達變化情況。3.通過CCK8實驗檢測不同濃度的IL-22作用前后HUVECs的增殖能力變化情況與不同濃度的LPS對HUVECs的增殖抑制情況。另外將不同濃度的IL-22作用于HUVECs預(yù)處理24h后,再將等濃度的LPS作用于細胞24h,最后用CCK8實驗來檢測IL-22對LPS的增殖抑制是否有對抗作用。4.用FITC標記的右旋糖酐通過HUVE單層細胞的滲透率來檢測不同濃度的IL-22作用前后HUVECs的屏障功能變化情況以及不同濃度的LPS對HUVECs屏障功能的影響。另外將不同濃度的IL-22作用于HUVECs預(yù)處理24h后,再將等濃度的LPS作用于細胞24h,最后用FITC標記的右旋糖酐通過HUVE單層細胞的滲透率來檢測IL-22對LPS的屏障破壞是否有對抗作用。結(jié)果:1.IL-22R1 m RNA在HUVECs中持續(xù)表達。2.IL-22作用于HUVECs后,趨化因子CCL2和CCL20的表達在m RNA水平及蛋白質(zhì)水平均可見明顯增加,而炎癥因子IL-6及IL-8的表達則未見明顯變化。3.IL-22作用于HUVECs后,HUVECs的增殖率得到顯著提高。LPS可以顯著抑制HUVECs的增殖率。被IL-22預(yù)處理過的HUVECs其增殖率不受LPS的抑制。4.IL-22作用于HUVECs后,HUVECs的滲透率下降,occludin的表達增強。LPS可以提高HUVECs的滲透率并降低occludin的表達。被IL-22預(yù)處理過的HUVECs其滲透率受LPS的影響減少,occludin的表達情況同單獨用IL-22作用后相似。結(jié)論:1.IL-22的受體IL-22R1在HUVECS中廣泛表達,表明HUVECs是IL-22作用的靶細胞之一。2.IL-22還可以提高趨化因子CCL2與CCL20的表達,卻對炎癥因子IL-6及IL-8的表達無明顯影響,表明IL-22在炎癥反應(yīng)主要起到對抗炎細胞的趨化作用而非促炎作用。3.IL-22不僅可以提高HUVECs的增殖能力,還可以抑制由LPS誘導(dǎo)的HUVECs增殖抑制。4.IL-22不僅可以通過增強occludin的表達來提高HUVECs的屏障功能,還可以通過該機制對抗由LPS引起的HUVECs屏障功能下降。
【關(guān)鍵詞】:白細胞介素22 炎癥 脂多糖 血管炎 白塞氏病
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R543
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對照4-5
- 中文摘要5-8
- 英文摘要8-10
- 前言10-11
- 第一部分 IL-22R1在HUVECs中的表達11-17
- 1 材料與方法11-16
- 2 結(jié)果16
- 3 討論16-17
- 第二部分 IL-22 對HUVECs中細胞因子表達的影響17-26
- 1 材料與方法17-23
- 2 結(jié)果23-25
- 3 討論25-26
- 第三部分 IL-22 對HUVECs增殖功能的影響26-32
- 1 材料與方法26-28
- 2 結(jié)果28-30
- 3 討論30-32
- 第四部分 IL-22 對HUVECs屏障功能的影響32-40
- 1 材料與方法32-36
- 2 結(jié)果36-39
- 3 討論39-40
- 全文總結(jié)40-41
- 參考文獻41-46
- 文獻綜述:Th22在白塞氏病中的研究進展46-54
- 參考文獻50-54
- 致謝54-55
- 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文及成果55
【相似文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 林芳珊;;人體八大屏障功能趣談[J];健康生活;2007年06期
2
本文編號:437243
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