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IL-22對(duì)HUVECs細(xì)胞因子表達(dá)、增殖功能及屏障功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-06-10 03:05

  本文關(guān)鍵詞:IL-22對(duì)HUVECs細(xì)胞因子表達(dá)、增殖功能及屏障功能的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:通過(guò)檢測(cè)IL-22(白細(xì)胞介素22)在細(xì)胞因子表達(dá)、細(xì)胞增殖功能以及屏障功能方面對(duì)HUVECs(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)的影響,來(lái)探討IL-22對(duì)血管炎發(fā)生發(fā)展的影響。方法:1.用半定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)IL-22R1在HUVECs中的表達(dá)情況。2.實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)以及Western blot技術(shù)分別用于檢測(cè)IL-22作用前后IL-6,IL-8,CCL2,ICAM1,VCAM1,CXCR4及CCL20等細(xì)胞因子在HUVECs中m RNA水平以及蛋白質(zhì)水平的表達(dá)變化情況。3.通過(guò)CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度的IL-22作用前后HUVECs的增殖能力變化情況與不同濃度的LPS對(duì)HUVECs的增殖抑制情況。另外將不同濃度的IL-22作用于HUVECs預(yù)處理24h后,再將等濃度的LPS作用于細(xì)胞24h,最后用CCK8實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)IL-22對(duì)LPS的增殖抑制是否有對(duì)抗作用。4.用FITC標(biāo)記的右旋糖酐通過(guò)HUVE單層細(xì)胞的滲透率來(lái)檢測(cè)不同濃度的IL-22作用前后HUVECs的屏障功能變化情況以及不同濃度的LPS對(duì)HUVECs屏障功能的影響。另外將不同濃度的IL-22作用于HUVECs預(yù)處理24h后,再將等濃度的LPS作用于細(xì)胞24h,最后用FITC標(biāo)記的右旋糖酐通過(guò)HUVE單層細(xì)胞的滲透率來(lái)檢測(cè)IL-22對(duì)LPS的屏障破壞是否有對(duì)抗作用。結(jié)果:1.IL-22R1 m RNA在HUVECs中持續(xù)表達(dá)。2.IL-22作用于HUVECs后,趨化因子CCL2和CCL20的表達(dá)在m RNA水平及蛋白質(zhì)水平均可見(jiàn)明顯增加,而炎癥因子IL-6及IL-8的表達(dá)則未見(jiàn)明顯變化。3.IL-22作用于HUVECs后,HUVECs的增殖率得到顯著提高。LPS可以顯著抑制HUVECs的增殖率。被IL-22預(yù)處理過(guò)的HUVECs其增殖率不受LPS的抑制。4.IL-22作用于HUVECs后,HUVECs的滲透率下降,occludin的表達(dá)增強(qiáng)。LPS可以提高HUVECs的滲透率并降低occludin的表達(dá)。被IL-22預(yù)處理過(guò)的HUVECs其滲透率受LPS的影響減少,occludin的表達(dá)情況同單獨(dú)用IL-22作用后相似。結(jié)論:1.IL-22的受體IL-22R1在HUVECS中廣泛表達(dá),表明HUVECs是IL-22作用的靶細(xì)胞之一。2.IL-22還可以提高趨化因子CCL2與CCL20的表達(dá),卻對(duì)炎癥因子IL-6及IL-8的表達(dá)無(wú)明顯影響,表明IL-22在炎癥反應(yīng)主要起到對(duì)抗炎細(xì)胞的趨化作用而非促炎作用。3.IL-22不僅可以提高HUVECs的增殖能力,還可以抑制由LPS誘導(dǎo)的HUVECs增殖抑制。4.IL-22不僅可以通過(guò)增強(qiáng)occludin的表達(dá)來(lái)提高HUVECs的屏障功能,還可以通過(guò)該機(jī)制對(duì)抗由LPS引起的HUVECs屏障功能下降。
【關(guān)鍵詞】:白細(xì)胞介素22 炎癥 脂多糖 血管炎 白塞氏病
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R543
【目錄】:
  • 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照4-5
  • 中文摘要5-8
  • 英文摘要8-10
  • 前言10-11
  • 第一部分 IL-22R1在HUVECs中的表達(dá)11-17
  • 1 材料與方法11-16
  • 2 結(jié)果16
  • 3 討論16-17
  • 第二部分 IL-22 對(duì)HUVECs中細(xì)胞因子表達(dá)的影響17-26
  • 1 材料與方法17-23
  • 2 結(jié)果23-25
  • 3 討論25-26
  • 第三部分 IL-22 對(duì)HUVECs增殖功能的影響26-32
  • 1 材料與方法26-28
  • 2 結(jié)果28-30
  • 3 討論30-32
  • 第四部分 IL-22 對(duì)HUVECs屏障功能的影響32-40
  • 1 材料與方法32-36
  • 2 結(jié)果36-39
  • 3 討論39-40
  • 全文總結(jié)40-41
  • 參考文獻(xiàn)41-46
  • 文獻(xiàn)綜述:Th22在白塞氏病中的研究進(jìn)展46-54
  • 參考文獻(xiàn)50-54
  • 致謝54-55
  • 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及成果55

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 林芳珊;;人體八大屏障功能趣談[J];健康生活;2007年06期

2

本文編號(hào):437243


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